Buňky U87MG - Výzkum glioblastomu pomocí buněk U87MG a jejich vliv na studium rakoviny mozku
U-87 MG, primární buněčná linie lidského glioblastomu, se široce používá v biologickém výzkumu. Tyto buňky se využívají zejména v neurovědách a imunoonkologii.
Obecná charakteristika a původ buněčné linie U-87 MG
V tomto oddíle se budeme zabývat původem a obecnými charakteristikami buněčné linie U-87. Dozvíte se, co jsou buňky U-87 MG? Odkud buňky U87 pocházejí? Jaká je úplná podoba U-87 MG? Jak velké jsou buňky U87? Jaká je morfologie buněčné linie U87?
- Buněčná linie U87 je buněčná linie glioblastomu, astrocytomu. Byla založena v roce 1966 na univerzitě v Uppsale. Buňky byly získány od 44letého muže kavkazské rasy trpícího glioblastomovým onemocněním. Tato buněčná linie se formálně nazývá U 87 MG, což je zkratka pro Uppsala 87 Malignant Glioma.
- Buňky U 87 MG mají morfologii podobnou epiteliálním buňkám.
- Velikost buněk U 87 MG se pohybuje v rozmezí 12 až 14 µm v průměru.
- Tato linie lidských glioblastomových buněk je hypodiploidní a má modální počet chromozomů 44 v přibližně 48 % buněčné populace. V 5,9 % buněčné populace se však vyskytují i vyšší ploidie.
Informace o kultivaci buněk U-87 MG
Před prací s buňkami U 87 MG byste se měli seznámit s následujícími klíčovými body pro kultivaci těchto glioblastomových buněk. Zejména byste měli vědět: Jaká je doba zdvojení populace buněk U 87 MG? Jaká média se používají pro kultivaci buněk U 87? Jaká je hustota výsevu buněčné linie U 87 MG?
Klíčové body pro kultivaci buněk U 87 MG
|
Doba zdvojení populace: |
U 87 MG buněk se doba zdvojení populace pohybuje v rozmezí 18-38 hodin. |
|
Adherentní nebo v suspenzi: |
U 87 MG je adherentní buněčná linie. Buňky mají protáhlý tvar a rostou jako monovrstvy. |
|
Hustota výsevu: |
U buněčné linie glioblastomu U 87 MG se doporučuje hustota buněk 1 x104 buněk/cm2. Adherentní buňky U87 se promyjí pomocí 1 x PBS a inkubují se s roztokem Accutase. Poté se disociované buňky odstředí a obnoví. Buňky se opatrně resuspendují a přidají do nových baněk obsahujících růstové médium. |
|
Růstové médium: |
U 87 MG je kultivována v EMEM (Eagle's minimal essential medium) rozšířeném o 1,0 g/l L-glukózy, 2,0 mM L-glutaminu, 2,2 g/l NaHCO3, 1 % NEAA, 1 mM pyruvátu sodného a 10 % roztoku FBS. Médium by se mělo obnovovat každé 2 až 3 dny. |
|
Růstové podmínky: |
Pro optimální růst vyžadují buňky U-87 MG zvlhčený inkubátor s 5% přívodem CO2 a teplotu 37 °C. |
|
Skladování: |
Buňky U87 se uchovávají buď v plynné fázi tekutého dusíku, nebo při teplotě nižší než -150 °C, aby se zachovala maximální životaschopnost glioblastomových buněk. |
|
Proces zmrazování a médium: |
Pro zmrazení buněk U 87 MG jsou vhodná zmrazovací média CM-1 nebo CM-ACF. Doporučuje se pomalý proces zmrazování, protože zabraňuje jakémukoli šoku buněk a chrání jejich životaschopnost. |
|
Postup rozmrazování: |
Zmrazené lahvičky s buněčnou linií U 87 MG se rozmrazují ve vodní lázni o teplotě 37 °C. Buňky se přidají s růstovým médiem, resuspendují se a dávkují se do nových baněk. Na rozdíl od tohoto postupu lze buňky U87 odstředit, aby se odstranilo zmrazovací médium, a poté kultivovat. |
|
Úroveň biologické bezpečnosti: |
Pro manipulaci s buněčnými kulturami U 87 MG je vyžadována úroveň biologické bezpečnosti 1. |
Výhody a nevýhody článků U-87 MG
Když přemýšlíme o buněčné linii, první, co nás napadne, je: Jaké jsou výhody použití buněk U-87 MG? Jaké jsou nevýhody buněk U87?
Výhody
Buněčné linie U 87 MG se široce používají ve výzkumu. Několik výhod spojených s touto buněčnou linií je následujících:
Výhody
- Snadné pěstování: U 87 MG se snadno udržuje v kultuře. Nevyžadují náročné nebo komplikované požadavky na kultivaci buněk
- Homogenita: U 87 MG je homogenní buněčná linie. Většina buněk v populaci má stejnou genetickou výbavu, a proto sdílí podobné vlastnosti. Tyto buňky se využívají pro studium buněčných procesů, screening léčiv a testování
- Dobře charakterizované: Tato buněčná linie glioblastomu je dobře charakterizována růstovými charakteristikami, morfologií a genovou expresí, což z ní činí cenný výzkumný nástroj
Nevýhody
- Omezená použitelnost: U 87 MG je glioblastomová buněčná linie, takže její použití je omezeno především na studium glioblastomů a základních molekulárních mechanismů. Nemusí být vhodná pro zkoumání jiných typů rakoviny.
Výzkumné aplikace využívající buňky U-87 MG
Glioblastomová buněčná linie U-87MG je hojně využívána ve studiích rakoviny, zejména ve výzkumu glioblastomů. Některé z výzkumných aplikací buněk U 87 MG jsou:
- Výzkum biologie rakoviny: Buněčná linie U87 se používá ke studiu růstu a vývoje rakoviny, základních molekulárních mechanismů, signálních drah a nádorového mikroprostředí. Studie publikovaná v roce 2020 použila model glioblastomu in vitro, buněčnou linii U 87 MG, ke zkoumání genu BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) jako terapeutického cíle. Výsledky ukázaly, že gen BMAL1 inhibuje proliferaci, migraci a invazi glioblastomových buněk potlačením exprese cyklinu B1, metaloproteinázy-9 a genu fosfo-AKT [1]. Další výzkum provedený v roce 2019 využil buněčnou linii U87 a zkoumal, že snížená exprese transkripčního faktoru LITAF (tumor necrosis factor-alpha factor) indukovaná lipopolysacharidem může zvýšit radiosenzitivitu gliomových buněk prostřednictvím upregulace dráhy FOXO-1. LITAF je také známý jako gen 7 indukovaný p53 (PIG7) [2].
- Objevování a vývoj léčiv: U-87 MG buňky lze použít pro účely screeningu a testování léčiv, což vědcům umožňuje identifikovat nová potenciální protinádorová léčiva a posoudit jejich účinnost a toxicitu. Jako výzkum byla použita buněčná linie glioblastomu U 87 MG k hodnocení protinádorového a antioxidačního potenciálu antioxidační a protinádorové aktivity extraktu Inula helenium (L.) [3]. Podobně i další publikace zmiňuje použití buněčné linie U87 k testování cytotoxického a apoptotického účinku rostlinných extraktů [4]. Dále výzkum publikovaný v roce 2018 studoval cytotoxický účinek seskviterpenových alkaloidů extrahovaných z rostlin rodu Nuphar na citlivé a na léky rezistentní buněčné linie U 87 MG [5].
Objednejte si svou buněčnou linii U87 MG Glioma ještě dnes
Buněčná linie U-87 MG: Výzkumné publikace
Zde jsou uvedeny některé významné výzkumné publikace týkající se buněčné linie U 87 MG.
Tento článek publikovaný v časopise Neuroreport 2018 navrhuje, že hypoxie může zvýšit migraci a invazi lidských glioblastomových buněk regulací signální dráhy PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α.
Tato studie byla publikována v časopise Frontiers in Pharmacology v roce 2020. Výsledky výzkumu uvádějí, že flavonoid, eriodictyol, má protinádorové účinky na buněčnou linii U87 a potlačuje proliferaci a metastazování buněk. Sloučenina zprostředkovává své protinádorové vlastnosti modulací dráhy PI3K/Akt/NF-κB.
Tento výzkum v časopise Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) naznačuje, že čínská bylinná formule s názvem Xihuang pill může indukovat apoptózu v buňkách U87 prostřednictvím cílení na kaskádu Akt/mTOR/FOXO1 aktivovanou ROS.
LITAF zvyšuje radiosenzitivitu lidských gliomových buněk prostřednictvím dráhy FoxO1
Tato výzkumná práce byla publikována v časopise Cellular and Molecular Neurobiology v roce 2019. Studie navrhla, že transkripční faktor LITAF snižuje a zvyšuje radiosenzitivitu gliomových buněk regulací signální dráhy FOXO-1.
Tento článek byl publikován v časopise Biointerface Research in Applied Chemistry (2019). Vědci použili buňky U 87 MG ke zkoumání cytotoxického účinku nanočástic PLGA naložených kurkuminem.
Zdroje pro buňky U-87 MG: Zdroje: protokoly, videa a další materiály
Buněčná linie glioblastomu U87MG se používá v mnoha laboratořích pro výzkum rakoviny. Několik zdrojů s touto buněčnou linií:
- Transfekce buněčné linie U87: Tento dokument vám popíše protokol transfekce buněk U 87 MG.
- Transfekce buněčné linie U 87 MG: Toto video je výukový program, který krok za krokem vysvětluje protokol transfekce buněk U87.
Zdroj pro protokol buněčné kultivace buněk U87 je uveden níže:
- U87 MG buněk: Tento odkaz obsahuje základní informace o buněčné linii U 87 MG. Obsahuje stručné protokoly dělení, zmrazení a rozmrazení buněk.
Poznatky o výzkumu MG gliomu U87: Často kladené otázky
Odkazy
- Gwon, D.H., et al., BMAL1 potlačuje proliferaci, migraci a invazi buněk U87MG snížením regulace cyklinu B1, fosfo-AKT a metaloproteinázy-9. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
- Huang, C., et al., LITAF Enhances Radiosensitivity of Human Glioma Cells via the FoxO1 Pathway (LITAF zvyšuje radiosenzitivitu lidských gliomových buněk prostřednictvím dráhy FoxO1). Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): p. 871-882.
- Koc, K., et al. antioxidační a protinádorová aktivita extraktu z Inula helenium (L.) u lidské glioblastomové buněčné linie U-87 MG. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): p. 658-661.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh, and A. Ghasempour, Cytotoxicity and apoptosis induction in breast cancer, skin cancer and glioblastoma cells by plant extracts. Mol Biol Rep, 2019. 46(5): p. 5131-5142.
- Fukaya, M., et al., Cytotoxicita seskviterpenových alkaloidů z rostlin Nuphar vůči citlivým a lékově rezistentním buněčným liniím. Food Funct, 2018. 9(12): p. 6279-6286.