Buňky RBL-2H3 - Význam RBL-2H3 v alergické reakci a imunologických studiích
Buněčná linie RBL-2H3 je bazofilní leukemická buněčná linie odvozená od potkana a používaná v imunologickém výzkumu. Slouží jako modelový systém pro studium fyziologie, chování a funkcí žírných buněk. Tyto buňky se také používají ke studiu alergických reakcí, imunologických procesů a testování a vývoji léčiv.
Článek poskytne informace o původu RBL-2H3, obecných vlastnostech, požadavcích na kultivaci a výzkumných aplikacích.
Buňky RBL-2H3: Původ a obecné vlastnosti
Před použitím buněčné linie bazofilů ve vašem výzkumu byste měli znát její původ a obecné vlastnosti. V této části článku se dozvíte základní informace o buňkách RBL-2H3. Například: Co jsou to žírné buňky RBL-2H3? Proč používat buňky RBL-2H3? Co jsou to buňky RBL-2H3 u bazofilní leukémie potkanů? Jaká je morfologie buněk RBL-2H3? Jsou buňky RBL-2H3 nesmrtelné?
- RBL-2H3 jsou buňky bazofilní leukémie odvozené z bazofilních buněk potkana Wistar v roce 1978 v laboratoři imunologie Národního ústavu pro výzkum zubů.
- Buňky RBL-2H3 mají receptorovou tyrozinkinázu c-kit a receptory pro proteázu žírných buněk II (RMCP-II), což z nich činí potenciální model žírných buněk. Proto se běžně nazývají žírnými buňkami, přestože pocházejí z krysích bazofilů [1].
- Při aktivaci uvolňují histamin a další mediátory a exprimují vysokoafinitní IgE receptory.
- Buňky RBL-2H3 vykazují morfologii podobnou fibroblastům.
Buňky RBL-2H3: Informace o kultivaci
Tato část vám pomůže seznámit se s některými klíčovými aspekty kultivace buněčné linie RBL-2H3. Dozvíte se: Jaký je čas zdvojení buněk RBL-2H3? Jaká je hustota výsevu buněk RBL-2H3? Jaký je protokol kultivace buněk RBL-2H3? Jaké je médium pro zmrazování buněčné linie RBL-2H3?
Klíčové body pro kultivaci buněk RBL-2H3
|
Doba zdvojení populace: |
Doba zdvojení žírných buněk RBL-2H3 je přibližně 50-60 hodin. |
|
Adherentní nebo v suspenzi: |
RBL-2H3 je adherentní buněčná linie. |
|
Poměr subkultivace: |
Pro buňky RBL-2H3 se poměr dělení udržuje v rozmezí 1:2 až 1:4. Adherentní buňky se promyjí 1 x roztokem PBS bez hořčíku a vápníku. Přidá se pasážovací roztok Accutase a buňky se ponechají 10 minut při pokojové teplotě, aby se oddělily ode dna kultivační nádoby. Přidá se čerstvé médium a buňky se odstředí. Sklizené buňky se opatrně resuspendují v čerstvém médiu a přelijí se do nových baněk obsahujících růstové médium. |
|
Růstové médium: |
Ke kultivaci buněk RBL-2H3 se používá médium EMEM obsahující 10 % FBS, 2 mM L-Glutamin, 2,2 g/l NaHCO3 a sůl EBSS. Médium by se mělo vyměňovat 2 až 3krát týdně. |
|
Růstové podmínky: |
Buňky RBL-2H3 se kultivují ve zvlhčeném inkubátoru nastaveném na teplotu 37 °C a připojeném na 5% zdrojCO2. |
|
Skladování: |
Buňky se skladují v plynné fázi kapalného dusíku nebo při teplotě nižší než -150 °C v elektrické mrazničce, aby byla dlouhodobě chráněna životaschopnost buněk. |
|
Proces zmrazování a médium: |
Pro zmrazení buněk RBL-2H3 se používá zmrazovací médium CM-1 nebo CM-ACF, které se používá při pomalém zmrazování. Tato metoda umožňuje snížení teploty o 1 °C za minutu a chrání buňky před šokem. |
|
Postup rozmrazování: |
Buňky RBL-2H3 se rozmrazují v předem nastavené vodní lázni (37 °C) po dobu přibližně 60 sekund. Poté se buňky přidají do čerstvého kultivačního média a odstředí se. Tento krok je nezbytný k odstranění složek zmrazovacího média. Poté se buněčná peleta resuspenduje v růstovém médiu a buňky se dávkují do kultivační baňky. |
|
Úroveň biologické bezpečnosti: |
Buňky RBL-2H3 by měly být uchovávány v laboratořích s biologickou bezpečností 1. |
Výhody a omezení linie bazofilních buněk RBL-2H3
Buňky RBL-2H3 se běžně používají v imunologickém výzkumu. V této části jsou popsány jejich hlavní výhody a omezení.
Výhody
- Snadná kultivace: Buňky RBL-2H3 lze snadno kultivovat a udržovat v laboratorním prostředí. To usnadňuje nákladově efektivní a reprodukovatelné experimenty, což z nich činí oblíbenou volbu pro počáteční studie v imunologii.
Omezení
- Není lidského původu: Buňky RBL-2H3 pocházejí z potkaních bazofilů a nemusí přesně napodobovat lidské biologické procesy, což může omezovat jejich použitelnost ve výzkumných studiích zaměřených na člověka. To vyžaduje opatrnou interpretaci údajů při extrapolaci výsledků na lidské systémy.
- Zjednodušený model žírných buněk: Přestože tyto buňky představují základní model pro studium funkcí žírných buněk, nereprezentují plně komplexní povahu interakcí žírných buněk v lidském imunitním systému. V důsledku toho nemusí adekvátně modelovat mnohostranné role žírných buněk v imunitních reakcích nebo chorobných stavech in vivo.
Buněčná linie RBL-2H3: RBL-2H: základní kámen imunologického výzkumu
Výzkum bazofilů a žírných buněk s využitím buněčné linie RBL-2H3
Buněčná linie RBL-2H3, odvozená od druhu Rattus norvegicus, slouží jako klíčový model pro studium biologie bazofilů a žírných buněk. Tyto krysí žírné buňky poskytují zásadní poznatky o uvolňování mediátorů žírnými buňkami, které jsou klíčové pro pochopení alergických stavů, jako je alergická rýma. Prostřednictvím těchto buněk vědci zkoumají dynamiku buněčných receptorů a vytváření imunologických synapsí, které jsou klíčové pro reakci imunitního systému na alergeny. zajímavá studie publikovaná v roce 2019 využívala buněčnou linii RBL-2H3 a zkoumala mechanismy stojící za pseudoalergickými reakcemi vyvolanými injekcí Qingkailing. Studie zjistila, že tuto alergickou reakci v buňkách částečně vyvolává signální kaskáda PI3K-RAC1 [2]
Dynamika imunologických synapsí ve výzkumu alergie
Buňky RBL-2H3, hojně využívané v imunologickém výzkumu, jsou zvláště účinné pro zkoumání dynamiky imunologických synapsí. To napomáhá objasnit komunikační procesy imunitního systému, s využitím při studiu žírných buněk periferní krve i peritoneálních žírných buněk. Takový výzkum je nezbytný pro komplexní pochopení imunitní odpovědi v systémovém i lokálním kontextu
Screening léčiv a testování toxicity
Při screeningu a testování léčiv se využívá reaktivita buněk RBL na různé podněty, včetně studia toho, jak H2O2 inhibuje reakce zprostředkované IgE. Tyto buňky hrají zásadní roli při vývoji léčby nemocí, jako jsou streptokokové infekce, kde streptokoky skupiny mitis inhibují aktivaci žírných buněk. Kromě toho vědci pomocí tohoto modelu RBL 2H3 mc hodnotí toxické účinky různých látek, včetně chemických látek, léčiv a nanočástic. Například nedávná studie (2022) hodnotila cytotoxicitu polystyrenových mikroplastů na buňky RBL 2H3. Zjistili, že mikroplasty poškozují organely buněk RBL-2H3 a podporují buněčnou smrt [3]. Další studie z roku 2021 hodnotila protialergický a protizánětlivý potenciál přírodního produktu, neferinu, na modelu mc RBL 2H3. Studie odhalila dobré protialergické a protizánětlivé vlastnosti této sloučeniny [4]
Pokročilé metodiky v imunologických měřeních
Konzistentní a měřitelné uvolňování mediátorů z buněk RBL-2H3 je ideální pro pohodlnou fluorimetrii, což usnadňuje přesná a přesná měření, která jsou zásadní pro studium onemocnění a hodnocení terapeutických látek.
Buněčná linie RBL-2H3, která pochází z druhu Rattus norvegicus, je neocenitelným přínosem pro základní i aplikovaný výzkum v oblasti imunologie. Nabízí rozsáhlé možnosti pro rozvoj našich znalostí a léčby imunologických onemocnění
Buněčná linie RBL-2H3 pro pokročilý imunologický výzkum
Buňky RBL-2H3: Výzkumné publikace
Níže jsou uvedeny některé zajímavé výzkumné publikace týkající se žírných buněk RBL-2H3:
Inhibiční aktivita narirutinu na degranulaci RBL-2H3 buněk
Tato výzkumná práce byla publikována v časopise Immunopharmacology and Immunotoxicology (2021). Studie navrhla, že narirutin, přírodní sloučenina, působí inhibičně na degranulace RBL 2H3 prostřednictvím regulace NF-κB, MAPK a signální dráhy tyrozinkinázy.
Tento výzkum v časopise International Journal of Molecular Sciences (2020) navrhl, že sloučenina apigeninu významně potlačuje alergické a zánětlivé reakce buněk RBL-2H3 a RAW264.7. Může tedy sloužit jako potenciální prostředek pro boj s nemocemi souvisejícími s imunitou.
Tato výzkumná práce v časopise International Journal of Molecular Sciences (2021) hodnotila protialergické a protizánětlivé účinky přírodního produktu, saponarinu, za použití různých buněčných linií, včetně RBL-2H3.
Tato studie založená na důkazech komplementární a alternativní medicíny (2014) zjistila, že extrakty a některé účinné složky benchalokawichianu mají potenciální inhibiční účinky na uvolňování ß-hexosaminidázy z RBL 2H3.
Tento článek byl publikován v roce 2018 v časopise International Journal of Biological Macromolecules. Studie uvádí, že spirulina maxima, přírodní produkt, inhibuje degranulace RBL 2H3 tím, že zabraňuje fosforylaci MAPKs a AKT.
Zdroje pro buněčnou linii RBL-2H3: Protokoly, videa a další zdroje
RBL-2H3 je široce používaná linie žírných buněk. Zde jsou uvedeny dostupné zdroje zahrnující protokoly kultivace a transfekce RBL-2H3:
- RBL 2H3 MC model: Tento výzkumný článek obsahuje protokoly pro udržování kultur RBL-2H3 a pro transfekci RBL-2H3.
Zde jsou uvedeny některé zdroje vysvětlující protokol kultivace buněk RBL-2H3:
- RBL-2H3 buňky: Tato webová stránka je pro vás přínosná, pokud se chcete seznámit s protokoly buněčných kultur pro buněčnou linii RBL-2H3. Kromě toho obsahuje informace o médiích a podmínkách kultivace buněk RBL-2H3.
Buněčná linie RBL-2H3: RBL2-2: Nejčastější dotazy pro výzkumné pracovníky
Odkazy
- Passante, E. a N. Frankish, Buněčná linie RBL-2H3: její původ a vhodnost jako model žírné buňky. Inflamm Res, 2009. 58(11): p. 737-45.
- Li, Q., et al., Pseudoalergická reakce způsobená injekcí Qingkailing částečně prostřednictvím signální dráhy PI3K-Rac1 v buňkách RBL-2H3. Toxicology Research, 2019. 8(3): p. 353-360.
- Liu, L., a další, Polystyrenové mikro(nano)plasty poškozují organely buněk RBL-2H3 a podporují MOAP-1 k indukci apoptózy. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: p. 129550.
- Chiu, K.-M., a další, Antialergické a protizánětlivé účinky neferinu na buňky RBL-2H3. International Journal of Molecular Sciences, 2021. 22(20): p. 10994.