Buňky SiHa - světlo do výzkumu rakoviny děložního čípku

BuňkySiHa jsou buňky rakoviny děložního čípku hojně využívané v biomedicínském výzkumu. Jsou skvělými hostiteli pro transfekci, a proto jsou vhodné pro studie genové exprese. Vzhledem ke svému lidskému původu a významu pro rakovinu děložního čípku se tyto buňky využívají především v biologii rakoviny, virologii a ve studiích vývoje léčiv.

Obecná charakteristika a původ buněk SiHa

Pochopení původu buněčné linie a jejích obecných vlastností je zásadní, protože ovlivňuje její použití v rámci výzkumu. V této části článku se dozvíte o původu buněčné linie SiHa, charakteristických vlastnostech a mnoha dalších informacích: Co je to nádorová buněčná linie SiHa? Co jsou buňky SiHa HPV? Jaký je původ buněčné linie SiHa? Jaká je morfologie buněk SiHa?

SiHa, buněčná linie karcinomu děložního hrdla, byla odvozena z fragmentů primární děložní biopsie asijské ženy (55 let) se spinocelulárním karcinomem [1].
Buněčná linie SiHa vykazuje hypertriploidní karyotyp. Většina buněk má průměrné číslo chromozomů mezi 69 a 72. Přibližně 24 % buněk má však modální počet chromozomů 71.
Buňky SiHa jsou pozitivní na lidský papilomavirus 16. Vykazují integraci přibližně 1 až 2 kopií genomu HPV na buňku [2].
Tyto buňky karcinomu děložního hrdla vykazují epiteliální morfologii.

Rozdělení buněk karcinomu děložního hrdla HeLa pod mikroskopem.

Buněčná linie SiHa: Informace o kultivaci

Udržování kultury buněčné linie není snadné, dokud neznáte všechny klíčové body pro její kultivaci. Měli byste vědět: Jaká je doba zdvojení linie SiHa? Co je to buněčné médium SiHa? Jak se kultivuje buněčná linie SiHa?

Klíčové body pro kultivaci buněk SiHa

Doba zdvojení:	Doba zdvojení buněk SiHa je přibližně 17 hodin.
Adherentní nebo v suspenzi:	SiHa je adherentní buněčná linie.
Poměr subkultivace:	Poměr subkultivace pro buňky SiHa je 1:2 až 1:4. Pro pasážování se adherentní buňky oplachují 1x PBS. Přidá se roztok akutázy a buňky se inkubují 8 až 10 minut při pokojové teplotě. Poté se přidá kultivační médium a buňky se odstředí. Buněčná peleta se resuspenduje a buňky se přelijí do nové kultivační baňky.
Kultivační médium:	Pro ideální růst buněk SiHa se používá Eagleovo minimální esenciální médium (EMEM) obsahující 10 % FBS, 2 mM L-Glutamin, 2,2 g/l NaHCO3 a Earleův vyvážený solný roztok (EBSS). Médium se vyměňuje 2 až 3krát týdně.
Růstové podmínky:	Buňky SiHa se udržují ve zvlhčeném inkubátoru o teplotě 37 °C s přívodem 5 % CO2.
Skladování:	Zmrazené lahvičky s buněčnou linií SiHa pro karcinom děložního hrdla se dlouhodobě skladují při teplotě nižší než -150 °C v elektrickém mrazáku nebo v plynné fázi tekutého dusíku.
Proces zmrazování a médium:	Pro zmrazení buněk SiHa se používá zmrazovací médium CM-1 nebo CM-ACF. Buňky se zmrazují metodou pomalého zmrazování, která umožňuje pokles teploty pouze o 1 °C za minutu, aby byla chráněna životaschopnost buněk.
Postup rozmrazování:	Zmrazené buňky se udržují 40 až 60 sekund ve vodní lázni o teplotě 37 °C, dokud nezůstane malý ledový chomáček. Poté se přidá čerstvé růstové médium a buňky se odstředí, aby se odstranily složky zmrazovacího média. Buněčná peleta se resuspenduje a buňky se dávkují do kultivační baňky k růstu.
Úroveň biologické bezpečnosti:	Pro manipulaci s buněčnými kulturami SiHa a jejich udržování je nutná laboratoř úrovně biologické bezpečnosti 1.

Adherentní vrstva buněk SiHa při zvětšení 10× a 20×.

Výhody a nevýhody buněčné linie SiHa

Stejně jako jiné lidské karcinomové buněčné linie má i linie SiHa některé odlišné vlastnosti spojené s určitými výhodami a nevýhodami. Zde jsme se zabývali několika významnými z nich.

Výhody buněčné linie SiHa pro karcinom děložního hrdla

Model rakoviny děložního čípku
- Pochází z dlaždicobuněčného karcinomu děložního čípku.
- Používá se ke studiu mechanismů, růstu a vývoje rakoviny děložního čípku.
- Exprese genů p53+ a pRB+, které souvisejí s opravou DNA, regulací buněčného cyklu a potlačením nádoru.
Nádorový potenciál
- Buňky SiHa jsou tumorigenní a mohou vyvolat špatně diferencované epidermoidní nádory III. stupně u nahých myší.
- Používají se pro výzkum rakoviny in vivo a testování protinádorové léčby.

Nevýhody buněk SiHa

Míra proliferace
- Buňky SiHa se rychle množí, což vede k nadměrnému růstu.
- Vyžadují časté pasážování, což zvyšuje riziko genetické nestability, která může ovlivnit chování buněk v průběhu času.

Výzkumné aplikace článků SiHa

Buněčná linie SiHa se hojně využívá ve výzkumu rakoviny děložního čípku. Zde je uvedeno několik konkrétních aplikací této buněčné linie.

Studie týkající se lidského papilomaviru (HPV): Buňky SiHa jsou HPV 16 pozitivní, a proto jsou cennými jednotkami pro studium infekce lidským papilomavirem, jeho molekulárních mechanismů a jeho úlohy při vývoji a progresi rakoviny děložního čípku. Výzkumníci tyto buňky využívají také ke zkoumání virové replikace, integrace a jejího vlivu na procesy v hostitelských buňkách. Studie provedená v roce 2020 využila buněčnou linii SiHa ke zkoumání role onkoproteinů HPV E6/E7 při vzniku rakoviny děložního čípku jejich cílením pomocí technologie CRISPR. Výsledky ukázaly, že vyřazení genů E6/E7 způsobilo inhibici růstu a apoptózu buněk SiHa. Tyto virové geny proto mohou sloužit jako zásadní lékové cíle pro vývoj terapie proti HPV asociovanému karcinomu děložního hrdla [3].
Biologie rakoviny: Buňky SiHa slouží jako neocenitelný model pro studium biologie rakoviny děložního čípku, včetně vývoje, progrese, metastazování a invaze. Vědci využívají tyto buňky ke zkoumání genetických mutací a základních molekulárních drah, které přispívají k rozvoji a růstu rakoviny děložního čípku, např. studie využila buňky SiHa a zjistila, že zvýšená regulace SEC61G (SEC61 translocon subunit gamma) podporuje proliferaci buněk rakoviny děložního čípku prostřednictvím aktivace kaskády MAPK [4].
Screening a testování léčiv: SiHa je široce používanou linií karcinomu děložního hrdla pro hodnocení účinnosti potenciálních protinádorových léčiv specifických pro HPV asociovaný karcinom děložního hrdla. Výzkumníci pomocí těchto buněk zkoumají antiproliferační, apoptotický a antimetastatický potenciál léčiv. Jako například studie provedená v roce 2019, která zkoumala cytotoxický potenciál extraktů z plodů Vatica diospyroides Symington Type SS na buněčné linii rakoviny děložního čípku SiHa [5].

Buňky SiHa pro váš výzkum!

430,00 €*

Obsah: 1.5 milliliter

Ceny bez daní a nákladů na dopravu

cryovial

Číslo výrobku: 305023

Výzkumné publikace s buňkami SiHa

Některé významné a často citované výzkumné publikace obsahují buněčnou linii SiHa pro karcinom děložního hrdla.

Protinádorový účinek aloe-emodinu na buňky karcinomu děložního hrdla souvisel s lidským papilomavirem E6/E7 a metabolismem glukózy

Tato publikace v časopise OncoTargets and Therapy (2019) navrhuje, že přírodní sloučenina aloe-emodin působí na buňky karcinomu děložního hrdla SiHa apoptoticky v souvislosti s HPV E6/E7 a metabolismem glukózy.

Hodnocení protinádorového potenciálu extraktu z listů Excoecaria agallocha (L.) na buněčné linii lidského karcinomu děložního hrdla (SiHa) a posouzení základního mechanismu účinku

Tento článek byl publikován v časopise Future Journal of Pharmaceutical Sciences v roce 2022. Tato studie zkoumala protinádorovou aktivitu extraktu z listů rostliny Excoecaria agallocha (L.) na buněčné linii rakoviny děložního čípku SiHa.

Antiproliferační účinek 1, 10-fenantrolinu ve spojení se sulfátovanými nanočásticemi ZnO u buněčné linie rakoviny děložního čípku SiHa

Tato studie publikovaná v časopise Journal of Sol-Gel Science and Technology (2022) navrhla, že molekula 1, 10-fenantrolinu po spojení s nanočásticemi síranu zinečnatého má významné antiproliferační účinky u buněk SiHa.

Astragalosid IV inhibuje invazi a metastazování buněk karcinomu děložního hrdla SiHa prostřednictvím drah PI3K a MAPK zprostředkovaných TGF-β1

Tento výzkum byl publikován v časopise Oncology Reports v roce 2019. Studie odhalila, že přírodní produkt Astragalosid IV potlačuje migraci a invazi buněk SiHa prostřednictvím modulace signálních drah PI3K a MAPK zprostředkovaných TGF-β1.

IFI16 podporuje progresi karcinomu děložního hrdla upregulací PD-L1 v imunomikroprostředí prostřednictvím dráhy STING-TBK1-NF-kB

Tato studie v časopise Biomedicine & Pharmacotherapy (2020) odhalila, že IFI16 (interferon-gamma inducible protein 16) reguluje gen PD-L1 prostřednictvím aktivace dráhy STING-TBK1-NF-kB a podporuje tak růst buněk karcinomu děložního hrdla SiHa.

Zdroje pro buněčnou linii SiHa: Zdroje: Protokoly, videa a další

Zde je několik online zdrojů týkajících se buněk SiHa.

Transfekce buněk SiHa: Tento výzkumný článek obsahuje protokol pro udržování buněk karcinomu děložního hrdla SiHa a pro transfekci buněk SiHa.

Následující odkaz obsahuje informace o buněčných kulturách pro buňky SiHa.

Buněčná linie SiHa: Tato webová stránka obsahuje mnoho cenných údajů o buněčné linii SiHa. Patří sem informace o růstových médiích, podmínkách kultivace, protokolech pro subkultivaci buněk SiHa a zacházení s jejími proliferačními a kryokonzervovanými kulturami.

Časté dotazy k buňkám karcinomu děložního hrdla SiHa

Odkazy

Melzer, C., J. von der Ohe a R. Hass, Concise review: crosstalk of mesenchymal stroma/stem-like cells with cancer cells provides therapeutic potential. Kmenové buňky, 2018. 36(7): p. 951-968.
Ostrowska, K.M., a další, Zkoumání vlivu vysoce rizikového lidského papilomaviru na biochemické složení buněk karcinomu děložního hrdla pomocí vibrační spektroskopie. Analytika, 2010. 135(12): p. 3087-3093.
Chen, Y., et al., In vitro and in vivo growth inhibition of human cervical cancer cells via human papillomavirus E6/E7' mRNAs' cleavage by CRISPR/Cas13a system. Antiviral Research, 2020. 178: p. 104794.
Fan, Y., et al., SEC61G podporuje proliferaci karcinomu děložního hrdla aktivací signální dráhy MAPK. Disease Markers, 2022. 2022.
Chothiphirat, A., et al., Anticancer potential of fruit extracts from Vatica diospyroides symington type SS and their effect on program cell death of cervical cancer cell lines [Protinádorový potenciál extraktů z plodů Vatica diospyroides symington typu SS a jejich vliv na programovou buněčnou smrt buněčných linií rakoviny děložního čípku ]. The Scientific World Journal, 2019. 2019.