Buněčná linie MCF-7: Základní kámen ve výzkumu rakoviny prsu a testování léků
Buněčná linie MCF-7, vytvořená v roce 1973 z buněk lidského adenokarcinomu prsu, stojí v popředí výzkumu rakoviny prsu a představuje důležitý model pro odhalení složité biologie rakoviny prsu s pozitivními estrogenovými a progesteronovými receptory. Tyto buňky slouží jako mikrokosmos lidského karcinomu prsu a vykazují vlastnosti, které jsou klíčové pro studium hormonálně závislého i nezávislého růstu nádoru. Výzkumníci využívají buňky MCF-7 ke zkoumání složitého tance hormonů, jako je estrogen a tamoxifen, při regulaci proliferace nádorových buněk a pronikají do molekulárních složitostí od tvorby sféroidů až po klinickou progresi rakoviny prsu
Ve studiích metastazujícího karcinomu prsu mají buňky MCF-7 klíčovou roli a jsou využívány v nejmodernějších přístupech, jako je vkládání do mikrotkanin ve scaffoldech nebo volných hydrogelů, které napodobují přirozené prostředí nádoru. To pomáhá při zkoumání metastatického onemocnění, zejména u žen po menopauze, a rozdílných účinků na levý a pravý prs. Jádrem tohoto výzkumu jsou farmakogenetické a farmakoepigenetické úvahy, přičemž buňky MCF-7 vrhají světlo na charakteristiky onemocnění specifické pro jednotlivá stadia a reakce na léčbu in vivo.
Buňky MCF-7 také slouží jako základ v onkologických studiích pro testování inovativních terapií, jako je vysokonapěťová elektrochemoterapie, a ve zvířecích modelech, které věrně kopírují lidské nádorové buňky prsu. Dalším zkoumaným aspektem je úloha mezenchymálních kmenových buněk při modulaci chování těchto nádorových buněk. Pochopení interakce mezi estrogenem, androgenem a růstem buněk karcinomu prsu prostřednictvím MCF-7 navíc poskytuje neocenitelné poznatky, které podporují neustálé hledání poznatků ve stále se rozvíjející oblasti výzkumu rakoviny.
Buněčná linie MCF-7: Původ a obecné informace
Před prací s buněčnou linií MCF-7 je nezbytné pochopit, morfologii, velikost buněk a další obecné charakteristiky.
Název "MCF-7" je zkratkou pro Michigan Cancer Foundation - 7. Byla založena Dr. Soulem v Michigan Cancer Foundation v Detroitu ve státě Michigan. Tato buněčná linie byla izolována v roce 1970 z pleurálního výpotku 69leté bělošky s metastazujícím adenokarcinomem prsu. MCF-7 je luminální A podtyp karcinomu prsu, který exprimuje estrogenové, progesteronové a glukokortikoidní receptory [1, 2].
Buňky MCF-7 jsou hormonálně závislé buňky karcinomu prsu. Tyto buňky mamárního epitelu mají nízký metastatický potenciál a jsou méně agresivní ve srovnání s hormonálně nezávislými buňkami MDA-MB-231 [3].
- Morfologie buněk MCF-7:Morfologie podobná epitelu; buňky rostou jako monovrstvy se silnými buněčnými adhezemi; vzhled připomínající dlažební kostku
- Velikost buněk: Pohybuje se mezi 19,9 μm a 33,9 μm
- Genom a ploidie: Modální počet chromozomů: 82; rozsah ploidie: 66 až 87
- Varianty buněčné linie MCF-7: Existuje více variant KO, které vykazují odlišné genetické profily a genové exprese ve srovnání s původními buňkami MCF-7 [4]
Informace o buněčné kultuře buněk MCF-7
MCF-7 je široce rozšířená buněčná linie kultivovaná v laboratořích pro výzkum rakoviny prsu. Před kultivací těchto buněk vám může vyvstat mnoho otázek, například jaká je doba zdvojení buněk MCF-7? Jsou buňky MCF-7 adherentní? A jaké je kultivační médium pro buňky MCF-7? V této části se budeme zabývat následujícími klíčovými body:
|
Aspekt |
Popis |
|
Doba zdvojení |
Průměrná doba zdvojení buněk MCF-7 je 24 hodin |
|
Adherentní nebo v suspenzi |
Buňky MCF-7 jsou adherentní buňky, které rostou jako monovrstvy a tvoří buněčné agregáty |
|
Hustota výsevu |
Pomalu rostoucí buňky MCF-7 se vysévají při hustotě 3 x 10^4 buněk/cm^2. Po odstranění média se adherentní buňky MCF-7 promyjí 1 x PBS. Buňky se oddělí pomocí pasážovacího roztoku Accutase. Přidá se kultivační médium a buňky se odstředí. Buněčné pelety se resuspendují a přenesou do nových baněk s čerstvým růstovým médiem |
|
Růstové médium |
Pro pěstování buněk MCF-7 se používá Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM) doplněné 10 % FBS a 2,5 mM L-glutaminem. Médium se obnovuje 2 až 3krát týdně |
|
Růstové podmínky |
Buňky MCF-7 se pěstují ve zvlhčeném inkubátoru při 37 °C a 5 % CO2 |
|
Skladování |
Buňky se skladují v plynné fázi tekutého dusíku (-195 °C), aby se zachovala jejich životaschopnost |
|
Postup zmrazování a médium |
Pro zmrazení buněk MCF-7 se upřednostňuje metoda pomalého zmrazování, kdy se teplota postupně snižuje o 1 °C, aby se ochránila životaschopnost buněk. Mrazicí médium používané pro buňky MCF-7 je CM-1 nebo CM-ACF |
|
Postup rozmrazování |
Zmrazené buňky MCF-7 se rychle promíchají v předehřáté vodní lázni (37 °C) po dobu 40-60 sekund. V lahvičce se ponechá malá hrouda ledu, aby se udržel chlad. Buňky lze přímo kultivovat v baňce s čerstvým růstovým médiem nebo odstředit, aby se odstranilo zmrazené médium. Vzniklá buněčná peleta se opatrně resuspenduje v čerstvém médiu a dávkuje se do baněk pro růst |
|
Úroveň biologické bezpečnosti |
Pro manipulaci s trojnásobně pozitivními buňkami MCF-7 se používá úroveň biologické bezpečnosti 1 |
MCF-7: Výhody a omezení
Všechny nádorové buněčné linie mají určité výhody a nevýhody. Jaké jsou tedy výhody buněk MCF-7, které je činí atraktivními pro použití ve výzkumu? A jaká jsou omezení buněčné linie MCF-7?
Výhody
Buněčná linie MCF-7 má mnoho výhod. Zde je několik z nich:
- Dobře charakterizované: Buněčná linie MCF-7 je dobře charakterizovaná, a proto se často používá v laboratořích pro výzkum rakoviny
- Citlivost na estrogen: MCF-7 jsou buňky karcinomu prsu reagující na estrogen. Jejich růst a proliferace závisí na estrogenu a exprimují vyšší hladiny mRNA estrogenového receptoru alfa (ERα) než ERβ. Díky tomu jsou buňky MCF-7 velmi užitečné pro studium úlohy signalizace estrogenových receptorů v biologii rakoviny prsu.
- Hormonálně závislé: Buňky MCF-7 jsou reprezentativním modelem hormonálně závislého karcinomu prsu s pozitivními receptory.
Omezení
Omezení, která se běžně přisuzují buňkám MCF-7, jsou následující:
- Pomalá rychlost růstu: V porovnání s jinými buněčnými liniemi karcinomu prsu rostou buňky MCF-7 pomalu. Proto se tyto buňky pro provádění různých experimentů s buněčnými kulturami vysévají při relativně vysoké hustotě buněk.
Buňky MCF-7: Vliv na výzkum rakoviny prsu: multidisciplinární výzkum a jeho důsledky pro rakovinu prsu
Charakterizace rakoviny prsu pomocí buněk MCF-7
Buňky MCF-7 jsou základním kamenem ve výzkumu rakoviny prsu a pocházejí z tkáně lidského adenokarcinomu prsu z roku 1973. Tyto buňky jsou zvláště významné při studiu karcinomu prsu s pozitivními estrogenovými receptory díky expresi estrogenových receptorů. Umožňují vědcům zkoumat nuance růstu závislého na estrogenu a účinnost hormonální léčby, jako je tamoxifen, a dále objasňovat mechanismy účinku a rezistence vůči této léčbě
Kromě studií souvisejících s hormony jsou buňky MCF-7 klíčové pro zkoumání rakoviny prsu na molekulární úrovni. Jejich využití sahá od analýzy molekulárního profilu nádorů až po studium proliferace a progrese nádorových buněk v rámci 2D kultur a trojrozměrných mikrotkání ve scaffoldech, které věrně odrážejí nádorové mikroprostředí in vivo
Boj proti rezistenci na léky u rakoviny prsu
Buňky MCF-7 významně přispěly k pochopení a překonání lékové rezistence při léčbě rakoviny prsu. Navozením rezistence působením vysokých dávek chemoterapeutik mohou vědci zkoumat mechanismy, které vedou k relapsu rakoviny a snížení míry přežití pacientů. Důkladné studie zahrnující buňky MCF-7 odhalily roli dlouhé nekódující RNA HOTAIR v rezistenci vůči lékům, což představuje potenciální cíl pro terapeutický zásah
Průběžný vývoj chemoterapeutických léčiv se rovněž opírá o buňky MCF-7 při screeningu protinádorového potenciálu různých látek, včetně přírodních produktů, syntetických sloučenin a nanočástic. Tyto snahy jsou nezbytné pro vytvoření účinnějších léčebných postupů proti rakovině prsu, které si poradí s kmeny rakovinných buněk rezistentních vůči lékům
Pokrok ve vývoji léčebných postupů a klinických aplikací
Poznatky získané z výzkumu využívajícího buňky MCF-7 se rozšiřují na vývoj léčebných postupů pro rakovinu prsu. Buňky MCF-7 slouží jako důležitý nástroj pro předklinické testování a používají se pro screening sloučenin, stanovení cytotoxicity a hodnocení indukce apoptózy. Tento výzkum má hluboké důsledky pro budoucí klinické aplikace, kdy poznatky ze studií využívajících buňky MCF-7 budou i nadále sloužit jako podklad pro inovativní strategie zlepšující péči o pacienty a výsledky léčby
Odhalte svůj výzkumný potenciál: Nakupujte produkty pro buňky MCF-7 ještě dnes!
MCF-7: Publikace
O buňkách MCF-7 existuje nepřeberné množství publikací. V této části se budeme zabývat pouze některými významnými příklady:
Tento článek publikoval Zhixiang Li a jeho kolegové v časopise Experimental and Therapeutic Medicine v roce 2019. Studie navrhla, že knockdown dlouhé nekódující RNA HOTAIR eliminuje rezistenci k doxorubicinu u buněk karcinomu prsu MCF-7 regulací dráhy PI3K/AKT/mTOR.
Tato publikace v časopise Chemico-Biological Interactions použila ke studiu účinku sloučeniny Guajadial na lékovou rezistenci mateřské a lékově rezistentní buňky MCF-7. Tato sloučenina inhibuje expresi ABC transportéru a snižuje regulaci dráhy PI3K/AKT, čímž zvrátí rezistenci na více léků.
Tento publikovaný článek popisuje synergické interakce kanabidiolu a pěti chemoterapeutických léčiv v buňkách MCF-7. Studie navrhuje synergickou adjuvantní terapii založenou na kanabidiolu pro léčbu rakoviny prsu.
Tento článek publikovaný v časopise The EuroBiotech Journal použil buňky MCF-7 k hodnocení protinádorového účinku fenolových sloučenin přítomných v některých tuniských léčivých rostlinách.
Studie navrhla zelené nanočástice s extraktem z listů Allium cepa jako kandidáta na léčivo. Tyto nanočástice vykazují protirakovinnou a antioxidační aktivitu u buněk MCF-7.
Zdroje buněk MCF-7: Protokoly, videa a další zdroje
MCF-7 je často kultivovaná buněčná linie rakoviny prsu. Existuje několik dostupných zdrojů o této buněčné linii, které vysvětlují její manipulaci, kultivaci a transfekční protokoly.
Protokoly kultivace buněk
Níže jsou uvedeny některé zdroje obsahující informace o kultivaci buněk MCF-7.
- Dělení buněk: Tento dokument vám pomůže seznámit se s postupem pasážování a rozmrazování buněk MCF-7.
- Buňky MCF-7: Tento článek poskytne veškeré základní i pokročilé znalosti o buňkách MCF-7. Obsahuje také protokol kultivace buněk MCF-7.
Protokoly transfekce
Zde jsou uvedeny některé zdroje obsahující metody transfekce pro buněčnou linii MCF-7.
- Transfekce plazmidové DNA do buněk MCF-7: Tento odkaz na webové stránky vám poskytne podrobný protokol transfekce pro buňky MCF-7.
- Transfekce buněk MCF-7: Tento odkaz obsahuje optimalizované transfekční protokoly týkající se buněčné linie MCF-7, o které se podělili vědci z celého světa.
Videa týkající se buněčné linie MCF-7
Existuje mnoho zdrojů videí týkajících se buněk MCF-7. Zde si povíme o některých, které se týkají transfekce a kultivace MCF-7.
- Transfekce buněk MCF-7: Toto video ukazuje protokol transfekce buněk MCF-7.
- Pasážování buněk: Toto video vysvětluje základní protokol používaný při kultivaci buněčných linií.
- Zmrazení adherentních buněk: Toto video obsahuje informace o zmrazování adherentních buněčných linií.
Očekáváme, že vás tento článek dobře navedl k manipulaci, subkultivaci a údržbě buněk MCF-7. Kromě toho vám může pomoci seznámit se s výhodami a výzkumnými aplikacemi této buněčné linie. Pokud plánujete pracovat s buňkami MCF-7, objednejte si je u nás.
Odpovědi na časté otázky: Zkoumání buněčných linií MCF-7
Odkazy
- Moon, H.-r., et al., "Subtype-specific characterization of breast cancer invasion using a microfluidic tumor platform" PloS one, 2020, 15(6)
- Hegde, S.M., a další, "Interakce jaderných receptorů (ER, PR a GR) a jejich steroidních hormonů v buňkách MCF-7" Mol Cell Biochem, 2016, 422(1-2)
- Comşa, Ş., A.M. Cimpean a M. Raica, "Příběh buněčné linie MCF-7 pro karcinom prsu: 40 let zkušeností ve výzkumu" Anticancer research, 2015, 35(6)
- Lee, A.V., S. Oesterreich a N.E. Davidson, "MCF-7 cells-changing the course of breast cancer research and care for 45 years." (Buňky MCF-7 - 45 let mění směr výzkumu a péče o rakovinu prsu) JNCI: Journal of the National Cancer Institute, 2015, 107(7)
- Li, Z., a další, "Knockdown lncRNA-HOTAIR downreguluje rezistenci buněk karcinomu prsu vůči doxorubicinu prostřednictvím signální dráhy PI3K/AKT/mTOR" Experimentální a terapeutická medicína, 2019, 18(1)
- Li, Y., et al. "Guajadial zvrátí multirezistenci inhibicí exprese ABC transportéru a potlačením dráhy PI3K/Akt u lékově rezistentních buněk karcinomu prsu" Chemicko-biologické interakce, 2019, 305
- Ruenraroengsak, P., et al., "Frizzled-7-targeted delivery of zinc oxide nanoparticles to drug-resistant breast cancer cells" Nanoscale, 2019, 11(27)
- Shrihastini, V., a další, "Plant derived bioactive compounds, their anti-cancer effects and in silico approaches as an alternative target treatment strategy for breast cancer: An updated overview." Cancers, 2021, 13(24)
- Erdogan, O., et al., "Green synthesis of silver nanoparticles via Cynara scolymus leaf extracts: The characterization, anticancer potential with photodynamic therapy in MCF7 cells." (Charakterizace, protinádorový potenciál s fotodynamickou terapií u buněk MCF7) PloS one, 2019, 14(6)
- Barbosa, A.M. a F. Martel, "Targeting glucose transporters for breast cancer therapy: Vliv přírodních a syntetických sloučenin." (The effect of natural and synthetic compounds Cancers, 2020, 12(1)
