Buňky 4T1 – zásadní poznatky z výzkumu buněk rakoviny prsu a jejich využití
4T1 je transplantovatelná myší buněčná linie rakoviny prsu. Je široce používána jako geneticky identický in vitro nádorový model pro výzkum rakoviny prsu u lidí. Buňky 4T1 jsou vysoce invazivní a tumorigenní; mají tendenci metastazovat z primárního ložiska nádoru v mléčné žláze do jiných míst, včetně jater, lymfatických uzlin, plic, kostí a mozku, a jsou proto ideální pro studium metastázování rakoviny prsu [1].
- Růstové médium
- K kultivaci buněk 4T1 se používá médium RPMI 1640. Pro ideální růst buněk se do kultivačního média přidává 10 % fetálního bovinního séra (FBS), 2,0 g/l NaHCO3 a 2,1 mM stabilního glutaminu.
- Doba zdvojnásobení
- Průměrná doba zdvojnásobení populace u buněk rakoviny prsu 4T1 je 14 hodin.
- Typ růstu
- 4T1 je adhezivní buněčná linie.
- Úroveň biologické bezpečnosti
- BSL-1
- K dispozici u
- Cytion — Objednat 4T1
- Obecné charakteristiky a původ buněk 4T1
- Informace o kultivaci buněčné linie 4T1
- Buněčná linie T1: Výhody a nevýhody
- Nákup buněčné linie 4T1: vysoce kvalitní model rakoviny prsu
- Buněčná linie T1: Aplikace ve výzkumu rakoviny
- Buňky 4T1: Výzkumné publikace
- Zdroje pro buněčnou linii 4T1: protokoly, videa a další
- Často kladené otázky týkající se buněčné linie 4T1
- Reference
- Často kladené otázky
Obecné charakteristiky a původ buněk 4T1
Před prací s buněčnou linií je nezbytné znát její původ a obecné charakteristiky. V této části uvádíme základní informace o buňkách rakoviny prsu 4T1. Například: Co jsou buňky 4T1? Jaké jsou charakteristiky buněčné linie 4T1? Jaký je původ buněčné linie 4T1? Jaká je morfologie buněčné linie 4T1?
- 4T1 je buněčná linie prsního nádoru pocházející z prsního nádoru, který spontánně vznikl u myšího kmene BALB/c. Tyto vysoce invazivní a tumorigenní buňky velmi věrně napodobují chování lidského karcinomu prsu, pokud jde o růst a metastatické šíření. Konkrétně se nádorový model 4T1 zabývá trojnásobně negativním karcinomem prsu (TNBC).
- Buňky 4T1 jsou adhezivní a mají morfologii podobnou epitelovým buňkám.
Buněčná linie 4T1 vs. EMT-6
4T1 a EMT-6 jsou neimunogenní myší buněčné modely pro studium trojnásobně negativního karcinomu prsu. Zde jsou buňky 4T1 agresivnější a invazivnější než buňky EMT-6, které mají méně invazivní vlastnosti [2].
Buňky 4T1 vs. 4T07
4T07 je také myší nádorová buněčná linie. Hlavní rozdíl mezi buňkami 4T1 a 4T07 spočívá v tom, že buňky 4T1 mohou opustit místo primárního nádoru a šířit se, čímž vytvářejí viditelné sekundární metastázy, zatímco buňky 4T07 nemohou vytvářet viditelné metastázy, i když opustí místo primárního nádoru [3].
Informace o kultivaci buněčné linie 4T1
Buněčná linie 4T1 rakoviny prsu nabízí široké možnosti využití ve výzkumu v biomedicínské oblasti. Pro kultivaci těchto buněk byste si měli prostudovat následující klíčové body popisující: co je to doba zdvojnásobení buněk 4T1? Jak se buňky 4T1 kultivují? Jaká je hustota výsevu buněk 4T1?
Klíčové body pro kultivaci buněk 4T1
Doba zdvojnásobení:
Průměrná doba zdvojnásobení populace u buněk rakoviny prsu 4T1 je 14 hodin.
Adhezivní nebo v suspenzi:
4T1 je adhezivní buněčná linie.
Poměr subkultivace:
Pro buněčnou linii trojitého negativního karcinomu prsu 4T1 se doporučuje poměr rozdělení 1:6 a 1:8. Pro rozdělení se buňky propláchnou PBS a inkubují s enzymem Accutase po dobu 8 až 10 minut. Disociované buňky se shromáždí odstředěním a resuspendují se v čerstvém médiu. Resuspendované buňky se rozdělí do nové baňky pro růst.
Růstové médium:
Pro kultivaci buněk 4T1 se používá médium RPMI 1640. Pro ideální růst buněk se do kultivačního média přidává 10 % fetálního bovinního séra (FBS), 2,0 g/l NaHCO3 a 2,1 mM stabilního glutaminu.
Podmínky růstu:
Nádorové buňky 4T1 se uchovávají ve zvlhčeném inkubátoru při teplotě 37 °C s přívodem 5 % CO2.
Skladování:
Buňky 4T1 by měly být skladovány při teplotě pod -150 °C, tj. v elektrickém mrazáku nebo v parní fázi kapalného dusíku, aby byla zachována životaschopnost buněk.
Proces zmrazování a médium:
Pro buněčnou linii 4T1 se doporučuje CM-1 nebo CM-ACF. Upřednostňuje se metoda pomalého zmrazování, protože chrání životaschopnost buněk tím, že umožňuje postupný pokles teploty o 1 °C.
Proces rozmrazování:
Lahvičku se zmrazenými buňkami se na několik sekund umístí do vodní lázně o teplotě 37 °C, dokud buňky nerozmrznou a nezůstane pouze malá hrudka ledu. Tyto buňky se resuspendují v čerstvém médiu a nalijí do baňky pro kultivaci. Po 24 hodinách inkubace se médium vymění, aby se odstranily složky mrazicího média.
Úroveň biologické bezpečnosti:
Pro kultivaci buněk rakoviny prsu 4T1 se doporučuje laboratoř s úrovní biologické bezpečnosti 1.
Buněčná linie T1: Výhody a nevýhody
Tato část článku se bude zabývat výhodami a nevýhodami spojenými s metastatickým modelem 4T1.
Výhody
Hlavní výhody buněčné linie 4T1 jsou:
- Tumorigenita:
4T1 je vysoce tumorigenní buněčná linie. Tyto buňky mají schopnost vytvořit syngenní myší model 4T1 pro studium rakoviny prsu, když jsou injikovány myši. Model 4T1 se proto ideálně používá ke studiu vývoje, růstu a metastázování nádorů. Kromě toho je užitečný pro screening a hodnocení léčivých přípravků.
- In vitro metastatický model:
Model 4T1 má přirozenou tendenci k metastázování, což umožňuje výzkumníkům účinně zkoumat základní mechanismy a cesty zapojené do procesu metastázování. Buňky 4T1 jsou navíc rezistentní na 6-thioguanin. To pomáhá při účinné detekci mikrometastatických buněk s vyšší přesností ve srovnání s jinými modely, protože eliminuje nutnost vážení cílových orgánů a počítání uzlin.
Nevýhody
Nevýhodou spojenou s buněčnou linií 4T1 je:
- Agresivita/rychlá rychlost růstu:
Buněčná linie 4T1 je vysoce agresivní buněčná linie trojnásobně negativního karcinomu prsu. Vzhledem k rychlému růstu je použití této buněčné linie v dlouhodobých experimentech a kontrola experimentálních proměnných náročná.
Objednejte si buněčnou linii 4T1: vysoce kvalitní model rakoviny prsu
Buněčná linie 4T1: Využití ve výzkumu rakoviny
Myší modelová buněčná linie 4T1 je cenným výzkumným nástrojem pro studium biologie rakoviny a hodnocení nových léčebných postupů. Hlavní aplikace buněk 4T1 jsou uvedeny zde:
Biologie rakoviny
Buněčná linie 4T1 se široce používá ke studiu vývoje a růstu rakoviny. Jedná se o ideální in vitro model pro zkoumání a prozkoumání různých buněčných a molekulárních mechanismů zapojených do progrese nádoru a metastázování. Kromě toho může odhalit roli buněčných signálních drah, mikroprostředí a genové exprese v těchto procesech. Výzkum provedený v roce 2019 využil buňky 4T1 k odhalení mechanismů, které stojí za invazí a migrací rakovinných buněk. Výsledky odhalily, že se na nich podílejí geny STAT3, MMP2 a MMP9 a že inhibice těchto genů může výrazně omezit migraci a invazi rakovinných buněk [4]. Podobné studie také poukázaly na několik dalších signálních drah zapojených do vývoje nádoru a metastázování.
Model 4T1 navíc hraje klíčovou roli v porozumění mikroprostředí rakoviny prsu, včetně infiltrace imunitních buněk a růstu primárního nádoru. Studie zaměřené na mikroprostředí nádoru 4T1 poskytly významné poznatky o roli imunitních buněk a cytokinů, jako je exprese CXCL13, v progresi nádoru. Model také pomáhá při výzkumu metastatických nik a metastázování nádorů, zejména u rakoviny prsu v pokročilém stadiu, kde je rozšířená kolonizace karcinomem prsu.
Výzkum léčby rakoviny
Buněčná linie 4T1 se široce používá ve výzkumu léčby rakoviny pro screening a hodnocení nových léčebných postupů. Jedna studie zkoumala cytotoxický potenciál zelených syntetizovaných nanočástic železa z extraktu rozmarýnu (Rosemary-FeNPs) a čistého extraktu rozmarýnu na buněčné linii 4T1. Výsledky výzkumu naznačují, že Rosemary-FeNPs jsou slibnější než čistý extrakt [5]. Podobně studie provedená v roce 2021 zkoumala protinádorový potenciál extraktu ze zázvoru na buňkách rakoviny prsu 4T1 a myším modelu 4T1 [6].
Kromě přírodních extraktů se buněčná linie 4T1 používá k hodnocení účinnosti tradičních chemoterapeutických látek. Například výzkum zahrnující kombinaci cisplatiny s jinými terapiemi prokázal zvýšenou smrt nádorových buněk a sníženou progresi nádoru v modelu 4T1. Zavedení luciferázy světlušky do buněk 4T1 umožnilo zobrazování růstu nádoru a metastatického fenotypu v reálném čase, což usnadňuje hodnocení dopadu různých léčebných postupů.
Kromě toho odolnost buněčné linie 4T1 vůči 6-thioguaninu usnadnila studie mikrometastatických buněk a zlepšila detekci a analýzu metastáz. Tato buněčná linie také hraje klíčovou roli ve studiu protinádorové imunity a účinků imunoterapie, zejména v kontextu ortotopických myších modelů, kde mohou výzkumníci věrně napodobit lidské nádory.
Celkově zůstává buněčná linie 4T1 nepostradatelným nástrojem v onkologickém výzkumu, od porozumění základním mechanismům biologie rakoviny až po vývoj a testování nových terapeutických strategií.
Buňky 4T1: Výzkumné publikace
Tato část článku se bude zabývat několika zajímavými a nejčastěji citovanými publikacemi o buňkách 4T1.
Tento článek byl publikován v roce 2018 v časopise Journal of Photochemistry and Photobiology. Výzkum navrhl, že nanočástice stříbra syntetizované z Madhuca longifolia vykazují antiproliferační účinek v nádorových buňkách 4T1 prostřednictvím degradace buněčné stěny a tvorby ROS.
Cytotoxicita a apoptotické účinky verbascosidu na buněčnou linii 4T1 rakoviny prsu
Tato studie v časopise BMC Pharmacology and Toxicology (2021) navrhla, že verbascosid, přírodní sloučenina, vyvolává apoptotické účinky v buňkách rakoviny prsu 4T1 prostřednictvím TLR4 signalizace.
Eupatorin potlačil progresi nádoru a posílil imunitu v myším modelu rakoviny prsu 4T1
Tento výzkum byl publikován v časopise Integrative Cancer Therapies v roce 2020. Tato studie použila buňky 4T1 k vývoji syngenního myšího modelu 4T1 a pomocí něj zkoumala protinádorový potenciál eupatorinu. Eupatorin zpomalil vývoj nádoru v myším modelu 4T1.
Inhibiční účinek extraktu z Viola odorata na růst nádoru a metastázy v modelu rakoviny prsu 4T1
Tento výzkum, publikovaný v časopise Iranian Journal of Pharmaceutical Research (2018), navrhl, že léčivá bylina Viola odorata má potenciální cytotoxické účinky na buňky 4T1.
Tato studie navrhuje, že pevné lipidové nanočástice s obsahem docetaxelu (DTX-loaded SLNs) mohou být slibným prostředkem k léčbě rakoviny prsu a prevenci metastáz, protože omezují růst rakoviny a plicní metastázy buněk 4T1.
Zdroje pro buněčnou linii 4T1: protokoly, videa a další
Níže uvádíme několik zdrojů týkajících se buněk 4T1:
- Návod na transfekci 4T1: Toto video je podrobným návodem k provedení transfekce buněčné linie 4T1.
- Subkultivace buněčné linie: Toto video vysvětluje protokol subkultivace pro adhezivní buněčné linie.
Následující odkaz obsahuje protokol pro kultivaci buněk 4T1:
- Buněčná linie 4T1: Tento odkaz na webovou stránku obsahuje všechny užitečné informace týkající se manipulace s kulturami 4T1. Obsahuje informace o kultivačních médiích, protokoly pro manipulaci s kryokonzervovanými kulturami a proliferujícími kulturami.
Často kladené otázky o buněčné linii 4T1
Blog 4T1 přináší informace, nejnovější výsledky výzkumu a experimentální postupy týkající se buněčné linie karcinomu prsu 4T1, která se běžně používá ve studiích růstu a metastázování rakoviny prsu.
Buněčné linie karcinomu prsu, včetně modelu 4T1, jsou nezbytné pro studium růstu nádoru a metastázování, jakož i infiltrace imunitních buněk v mikroprostředí rakoviny prsu.
Exprese CXCL13 má v výzkumu rakoviny prsu zásadní význam, neboť se podílí na infiltraci imunitních buněk a tvorbě metastatických nik, čímž přispívá k pochopení progrese nádoru a metastázování.
Model nádoru žlázy, jako je například model 4T1, se používá k simulaci pokročilého stadia rakoviny prsu a šíření karcinomu prsu, což pomáhá vědcům porozumět průběhu onemocnění a možným způsobům léčby.
Růst primárního nádoru je klíčovým faktorem ve studiích metastázování rakoviny a poskytuje základ pro zkoumání toho, jak se nádory šíří do jiných orgánů, například v modelu intraduktální rakoviny u myší.
Myší model rakoviny prsu 4T1 se využívá ke studiu protinádorové imunity, kombinované léčby s cisplatinou a odumírání nádorových buněk, čímž poskytuje komplexní pohled na účinnost léčby rakoviny prsu.
Ortotopické myší modely, včetně modelu 4T1, jsou klíčové pro studium mikroprostředí nádoru, imunitní reakce a metastázování v podmínkách, které věrně napodobují lidský karcinom prsu.
Zobrazitelný model 4T1 umožňuje vědcům sledovat růst nádoru a metastázy v reálném čase, což usnadňuje výzkum kostních metastáz, objemu nádorů 4T1 a účinnosti léčby, jako je například cisplatina.
Imunoterapie rakoviny se zaměřuje na metastatické niky tím, že posiluje schopnost imunitního systému bojovat s rakovinnými buňkami, často v kombinaci s dalšími léčebnými postupy, jako je cisplatina, s cílem zvýšit celkovou účinnost.
Luciferáza svatojánské mušky se využívá při transformaci buněk 4T1 za účelem sledování růstu nádoru a metastatického fenotypu, čímž poskytuje vědcům účinný nástroj pro studium progrese rakoviny a terapeutických zásahů.
Literatura
- Pulaski, B.A. a S. Ostrand-Rosenberg, Myší model nádoru prsu 4T1. Curr Protoc Immunol, 2001. Kapitola 20: str. Jednotka 20.2.
- Maxwell, K.G., Imunomodulace buněk rakoviny prsu pro vakcinaci celého nádoru. 2016.
- Walker, I., et al., Nádory prsu indukují centrální expresi prozánětlivých cytokinů, ale nezpůsobují poruchy chování u myší Balb/C. Scientific Reports, 2017. 7(1): s. 1-13.
- Li, Y., et al., Inhibice signální dráhy Stat3 přírodním produktem pektolinarigeninem tlumí metastázy rakoviny prsu. Frontiers in Pharmacology, 2019. 10: s. 1195.
- Farshchi, H.K., et al., Ekologická syntéza nanočástic železa pomocí extraktu z rozmarýnu a hodnocení cytotoxického účinku na rakovinné buněčné linie. Biocatalysis and agricultural biotechnology, 2018. 16: s. 54–62.
- Gholizadeh, A.P., et al., Účinek extraktu ze zázvoru na buněčnou linii rakoviny prsu 4T1 u myší Balb/c. Clinical Cancer Drugs, 2021. 8(1): s. 43-49.