Odhalení buněk THP-1: Průkopnický výzkum leukémie
Buněčná linie THP-1, známá jako Tohoku Hospital Pediatrics-1, je spontánně imortalizovaná kultura lidských monocytárních leukemických buněk. Slouží jako všestranný model při studiu biologie monocytů, aktivit makrofágů a jejich role v rakovině a imunoterapii. Lidská leukemická buněčná linie THP1 odráží fyziologické a funkční vlastnosti monocytů periferní krve, což z ní činí neocenitelný zdroj pro studium diferenciačních antigenů monocytů a širších aspektů fyziologie monocytů. Tento článek poskytuje základní přehled buněčné linie THP1.
Obecné informace a původ buněčné linie THP-1
Pro ty, kteří začínají pracovat s buněčnou linií THP-1, je nezbytné pochopit její základní charakteristiky. Probereme její definici, původ, morfologii, velikost a genomické vlastnosti.
Buněčná linie THP-1: THP-1 je lidská monocytární leukemická buněčná linie odvozená z periferní krve ročního pacienta, u kterého byla v roce 1980 diagnostikována akutní monocytární leukemie (podtyp M5).
Morfologie: Buňky THP-1 mají kulatou, velkou a zvláštní morfologii.
Velikost buněk: Tyto buňky jsou relativně velké, s průměrným průměrem přesahujícím 21 µm.
Genom a floidie: THP-1 je téměř diploidní buněčná linie, analýza karyotypu odhalila diploidní počet chromozomů (n = 46).
Kultivace lidské leukemické buněčné linie THP-1
Dostatečná znalost vlastností buněčné linie zjednodušuje její kultivaci. Tento oddíl obsahuje zásadní podrobnosti o kultivaci a údržbě buněčné linie THP-1, včetně doby zdvojení, kultivačních médií, adherenčních vlastností, hustoty výsevu, podmínek růstu, skladování a procesů zmrazování a rozmrazování.
Doba zdvojení: Doba zdvojení buněk THP-1 je přibližně 35 hodin, i když se může pohybovat od 19 do 50 hodin v závislosti na kultivačních podmínkách.
Adherence: Buňky THP-1 rostou v suspenzi, ale za určitých podmínek se mohou diferencovat v adherentní buňky podobné makrofágům.
Hustota výsevu: Ideální hustota výsevu se pohybuje od 1,0x10^5 do 1,5x10^6 životaschopných buněk/ml. Toho se dosáhne zředěním buněk z vypěstované kultury na požadovanou hustotu.
Růstové médium: Doporučené médium je RPMI 1640 doplněné 10 % FBS, 1 mM pyruvátem sodným a 2,5 mM L-glutaminem.
Růstové podmínky: Buňky by měly být kultivovány ve zvlhčeném inkubátoru s 5% přívodem CO2 při 37 °C.
Skladování: Pro dlouhodobé uchování by měly být buňky skladovány při teplotě nižší než -150 °C, aby se zachovala jejich životaschopnost.
Postup zmrazování: Pro pomalé zmrazování použijte médium CM-1 nebo CM-ACF, přičemž teplota klesá o 1 °C za minutu.
Postup rozmrazování: Rychle míchejte po dobu 40-60 sekund ve vodní lázni o teplotě 37 °C obsahující antimikrobiální činidlo a poté přeneste do baněk s růstovým médiem.
Úroveň biologické bezpečnosti: S buňkami THP-1 by se mělo manipulovat v laboratořích s úrovní biologické bezpečnosti 1.
Tento zjednodušený a vědecky přesný popis poskytuje základní informace o buněčné linii THP-1 a pomáhá výzkumným pracovníkům při práci s tímto cenným výzkumným nástrojem.
Zkoumání biologie makrofágů pomocí buněčné linie THP-1: Nahlédnutí do diferenciace, funkce a dynamiky imunitního systému
Buňky THP-1 jako model pro diferenciaci a analýzu funkce makrofágů
Ve vztahu k buňkám THP-1 nabývá diferenciace a funkce makrofágů jedinečného významu. Buňky THP-1 jsou lidskou leukemickou monocytovou linií běžně používanou jako model pro studium biologie monocytů a makrofágů in vitro. Mají schopnost diferencovat se na buňky podobné makrofágům, pokud jsou ošetřeny fórbol 12-myristát 13-acetátem (PMA), což napodobuje přechod, kterým procházejí periferní monocyty, aby se v těle staly makrofágy. Po diferenciaci mohou být makrofágy odvozené od THP-1 polarizovány na makrofágy M1 nebo M2 prostřednictvím specifických podnětů, které odrážejí prozánětlivý stav spojený s M1 nebo protizánětlivý stav spojený s M2 a stav obnovy tkání.
Tyto diferencované makrofágy THP-1 si zachovávají klíčové funkce, jako je fagocytóza, prezentace antigenů a produkce cytokinů, což z nich činí neocenitelný in vitro systém pro zkoumání molekulárních a buněčných mechanismů, které jsou základem reakcí makrofágů na různé signály. Studie využívající buňky THP-1 umožnily nahlédnout do činností makrofágů, včetně reakcí na infekční agens, interakcí s nádorovými buňkami a úlohy makrofágů v imunoregulaci a zánětu. Buňky THP-1 také slouží jako účinný nástroj pro screening potenciálních terapeutických sloučenin, které mohou modulovat aktivitu makrofágů, a pro zkoumání imunologických aspektů zapojení makrofágů do patogeneze a řešení onemocnění.
Zkoumání polarizace a aktivity makrofágů pomocí THP-1
Buňky THP-1 mají zásadní význam pro studium polarizace lidských makrofágů, což je proces, který má zásadní význam pro pochopení imunitních reakcí ve zdraví a nemoci. Diferenciací buněk THP-1 na makrofágy M0, M1 a M2 mohou vědci zkoumat klasickou aktivaci makrofágů (M1) spojenou s prozánětlivými reakcemi a polarizaci makrofágů M2, která je spojena s protizánětlivými nebo hojivými procesy. Tento model polarizace makrofágů umožňuje hlubší pochopení zobrazovacích funkcí makrofágů v různých souvislostech, včetně vývoje nádorů a reakce nádorových buněk na léčbu.
THP-1 ve výzkumu rakoviny: Od apoptózy po chemorezistenci
Buněčná linie THP-1 je klíčovým hráčem při studiu apoptózy nádorových buněk a mechanismů, které jsou základem reakcí nádorových buněk na léčbu. Testy využívající buňky THP-1, například testy ADCP zaměřené na specifické nádorové buňky, pomáhají objasnit interakce mezi makrofágy a nádorovými buňkami, včetně buněk HepG2. Zkoumání aktivity kaspáz v buňkách THP-1 navíc přispívá k pochopení apoptózy, která je kritickým procesem při progresi a léčbě rakoviny. Vliv chemoterapeutických látek, jako je etoposid, na buňky THP-1 nabízí pohled na roli těchto buněk v chemorezistenci, což dále zdůrazňuje jejich význam ve výzkumu rakoviny.
Buňky THP-1 a imunoterapie: Cílenost a odpověď na léčbu
V oblasti imunoterapie se buňky THP-1 používají k modelování interakce mezi imunitními buňkami a rakovinou, přičemž se zkoumá, jak lze makrofágy využít k cílení na rakovinné buňky, jako jsou buňky Raji. Studium exprese mRNA a proteinů v buňkách THP-1 pomáhá pochopit složité signální dráhy zapojené do imunitní odpovědi a možnosti terapeutického zásahu. Tento výzkum je klíčový pro vývoj strategií manipulace s činností makrofágů s cílem dosáhnout lepších imunoterapeutických výsledků.
Buněčná linie THP-1 se díky své schopnosti napodobovat periferní monocyty a podléhat polarizaci makrofágů stala základním kamenem při studiu lidské leukémie, biologie makrofágů a jejich důsledků pro rakovinu a imunoterapii. Díky své všestrannosti a významu v různých testech je základním nástrojem pro lepší pochopení úlohy imunitního systému ve zdraví a nemoci.
Prozkoumejte naši kolekci buněčných linií THP-1
Výzkumné aplikace buněk THP-1
Před prací s jakoukoli buněčnou linií si projděte její výzkumné aplikace a pochopte, jak tyto buňky využít ve své studii. Zde uvádíme několik významných výzkumných aplikací buněčné linie THP-1.
Buněčná linie THP-1 se široce používá v imunologickém výzkumu, protože se může diferencovat na různé imunitní buňky. Zde je uvedeno několik příkladů studií, v nichž byly použity buňky THP-1:
- Studie z roku 2018 použila buňky THP-1 k odvození makrofágů a ke zkoumání zánětlivých drah a souvisejících mechanismů. Vědci zjistili, že protein zvaný apolipoprotein A-1 binding protein (AIBP) může zastavit zánětlivé dráhy tím, že se váže na apoA-1 a stabilizuje ATP-vázající kazetový transportér A1 (ABCA1) [3].
- Jiná studie použila buňky THP-1 k vytvoření monocytům podobných buněk a zkoumala účinky neuroprotektivní kyseliny dokosahexaenové (DHA) na tyto buňky v souvislosti s Alzheimerovou chorobou. Studie zkoumala potenciální mechanismy, které jsou základem interakce s proteinem amyloid beta (Aβ) [4].
- V jiné studii byly makrofágy odvozené od buněčné linie THP-1 využity ke zkoumání nádorového potenciálu exozomů vylučovaných buňkami duktálního adenokarcinomu pankreatu (PDAC) [5].
Publikace zdůrazňující buňky THP-1 ve vědeckém výzkumu
Existuje množství studií o buňkách THP-1. Zde uvádíme několik relevantních příkladů:
- Apolipoprotein A-1 binding protein inhibuje zánětlivé signální dráhy vazbou na apolipoprotein A-1 v makrofázích THP-1. Tato studie byla publikována v časopise Circulation Journal v roce 2018. V rámci tohoto výzkumu byly makrofágy odvozené od buněčné linie THP-1 ošetřeny lipopolysacharidem, který indukoval zánětlivé dráhy. Studie navrhla, že protein vážící apolipoprotein A-1 zabraňuje zánětlivým kaskádám tím, že se váže na protein apolipoprotein A-1.
- DHA tlumí nekroptózu vyvolanou Aβ prostřednictvím signální dráhy RIPK1/RIPK3 v monocytech THP-1. Tento výzkum navrhl, že kyselina dokosahexaenová (DHA) inhibuje nekroptózu vyvolanou proteinem amyloid beta v monocytech odvozených od THP-1 v souvislosti s Alzheimerovou chorobou
- Nádorově podporující účinky exozomů buněk rakoviny slinivky břišní na makrofágy odvozené od THP-1: V této publikaci Linton a jeho kolegové pozorovali rakovinotvorný účinek exozomů vylučovaných buňkami pankreatického duktálního adenokarcinomu na makrofágy pocházející z buněčné linie THP-1.
- Vliv třídění odpadu na mikrobiom prostředí, životaschopnost buněk THP-1 a zánětlivé reakce: V této studii byly použity makrofágy odvozené z buněčné linie THP-1 a studován vliv mikrobiomu přítomného v průmyslu třídění odpadu na sekreci prozánětlivých cytokinů těmito buňkami.
- Standardizované protokoly pro diferenciaci buněk THP-1 na makrofágy s odlišnými fenotypy M (IFNγ+ LPS), M (IL-4) a M (IL-10): Tato studie popisuje protokoly pro indukci diferenciace buněk THP-1 a vývoj makrofágů s určitými fenotypy.
- Proaterogenní proteoglykanáza ADAMTS-1 je v makrofázích odvozených od THP-1 downregulována kyselinou laurovou prostřednictvím signálních drah PI3K a JNK. Tento článek byl publikován v časopise Molecular Biology Reports v roce 2019. Tato studie zkoumala terapeutický potenciál kyseliny laurové na makrofágy odvozené od THP-1. Výsledky ukázaly, že kyselina laurová stabilizuje plak aterosklerózy a inhibuje trombózu modulací exprese ADAMS-1 (pro-aterogenní proteoglykanázy).
Zdroje pro buněčnou linii THP-1
V této části budou uvedeny všechny dostupné online zdroje o buňkách THP-1. To vám významně pomůže naučit se kultivaci, diferenciaci a transfekční protokoly.
Protokoly kultivace buněk
Toto je několik zdrojů vysvětlujících protokoly kultivace a manipulace s buňkami THP-1.
- Protokol kultivace a diferenciace: Tento dokument obsahuje podrobné a vyčerpávající informace o médiích pro kultivaci buněk, subkultivaci, zmrazování a rozmrazování a diferenciačních protokolech těchto buněk.
- Subkultivace buněk THP-1: Tento dokument obsahuje protokol subkultivace buněk THP-1.
Protokoly transfekce
- Transfekce buněk THP-1: Tento odkaz se týká transfekce buněk THP-1 plazmidovou DNA.
- Tento dokument popisuje protokol transfekce buněk THP-1.
Videa týkající se buněk THP-1
THP-1 je široce kultivovaná buněčná linie. K dispozici je mnoho video zdrojů vysvětlujících zacházení s touto buněčnou linií a její kultivaci:
- Kultivace buněk THP-1: Toto video se zabývá kultivací buněčné linie THP-1.
- Transfekce buněčné linie THP-1: Toto video ukazuje protokol pro vysoce účinnou transfekci buněk THP-1.
Doufáme, že tento článek obsahuje vhodné informace o kultivaci buněk THP-1, diferenciaci, výhodách a výzkumných aplikacích. Pokud plánujete tento in vitro buněčný model akutní myeloidní leukemie použít ve svém výzkumu, zvažte jeho objednání u nás.
Často kladené dotazy k buněčné linii THP-1
Odkazy
- Chanput, W., J.J. Mes a H.J. Wichers, Buněčná linie THP-1: in vitro buněčný model pro imunomodulační přístup. Mezinárodní imunofarmakologie, 2014. 23(1): p. 37-45.
- Chanput, W., V. Peters a H. Wichers, THP-1 and U937 Cells (Buňky THP-1 a U937 ). Vliv potravinových bioaktivních látek na zdraví: modely in vitro a ex vivo, 2015: s. 147-159.
- Zhang, M., a další, Apolipoprotein A-1 binding protein inhibuje zánětlivé signální dráhy tím, že se váže na apolipoprotein A-1 v makrofázích THP-1. (anglicky). Circulation Journal, 2018. 82(5): p. 1396-1404.
- Yuan, S., et al, DHA attenuates Aβ-induced necroptosis through the RIPK1/RIPK3 signaling pathway in THP-1 monocytes. Biomedicína a farmakoterapie, 2020. 126: p. 110102.
- Linton, S.S., et al., Tumor-promoting effects of pancreatic cancer cell exosomes on THP-1-derived macrophages ( Nádorově podporující účinky exosomů buněk rakoviny slinivky břišní na makrofágy odvozené od THP-1 ). PLoS One, 2018. 13(11): p. e0206759.