Buněčná linie HT-29

HT-29 je lidská buněčná linie kolorektálního karcinomu s širokým spektrem aplikací ve výzkumu rakoviny a toxikologie. Tyto buňky jsou například citlivé na standardní chemoterapeutické léčby kolorektálního karcinomu. Kromě toho je buněčná linie HT-29 dobře charakterizovaným in vitro modelem pro zkoumání reakce střevního epitelu na bakteriální infekci. Buňky HT-29 napodobují vlastnosti zralých střevních buněk, tj. enterocytů, a jsou proto vhodné pro studie adheze a mechanistiky.

Buňky HT-29: Původ a obecné informace

Před použitím jakékoli buněčné linie byste měli znát její obecné charakteristiky a původ. V této sekci se dozvíte: Co jsou buňky HT-29? Je HT-29 buněčná linie kolorektálního karcinomu? Jaká je morfologie buněk HT-29?

Co je buněčná linie HT-29? HT-29 je buněčná linie kolorektálního adenokarcinomu založená v roce 1964 Trempem a Fogh. Buňky byly původně odvozeny z primárního nádoru bělošské ženy (44 let) s adenokarcinomem tlustého střeva a konečníku [1]. Od svého založení se tato buněčná linie používá ke studiu biologie nádorových onemocnění.

Morfologie buněk HT-29: Buněčná linie HT-29 má obecně epiteliální morfologii. Diferencované buňky rostou v monovrstvách, tvoří těsné mezibuněčné spoje a mají apikální kartáčový lem. Pokud jsou tyto buňky pěstovány v médiu s nedostatkem glukózy nebo jsou jim podávány induktory, jako je butyrát nebo kyselina, vykazují znaky podobné enterocytům.

Velikost buněk: Průměr buněk kolorektální karcinomové buněčné linie HT-29 je 11 μm.

Genom a ploidie: Modální počet chromozomů pro buněčnou linii HT-29 je 71. Může se pohybovat v rozmezí 68–72. Navíc je standardizovaný počet chromozomů pro buňky HT-29 hypertriploidní, přičemž 2S složka se vyskytuje v poměru 2,4 %.

Co je HT29 MTX? HT29 MTX je buněčná linie rezistentní na methotrexát, izolovaná z původní buněčné linie lidského kolorektálního karcinomu HT-29 adaptací na 10 µM methotrexátu. Tyto buňky vykazují charakteristiky zralých pohárkových buněk vylučujících hlen.

Buňky HT-29: Výhody a omezení

Každá buněčná linie má své jedinečné výhody a nevýhody, které ji odlišují od ostatních buněčných linií. Tato část se bude zabývat hlavními výhodami a omezeními spojenými s buňkami HT-29.

Výhody

Hlavní výhody buněk HT-29 jsou:

• Snadná kultivace

  S buněčnou linií HT-29 se snadno manipuluje a udržuje, přičemž její kultivace nevyžaduje žádné složité podmínky. Je široce kultivována ve výzkumných laboratořích.

• In vitro model střevních buněk

  Buňky HT-29 se za specifických kultivačních podmínek mohou diferencovat na zralé střevní buňky (enterocyty a buňky produkující hlen). Používají se jako buněčný model ke studiu trávení potravy a biologické dostupnosti.

• Vysoká účinnost transfekce

  Buňky rakoviny tlustého střeva HT-29 nabízejí vysokou účinnost transfekce, díky čemuž jsou vhodné pro studie genové exprese a regulace. Pomocí různých metod lze provádět jak přechodné, tak stabilní transfekční experimenty.

• Citlivost na léky

  Buňky HT-29 jsou citlivé na chemoterapeutické léky, jako je fluorouracil a oxaliplatina, běžně používané při léčbě rakoviny tlustého střeva. Používají se ke studiu rezistence na léky a k screeningu potenciálních terapeutických léků pro kolorektální karcinom.

Omezení

• Heterogenita

  Buňky HT-29, stejně jako jiné rakovinné buněčné linie, vykazují heterogenitu a nemusí tvořit jednotnou buněčnou populaci. To může mít vliv na reprodukovatelnost výsledků v určitých testech a vést k drobným odchylkám v experimentálních výsledcích.

• Omezená diferenciace

  Buňky HT-29 mají omezený diferenciační potenciál. Nediferencují se plně do střevních nebo tlustých střevních buněk, ale vykazují pouze několik charakteristických rysů. Toto omezení může omezit jejich použití při studiu složitějších biologických procesů.

Buňky HT-29: Aplikace

Buněčná linie HT-29 je díky svému širokému spektru aplikací hojně kultivována ve výzkumných laboratořích. Tato část se bude zabývat pouze několika významnými aplikacemi buněk HT-29.

Výzkum rakoviny: HT-29 je buněčná linie kolorektálního adenokarcinomu, proto se používá ke studiu progrese rakoviny, jejího vývoje a základních molekulárních mechanismů. Studie provedená v roce 2018 využila buněčnou linii HT-29 k výzkumu buněčných molekul odpovědných za metastázy. Tato studie zjistila, že geny vimentinu a CXCR4 regulují metastázy buněk. Zatímco transfekce mimika mikroRNA-193a-5p může snížit hladiny mRNA těchto genů a úspěšně omezit metastázy rakovinných buněk [2].

Toxikologický výzkum: Buněčná linie HT-29 se hojně používá v toxikologickém výzkumu. Tyto buňky kolorektálního karcinomu se používají k hodnocení toxicity různých kandidátů na léky pomocí různých testů. Například jedna studie zkoumala toxický potenciál etanolového extraktu z rostliny Syzygium cumini na buněčné linii HT-29. Výsledky ukázaly významné potlačení růstu buněk HT-29, což naznačuje slibné protinádorové vlastnosti extraktu [3].

Mikrobiologie: HT-29 lze použít jako systém hostitelských buněk k výzkumu patogeneze potenciálních mikroorganismů, tj. bakterií a virů. Výzkumníci mohou infikovat buňky HT-29 mikroorganismy, aby prozkoumali jejich virulenci a reakci hostitele. Jedna taková studie použila buňky HT-29 k prozkoumání probiotických vlastností bakterií mléčného kvašení [4]. Jiná studie použila buňky HT-29 k vyhodnocení účinnosti a bezpečnosti léčby bakteriofágy [5].

5. Vědecké publikace o buňkách HT-29

Tato část představí některé významné publikace o buňkách HT-29, které vám pomohou při plánování vašeho výzkumu.

Hodnocení protinádorového účinku etanolového extraktu Syzygium cumini na kolorektální buněčnou linii HT-29

Tato studie navrhla etanolový extrakt z Syzygium cumini jako potenciální protinádorové činidlo proti kolorektální buněčné linii HT-29. Extrakt významně potlačil růst rakovinných buněk.

Tetrandrin inhibuje růst buněk karcinomu tlustého střeva HT-29 prostřednictvím signální dráhy Bcl-2/Caspase 3/PARP a fáze G1/S

Tato publikace v časopise Bioscience Reports testovala protinádorovou aktivitu sloučeniny tetrandrinu na buňkách HT-29. Výsledky odhalily, že tetrandrin inhibuje proliferaci a růst nádorových buněk prostřednictvím regulace buněčných signálních drah.

microRNA-193a-5p inhibuje migraci lidských buněk rakoviny tlustého střeva HT-29 prostřednictvím potlačení metastatické dráhy

Tato studie navrhla, že miRNA-193a-5p může potenciálně regulovat metastázy buněk HT-29 prostřednictvím regulace genů souvisejících s metastázami.

Bakteriofágy jsou virulentnější vůči bakteriím v lidských buňkách než v bakteriální kultuře; poznatky z buněk HT-29

Tento článek byl publikován v časopise Nature Scientific Reports v roce 2018. Tato studie využila tumorigenní buněčnou linii HT-29 jako střevní buněčný model k vyhodnocení účinnosti navrhované léčby bakteriofágy.

Probiotické vlastnosti laktobacilů a jejich schopnost inhibovat adhezi enteropatogenních bakterií k buňkám Caco-2 a HT-29

V této studii použili vědci buňky HT-29 k výzkumu probiotických aktivit bakterií mléčného kvašení. Zajímavé je, že studie naznačila, že bakterie rodu Lactobacillus zabraňují adhezi patogenních bakterií k buňkám tlustého střeva.

Buňky HT-29 Zdroje: Protokoly, videa a další

Tato sekce se bude zabývat některými online zdroji dostupnými o buňkách HT-29, které pomohou seznámit se s protokoly jejich údržby, kultivace a transfekce.

Protokoly pro buněčné kultury

Následující zdroje vám poskytnou návod k subkultivaci buněk HT-29.

• Kultivace buněk HT-29: Tento odkaz poskytuje základní informace o růstovém médiu, rozmrazování a subkultivaci buněk HT-29.
• Údržba kultur HT-29: Tento článek obsahuje všechny užitečné informace o kultivaci a údržbě buněk HT-29.

Protokoly transfekce

Buněčná linie HT-29 má vysokou účinnost transfekce a je často používána ve studiích genové exprese. Následující zdroje popisují možné protokoly transfekce pro tyto buňky.

• Transfekce HT-29: Tento odkaz na webovou stránku obsahuje podrobný protokol pro transfekci buněk HT-29.
• Transfekce buněčné linie HT-29: Tento dokument popisuje protokol transfekce buněčné linie HT-29 plazmidovou DNA.

Videa týkající se buněčné linie HT-29

Zde je několik videí o kultivaci a udržování této tumorigenní buněčné linie.

• Pasážování buněk: Toto video ukazuje protokol pasážování buněk pro adhezivní buněčné linie.
• Transfekce buněk HT-29: Toto video vás provede metodou transfekce používanou pro buňky HT-29.

Očekáváme, že informace v tomto článku jsou pro vás cenné a dostatečné pro manipulaci a udržování buněčné linie HT-29. Pokud plánujete použít buňky HT-29 ve své studii, objednejte si je u nás.

Reference

1. Martínez-Maqueda, D., B. Miralles a I. Recio, buněčná linie HT29. Vliv bioaktivních látek v potravinách na zdraví: in vitro a ex vivo modely, 2015: s. 113–124.
2. Shirafkan, N. a kol., microRNA‐193a‐5p inhibuje migraci lidských buněk rakoviny tlustého střeva HT‐29 prostřednictvím potlačení metastatické dráhy. Journal of cellular biochemistry, 2019. 120(5): s. 8775–8783.
3. Khodavirdipour, A., R. Zarean a R. Safaralizadeh, Hodnocení protinádorového účinku etanolového extraktu Syzygium cumini na kolorektální buněčnou linii HT-29. Journal of gastrointestinal cancer, 2021. 52: s. 575–581.
4. Fonseca, H.C. a kol., Probiotické vlastnosti laktobacilů a jejich schopnost inhibovat adhezi enteropatogenních bakterií k buňkám Caco-2 a HT-29. Probiotics and antimicrobial proteins, 2021. 13: s. 102–112.
5. Shan, J., et al., Bakteriofágy jsou virulentnější vůči bakteriím v lidských buňkách než v bakteriální kultuře; poznatky z buněk HT-29. Vědecké zprávy, 2018. 8(1): s. 5091.