Buněčná linie HT22

HT22 je myší neuronální buněčná linie, která se běžně používá v neurovědeckém výzkumu. Je cenná pro studium neurogenerativních poruch a testování potenciálních neuroprotektivních terapií nebo léčby. Kromě toho jsou buňky HT22 citlivé na glutamát, a proto se používají ke zkoumání glutamátem indukované toxicity nebo poškození neuronů.

Tento článek upozorňuje na nezbytné aspekty buněk HT22, které vám mohou pomoci při vaší výzkumné práci. Bude se zabývat především:

Obecné vlastnosti a původ buněk HT22
Informace o kultivaci buněčné linie HT22
Výhody a nevýhody buněčné linie HT22
Výzkumné aplikace buněčné linie HT22
Výzkumné publikace s buňkami HT22
Zdroje pro buňky HT22: Protokoly, videa a další zdroje informací o HT HTV

1. Obecné vlastnosti a původ buněk HT22

Tato část článku objasní původ a obecné vlastnosti buněk HT22. Znalost těchto informací o buněčné linii je nezbytná před zahájením práce s ní. Dozvíte se zde: Co jsou buňky HT22? Jaká je morfologie hipokampálních buněk HT22? Jaká je velikost buněk HT22?

HT22 je kontinuální buněčná linie odvozená z oblasti hipokampu myšího mozku. Jedná se o subklon rodičovské buněčné linie HT-4, která vznikla imortalizací myších neuronálních tkání prostřednictvím teplotně citlivého polyomavirového antigenu T similského viru 40 (SV40).

Tyto buňky se liší od zralých hipokampálních buněk, protože postrádají glutamátové a cholinergní receptory jako zralé neurony hipokampálního původu. Proto nejsou vhodné pro výzkumné studie týkající se paměti [1].

Buňky HT22 mají vzhled podobný epiteliálním buňkám.

Amyloidní plaky tvořící se mezi neurony u Alzheimerovy choroby.

2. Informace o kultivaci buněčné linie HT22

Buňky HT22 se používají ve výzkumných laboratořích v oblasti neurověd. Před kultivací těchto buněk hledají vědci základní informace o buněčných kulturách, které jim usnadní a zefektivní práci. Tento oddíl se zabývá všemi klíčovými body pro kultivaci buněk HT22. Budete vědět: Jaká je doba zdvojení buněk HT22? Jak se kultivují buňky HT22? Jaký je protokol kultivace buněk HT22? Jaká jsou média pro buňky HT22?

Klíčové body pro kultivaci buněk HT22

Doba zdvojení:	Doba zdvojení buněk HT22 je přibližně 15 hodin.
Adherentní nebo v suspenzi:	Buňky HT22 jsou adherentní.
Poměr subkultivace:	Poměr subkultivace pro hipokampální buňky HT22 je 1:3 až 1:6. Krátce se odstraní médium a adherentní buňky se opláchnou 1 x PBS. Do baňky se přidá disociační roztok akutázy a buňky se inkubují 8 až 10 minut při pokojové teplotě. Poté se přidá čerstvé kultivační médium a buňky se shromáždí v lahvičce k odstředění. Získaná buněčná peleta se opatrně resuspenduje a buňky se dávkují do kultivační baňky pro růst.
Růstové médium:	Pro kultivaci buněk HT22 se používá médium DMEM. Pro optimální růst buněk je doplněno 10 % FBS, 4,5 g/l glukózy, 4 mM L-Glutaminu, 1,5 g/l NaHCO3 a 1,0 mM pyruvátu sodného.
Růstové podmínky:	Buněčné kultury HT22 se uchovávají ve zvlhčeném inkubátoru (teplota 37 °C) s 5%_{přívodem CO2}.
Skladování:	Zmrazené buňky HT22 lze dlouhodobě skladovat při teplotě nižší než -150 °C buď v plynné fázi kapalného dusíku, nebo v elektrické mrazničce s velmi nízkou teplotou.
Proces zmrazování a médium:	Buňky HT22 lze zmrazit v médiu CM-1 nebo CM-ACF metodou pomalého zmrazování. Tento postup umožňuje snížení teploty vzorku pouze o 1 °C za minutu, chrání buňky před šokem a pomáhá zachovat jejich životaschopnost.
Proces rozmrazování:	Buňky se rozmrazují ve vodní lázni o teplotě 37 °C po dobu 40 až 60 sekund, dokud nezůstane malý ledový shluk. Poté se do buněk přidá kultivační médium a odstředí se, aby se odstranily složky mrazicího média. Buněčná peleta se resuspenduje a buňky se přelijí do nové baňky obsahující kultivační médium. Poté se buňky inkubují při 37 °C v inkubátoru po dobu nejméně 24 hodin.
Úroveň biologické bezpečnosti:	Pro kultivaci buněk HT22 je povinné laboratorní prostředí úrovně biologické bezpečnosti 1.

30 % a 90 % konfluentní monovrstvy buněk HT22 v buněčné kultuře.

3. Výhody a nevýhody buněčné linie HT22

S hipokampálními buňkami HT22 jsou spojeny některé výhody a nevýhody, které je odlišují od jiných neuronálních buněčných linií. Zde jsou uvedeny některé významné výhody a nevýhody této buněčné linie.

Výhody

Výhody myší neuronální buněčné linie HT22 jsou následující:

Rychlý růst
Buňky HT22 mají dobu zdvojení 15 hodin, což umožňuje rychlé a efektivní experimenty a napomáhá včasnému získání výsledků výzkumu.
Imortalizace
HT22 je imortalizovaná buněčná linie, která zajišťuje nepřetržitý růst po delší dobu. To zajišťuje stálou dostupnost buněk, snižuje čas a náklady a usnadňuje dlouhodobé experimenty s konzistentními výsledky.

Nevýhody

Nevýhody buněk HT22 jsou následující:

Myší původ
Buněčná linie HT22 byla odvozena z tkáně myšího mozkového hipokampu, která nemusí plně reprezentovat složitost fyziologie a chování lidských neuronálních buněk, což omezuje jejich translační význam.

4. Výzkumné aplikace buněčné linie HT22

Buňky HT22 jsou hojně využívány v neurobiologickém výzkumu. V této části článku je diskutováno několik slibných aplikací této buněčné linie:

Neurovědecký výzkum: Buňky HT22 se hojně využívají ve výzkumu neurodegenerativních onemocnění, tj. Alzheimerovy a Parkinsonovy choroby. Jsou považovány za cenný výzkumný nástroj pro studium neurotoxicity a mechanismů oxidačního stresu souvisejících s těmito chorobami. Výzkum provedený v roce 2020 zjistil, že dráha PI3K/AKT/CREB se podílí na nervové toxicitě vyvolané hyperglykémií v buňkách HT22 [2]. Podobně nedávná studie navrhla, že dráha Nrf2/HO-1 a signalizační osa NF- κB hrají významnou roli v toxicitě amyloidu beta v buňkách HT22 [3].
Screening léčiv: Buňky HT22 se široce používají pro účely testování a screeningu léčiv. Pomáhají výzkumníkům identifikovat potenciální terapeutické látky vykazující neuroprotektivní účinky v boji proti neurodegenerativním onemocněním. Studie provedená v roce 2019 zkoumala neuroprotektivní potenciál sloučeniny tetrahydrokurkuminu v hipokampálních buňkách HT22 ošetřených glutamátem. Glutamát zde vyvolává oxidační stres v buňkách HT22 a způsobuje buněčnou smrt aktivací mitogenem aktivovaných proteinkináz [4].

800,00 €*

Obsah: 1.5 milliliter

Ceny bez daní a nákladů na dopravu

cryovial

Číslo výrobku: 305158

5. Výzkumné publikace s buňkami HT22

Zde je několik zajímavých výzkumných prací s buněčnou linií HT22:

Zkoumání neuroprotektivních účinků krocinů prostřednictvím antioxidačních aktivit v buňkách HT22 a u myší s Alzheimerovou chorobou

Tato studie v časopise International Journal of Molecular Medicine (2019) navrhla neuroprotektivní potenciál krocinu, sloučeniny izolované z Crocus sativus L. vbuňkách HT22poškozenýchL-glutamátem.

Nové oxindolové deriváty zabraňují buněčné smrti vyvolané oxidačním stresem v myších hipokampálních buňkách HT22

Tato publikace v časopise Neuropharmacology (2018) uvádí, že deriváty oxindolu chrání před smrtí buněk HT22 vyvolanou oxidačním stresem.

Ginsenosid Rb2 potlačuje glutamátem zprostředkovaný oxidační stres a buněčnou smrt neuronů v buňkách HT22

Tato výzkumná práce byla publikována v časopise Journal of Ginseng Research v roce 2019. Tato studie zkoumala neuroprotektivní účinky přírodního produktu, ginsenosidu Rb2, s využitím buněčné linie HT22. Studie zjistila, že ginsenosid rb2 účinně snižuje oxidativní stres a buněčnou smrt vyvolanou glutamátem v myších hipokampálních buňkách HT22.

Nanočástice stříbra indukovaly cytotoxicitu u buněk HT22 prostřednictvím autofagie a apoptózy prostřednictvím signální dráhy PI3K/AKT/mTOR

Tato studie v časopise Ecotoxicology and Environmental Safety (2021) hodnotila cytotoxický potenciál nanočástic stříbra v buněčné linii HT22.

Ferrostatin-1 chrání buňky HT-22 před oxidační toxicitou

Tento výzkumný článek byl publikován v roce 2020 v časopise Neural regeneration research. Navrhoval, že ferrostatin-1, inhibitor ferroptózy, zabraňuje oxidační toxicitě u hipokampálních buněk HT22.

6. Zdroje pro buňky HT22: Zdroje: Protokoly, videa a další zdroje pro HT22

Některé online zdroje o buňkách HT22 vysvětlují jejich transfekci, diferenciaci a protokoly buněčných kultur:

HT22 transfekce: Tento dokument obsahuje optimalizovaný protokol pro transfekci buněk HT22 na 24- a 96jamkových destičkách pro buněčné kultury.
Diferenciace buněk HT22: Tento článek vás komplexně seznámí s protokolem diferenciace buněk HT22.

Následující odkaz obsahuje protokol kultivace buněk HT22:

Subkultivace buněk HT22: Tento odkaz vám pomůže seznámit se s protokolem subkultivace buněčné linie HT22. Kromě toho vám pomůže naučit se protokol pro vyvolání neurotoxicity u buněk.
HT22 hipokampální buňky: Tato webová stránka obsahuje mnoho užitečných informací o době zdvojení buněk HT22, médiích a protokolech kultivace buněk.

Odkazy

He, M., et al., Differentiation renders susceptibility to excitotoxicity in HT22 neurons (Diferenciace činí neurony HT22 náchylnějšími k excitotoxicitě). Neural Regen Res, 2013. 8(14): p. 1297-306.
Zhang, S., et al., Fisetin zabraňuje HT22 buňkám před neurotoxicitou vyvolanou vysokou glukózou prostřednictvím signální dráhy PI3K/Akt/CREB. Frontiers in Neuroscience, 2020. 14: p. 241.
Zhang, R.-l., et al., Protective effects of berberine against β-amyloid-induced neurotoxicity in HT22 cells via the Nrf2/HO-1 pathway. Bioorganická chemie, 2023. 133: p. 106-210.
Park, C.-H., et al., Neuroprotective effects of tetrahydrocurcumin against glutamate-induced oxidative stress in hippocampal HT22 cells [Neuroprotektivní účinky tetrahydrokurkuminu proti oxidačnímu stresu vyvolanému glutamátem v buňkách hipokampu HT22 ]. Molecules, 2019. 25(1): p. 144.