Buněčná linie T98G
BuňkyT98G představují lidskou buněčnou linii glioblastomu, která se obecně používá v biomedicínském výzkumu. Tyto buňky se využívají zejména ve studiích rakoviny mozku ke zkoumání klíčových buněk a molekulárních faktorů, které k ní přispívají. Kromě toho pomáhají vědcům při screeningu a testování nových léků proti rakovině, které mohou pomoci při vývoji léků.
Tento článek zahrnuje všechny podstatné údaje o buněčné linii T98G, které budete potřebovat před zahájením práce s ní, jako např:
- Obecná charakteristika a původ buněčné linie T98G
- Informace o kultivaci buněčné linie T98G
- Buněčná linie T98G: Výhody a nevýhody
- Aplikace buněk T98G
- Výzkumné publikace s buňkami T98G
- Zdroje pro buňky T98G: Protokoly, videa a další zdroje informací o T98H
1. Obecná charakteristika a původ buněčné linie T98G
Tato část článku vám pomůže prozkoumat základní charakteristiky buněčné linie T98G. Bude obsahovat informace o původu buněčné linie, morfologii, velikosti a ploidii. Kromě toho komplexně porozumí následujícím dotazům: Co jsou buňky T98G? Jaký typ buněk je T98G? Odkud pochází T98G? Jaké jsou vlastnosti buněčné linie T98G? Co je buněčná linie glioblastomu T98G U87?
- Buněčnou linii T98G vytvořil GH Stein. Tvoří ji buňky podobné fibroblastům, které byly odvozeny z mozkové tkáně 61letého muže kavkazské rasy s multiformním glioblastomem [1].
- Buňky T98G jsou netumorigenní; při injekčním podání nahým myším nezpůsobují nádory. Mají však tendenci se množit při vhodném ukotvení v buněčné kultuře.
- Tyto buňky mají morfologii podobnou fibroblastům.
- Buněčná linie glioblastomu T98G představuje hyperpentaploidii. Modální počet chromozomů se pohybuje mezi 128 a 132. Vyšší ploidie se může vyskytovat u 1,39 % buněčné populace.
T98 vs T98G
Obě jsou lidské buněčné linie glioblastomu a mají podobný původ. Jediným rozdílem mezi těmito buněčnými liniemi je počet chromozomů. T98G má téměř dvojnásobný počet chromozomů než T98. Proto je T98G známá jako polyploidní varianta T98.
T98G versus U87
U87 a T98G jsou lidské buněčné linie glioblastomu používané při výzkumu rakoviny mozku. U87 vykazuje agresivnější fenotyp ve srovnání s GBM T98G.
2. Informace o kultivaci buněčné linie T98G
Informace o kultivaci buněčné linie je nezbytné znát před zahájením práce s ní. Pomohou vám snadno a pohodlně manipulovat s buněčnou linií v laboratoři. Měli byste vědět: Jaká je doba zdvojení buněčné linie T98G? Jaké růstové médium je pro buňky T98G nejlepší? Jaké jsou růstové vlastnosti T98G? Jaká je hustota výsevu buněk T98G? Jak se zmrazují buňky T98G?
Klíčové body pro kultivaci buněk T98G
|
Doba zdvojení: |
Přibližná doba zdvojení buněk T98G je 40 hodin. Může se lišit v závislosti na podmínkách kultivace. |
|
Adherentní nebo v suspenzi: |
Buňky T98G jsou adherentní. Přichytí se ke dnu kultivačních nádob a vytvoří monovrstvy. |
|
Poměr dělení: |
Buňky T98G se subkultivují v poměru 1:2 až 1:5. Za tímto účelem se buňky nejprve promyjí 1 X PBS pufrem a poté se inkubují s pasážovacím roztokem (Accutase) po dobu 8 až 10 minut při pokojové teplotě. Po inkubaci se oddělené buňky přidají do čerstvého růstového média a odstředí se. Poté se odebraná buněčná peleta opatrně resuspenduje a buňky se dávkují do kultivační baňky obsahující růstové médium. |
|
Růstové médium: |
Pro kultivaci buněk T98G se používá médium EMEM obsahující 10 % fetálního hovězího séra, 2 mM L-Glutamin, 2,2 g/l NaHCO3 a EBSS. Médium by se mělo vyměňovat 3 až 4krát týdně. |
|
Růstové podmínky: |
Buňky T98G se udržují ve zvlhčeném inkubátoru nastaveném na 37 °C a napojeném na přívod CO2. |
|
Skladování: |
Zmrazené buňky lze skladovat při teplotě nižší než -150 °C nebo v plynné fázi kapalného dusíku, aby byla dlouhodobě chráněna životaschopnost buněk. |
|
Postup zmrazování a médium: |
Buňky T98G se doporučují zmrazovat v médiu pro zmrazování buněk CM-1 nebo CM-ACF. Doporučuje se pomalý proces zmrazování, který umožňuje pokles teploty pouze o 1 °C za minutu. Tím se zabrání jakémukoli šoku buněk a zachová se jejich životaschopnost. |
|
Proces rozmrazování: |
Zmrazené buňky se šetrně rozmrazí tak, že se vloží do předem ohřáté vodní lázně o teplotě 37 °C na 40 až 60 sekund. Poté se resuspendují v čerstvém růstovém médiu a přenesou se do nové baňky. Po 24 hodinách inkubace se médium vymění, aby se odstranily složky zmrazovacího média. |
|
Úroveň biologické bezpečnosti: |
Kultury T98G jsou udržovány v laboratoři s biologickou bezpečností 1. |
3. Buněčná linie T98G: Výhody a nevýhody
T98G je široce používaná buněčná linie glioblastomu odvozená od člověka. Má několik výhod a nevýhod, které ji odlišují od ostatních. Několik významných z nich je uvedeno v této části článku.
Výhody
Mezi výhody buněk T98G patří:
-
Dobře charakterizované
Dobře zavedená a dobře charakterizovaná buněčná linie. Rozsáhle studovaná a zdokumentovaná v literatuře.
-
Model in vitro
Reprezentuje vlastnosti glioblastomu, nejagresivnějšího mozkového nádoru. Cenný nástroj pro zkoumání onemocnění, pochopení biologie a vývoj léčby.
Nevýhody
Nevýhody spojené s buňkami T98G jsou:
-
Heterogenita
Genetická heterogenita v populaci buněk T98G může vést k nekonzistenci výsledků experimentů a komplikovat interpretaci dat.
4. Aplikace buněk T98G
Buněčná linie T98G je cenným nástrojem používaným ve výzkumu rakoviny. Zde je uvedeno několik hlavních výzkumných aplikací buněk T98G:
- Výzkum rakoviny: Buněčná linie T98G je cenným nástrojem pro zkoumání biologie glioblastomových nádorů. Tyto buňky se používají především ke studiu složitých molekulárních drah, které jsou základem vývoje a progrese glioblastomového onemocnění. Kromě toho se využívají k identifikaci genetických mutací, které řídí růst nádoru, a dalších mechanismů nádorových buněk. Yang Chen a jeho kolegové pracovali na těchto buňkách a zjistili, že nadměrná exprese miRNA-21 snižuje hladinu PDCD4 (Programmed cell death protein 4) v buňkách T98G. To vede k inhibici apoptózy buněk T98G zprostředkované PDCD4. Studie tedy naznačuje, že miRNa-21 je potenciálním cílem pro vývoj terapie [2]. Podobně jako tato studie studoval Fanqiang Kong a jeho kolegové roli mikroRNA-15a v proliferaci a invazi buněk glioblastomu T98G. Zjistili, že miRNA-15a-5p podporuje tyto buněčné procesy tím, že se zaměřuje na molekulu buněčné adheze 1 (CADM1) [3].
- Testování léčiv a terapeutický vývoj: T98G slouží jako skvělý model glioblastomu in vitro pro screening nových léčiv a poskytuje platformu pro hodnocení účinnosti potenciálních protinádorových terapií. Výzkumníci také testují různé sloučeniny a terapie, aby identifikovali a objevili kandidáty na léky s nejslibnějšími antiglioblastomovými vlastnostmi. To vede k vývoji nových léků a léčebných strategií, které nabízejí naději pro pacienty s glioblastomem. Taková studie zkoumala protinádorový potenciál přírodní sloučeniny zvané korilagin u buněčné linie GBM T98G rezistentní na temozolomid. Výsledky studie navrhly, že korilagin v kombinaci s temozolomidem vyvolává v buňkách vyšší úroveň antiproliferačních a antiapoptotických účinků [4].
5. Výzkumné publikace s buňkami T98G
Níže jsou uvedeny některé zajímavé a často citované výzkumné publikace týkající se buněčné linie glioblastomu T98G.
Chemoterapeutický účinek agonisty REV-ERB SR9009 na buňky lidského glioblastomu T98G
Tato publikace v časopise ASN Neuro (2019) zkoumala protinádorové účinky agonisty REV-ERB s názvem SR9009 na buňky glioblastomu T98G.
Tento výzkumný článek v Neurochemical research (2019) navrhl, že butyrát sodný a kvercetin synergicky inhibují ochrannou autofagii v buňkách T98G a zvyšují apoptózu buněk.
Tato studie v časopise Genes (2023) podrobila buněčnou linii T98G adaptovanou na hypoxii sekvenování RNA a navrhla IRE1 (Inositol-requiring enzyme 1) jako slibný terapeutický cíl.
MikroRNA-548c-3p inhibuje proliferaci a migraci gliomových buněk T98G downregulací c-Myb
Tento článek byl publikován v časopise Oncology Letters (2017). Studie zkoumala, že miRNA-548c-3p se zaměřuje na onkogeny T98G (c-Myb) a inhibuje proliferaci a migraci buněk T98G.
Tento článek v časopise Journal of Medicinal Plants Research (2011) navrhuje, že chloroformový extrakt z Dracocephalum tanguticum působí antiproliferačně na buňky T98G modulací genů kaspázy-3, Bax a P21.
6. Zdroje pro buňky T98G: Zdroje: protokoly, videa a další
Zde jsou uvedeny dostupné zdroje obsahující protokoly kultivace a transfekce buněk T98G.
- Transfekce T98G: Tento výzkumný článek obsahuje protokol pro transfekci buněk T98G. Stručně vysvětluje metodu a potřebná činidla.
Následující odkazy vám výrazně pomohou naučit se protokol kultivace buněk T98G a usnadní vám práci s ním.
- Buňky T98G: Tato webová stránka obsahuje zásadní informace týkající se protokolů kultivace buněk T98G, včetně subkultivace a manipulace s proliferačními a kryokonzervovanými kulturami. Kromě toho vám také pomůže seznámit se s médii pro růst buněk, podmínkami a dobou zdvojení.
Odkazy
- Haehl, E., Endoteliálními buňkami indukovaná radiorezistence u glioblastomu. 2021, Universität Tübingen.
- Chen, Y., et al., MicroRNA-21 down-regulates the expression of tumor suppressor PDCD4 in human glioblastoma cell T98G. Cancer letters, 2008. 272(2): p. 197-205.
- Kong, F., et al., MicroRNA-15a-5ppodporuje proliferaci a invazi glioblastomových buněk T98G prostřednictvím cíleného působení na molekulu buněčné adheze 1. Oncology Letters, 2021. 21(2): p. 1-1.
- Milani, R., et al., Corilagin Induces High Levels of Apoptosis in the Temozolomide-Resistant T98G Glioma Cell Line (Korilagin indukuje vysokou úroveň apoptózy u buněčné linie gliomu T98G rezistentní vůči temozolomidu). Oncol Res, 2018. 26(9): p. 1307-1315.