Porozumění "číslu průjezdu"

Pojem "číslo pasáže" je pro buněčné kultury zásadní a označuje počet subkulturací nebo převodů buněčné linie do čerstvého růstového média po jejím prvním oživení z kryokonzervace nebo po obdržení z referenční buněčné banky. Tato metrika je klíčová pro sledování vývoje a historie buněčné kultury.

Přehled procesů

• V běžné praxi buněčných kultur se buňky po dosažení určité hustoty přesunou do nového média, aby se udržel jejich růst a zabránilo se jejich nadměrné fluktuaci. Každý takový přenos se zaznamenává jako pasáž.
• Tradičně, když jsme obdrželi buněčnou linii například v pasáži 60 od vkladatele, pokračovali jsme od tohoto čísla pasáže a zvyšovali jsme ho s každou subkulturou. Tato praxe, při zachování historické nitky, často vedla k vysokým číslům pasáží od samého počátku. Vzhledem k rozsáhlému a často desítky let trvajícímu používání některých buněčných linií, jako je například linie HeLa založená v roce 1951, není možné určit celkový počet pasáží od vzniku buněčné linie.
• Abychom zvýšili přehlednost a kvalitu našich postupů při kultivaci buněk, přehodnotili jsme tento přístup na začátku roku 2023. Nyní při iniciaci kultury z nové lahvičky, bez ohledu na číslo pasáže od vkladatele, resetujeme a začínáme počítat znovu od první pasáže pro každou vyrobenou šarži

Odůvodnění

Pasážování je zásadní postup pro zajištění zdraví a použitelnosti buněčných kultur pro výzkum. Když se buňky přemnoží, dochází u nich ke kontaktní inhibici, což snižuje rychlost jejich proliferace, což může nepříznivě ovlivnit výsledky experimentů. Aby se tyto problémy zmírnily, společnost Cytion provádí přísnou kontrolu hustoty buněk, při které dochází k subkultivaci, a tím udržuje nízký počet pasáží během výroby svých buněčných linií. Toto opatření pomáhá předcházet nepříznivým účinkům nadměrného pasážování, jako jsou morfologické anomálie, změny rychlosti růstu a genetický drift, které mohou způsobit, že se buňky budou výrazně lišit od svého původního stavu. Prodloužená doba subkultivace může také zvýšit riziko mikrobiální kontaminace.

Náš příslib

Zajišťujeme, aby se buňky dodávané výzkumníkům co nejvíce blížily původnímu genetickému složení a fenotypovým charakteristikám, což zvyšuje spolehlivost experimentálních údajů. Kromě toho společnost Cytion pečlivě dokumentuje každou pasáž, čímž přispívá ke sledovatelnosti a reprodukovatelnosti výzkumu, což je závazek, který odráží vysoké standardy praxe v oblasti buněčných kultur. Výzkumníkům doporučujeme, aby vedli přesné záznamy o číslech pasáží, a to jak na kultivačních nádobách, tak ve svých laboratorních zápisnících, jako referenci o stavu a historii svých buněčných kultur.