Buňky HL-60: Základní informace o výzkumu akutní myeloidní leukemie

HL-60 je nesmrtelná linie lidských leukemických buněk. Je široce využívána ke studiu biologie rakoviny a ke zkoumání účinnosti protinádorových léčiv. Kromě toho ji lze použít také k pochopení různých buněčných a molekulárních mechanismů, které se podílejí na proliferaci a diferenciaci leukemických buněk.

Buněčná linie HL-60: Původ a obecné informace

Buněčná linie HL-60 slouží jako klíčový model v hematologickém výzkumu a nabízí hluboký vhled do podstaty a léčby akutní promyelocytární leukemie. Tento příspěvek na blogu se zabývá původem a charakteristickými rysy buněčné linie HL-60 a osvětluje její klíčovou roli v lékařském výzkumu a vývoji léčebných postupů.

HL-60 byla poprvé vytvořena z leukemických buněk 36leté bělošky s diagnózou akutní promyelocytární leukemie. Tuto průkopnickou práci provedl S. J. Collins se svým týmem, což znamenalo významný průlom, neboť HL-60 byla první buněčnou linií myeloidní leukemie, která byla úspěšně izolována a kultivována v suspenzi. Tento úspěch usnadnil četné výzkumné možnosti při studiu leukémie a dalších příbuzných onemocnění. Pokud jde o fyzikální vlastnosti, buňky HL-60 vykazují lymfoblastickou morfologii a je známo, že rostou v suspenzi a mají kulatý tvar. Velikost těchto buněk se liší, jejich průměr se pohybuje od 9 do 25 μm, což odráží jejich heterogenitu. Na genomické úrovni je buněčná linie HL-60 převážně pseudodiploidní, s modálním počtem chromozomů 43. Zajímavé je, že malé procento (6,2 %) buněk vykazuje složku 2S, což přidává další vrstvu složitosti jejich genetické výbavy [1].

Pochopení těchto základních aspektů buněk HL-60 nejen rozšiřuje naše znalosti o leukémii na buněčné úrovni, ale také podporuje probíhající výzkumné snahy o odhalení nových léčebných postupů. V následujících částech se budeme zabývat tím, jak jedinečné vlastnosti buněčné linie HL-60 přispěly k významnému pokroku v lékařském výzkumu.

Monocelulární leukemická tkáň pod mikroskopem.

Informace o kultivaci buněk HL-60

Kultivace buněk HL-60 je jednoduchá a snadná. V této části se seznámíte se základními informacemi, jako například Jaká je doba zdvojení buněčné linie HL-60? Je HL-60 adherentní nebo suspenzní kultura? Jaká je hustota výsevu buněčné linie HL-60? Jaké médium se používá pro růst HL-60?

Doba zdvojení:	Doba zdvojení buněk HL-60 je přibližně 36 až 48 hodin.
Adherentní nebo suspenzní:	Buňky HL-60 rostou jako suspenzní kultury.
Hustota výsevu:	Při subkulturaci se tyto buňky vysévají při hustotě 1 x¹⁰⁶ buněk/ml a při založení nové kultury při hustotě 2 x¹⁰⁵ buněk/ml.
Růstové médium:	Ke kultivaci buněk HL-60 se používá růstové médium RPMI 1640 s přídavkem 10 % FBS a 2,5 mM L-glutaminu. Médium by se mělo obnovovat 2 až 3krát týdně.
Růstové podmínky:	HL-60 se pěstují ve zvlhčeném inkubátoru při teplotě 37 °C a přívodu 5 %_CO2.
Skladování:	HL-60 buňky se skladují při teplotě nižší než -150 °C nebo v plynné fázi tekutého dusíku, aby se zachoval maximální počet životaschopných buněk.
Mrazicí médium a postup:	Pro zmrazení buněk HL-60 se používají zmrazovací média CM-1 nebo CM-ACF. Pro zmrazování buněk HL-60 se upřednostňuje metoda pomalého zmrazování.
Postup rozmrazování:	Zmrazená lahvička s buňkami HL-60 se rychle promíchá ve vodní lázni nastavené na teplotu 37 °C. Poté se buňky odstředí, aby se odstranilo zmrazovací médium. Přidá se nové kultivační médium a buňky se resuspendují a dávkují do baňky pro růst.
Úroveň biologické bezpečnosti:	Pro manipulaci s kulturami HL-60 se doporučuje úroveň biologické bezpečnosti 1.

Suspenze buněk HL-60 při zvětšení 10x a 20x.

Buňky HL-60: Výhody a nevýhody

Než začnete pracovat s jakoukoli buněčnou linií, možná budete chtít znát její výhody a nevýhody. Tato část článku se bude zabývat několika výhodami a nevýhodami použití buněk HL-60.

Výhody

Několik významných výhod buněčné linie HL-60 je:

Všestrannost: buňky HL-60 mají schopnost diferencovat se za vhodných růstových podmínek na více buněčných typů, včetně monocytů, makrofágů a granulocytů. Díky tomu jsou užitečné pro studium buněčné diferenciace a dalších buněčných procesů
Snadná kultivace: HL-60 se snadno pěstují a udržují v suspenzních kulturách, což z nich činí vhodný nástroj pro studium různých buněčných procesů
Model leukémie in vitro: Tyto buňky byly získány od pacienta s akutní myeloidní leukémií, a proto mají genetické a molekulární charakteristiky podobné tomuto onemocnění

Nevýhody

Nevýhody buněčné linie HL-60 jsou následující:

Omezený diferenciační potenciál: HL-60 se mohou v reakci na podněty diferencovat do některých myeloidních linií, ale jejich diferenciační potenciál je ve srovnání s primárními buňkami omezený.

Použití buněčné linie HL-60 ve výzkumu: Od rakoviny po imunologii a další oblasti

Buněčná linie HL-60, odvozená od pacienta s akutní promyelocytární leukémií, se díky své univerzálnosti a snadné kultivaci stala základem lékařského výzkumu. Tyto nenáročné kultury jsou klíčové pro nesčetné množství výzkumných aplikací a my si klademe za cíl prozkoumat některé z nejvýznamnějších z nich a zahrnout širokou škálu klíčových výzkumných slov, abychom poskytli ucelený přehled.

Výzkum rakoviny

V oblasti onkologie se buněčná linie HL-60 významně podílela na odhalování složitostí signalizace nádorových buněk, na prohloubení našich znalostí o expresi onkogenů a na objevování nových terapeutických cílů. Tato buněčná linie je součástí panelu leukemických buněčných linií používaných pro screening nových chemoterapeutik. Jedním z pikantních příkladů je použití buněk HL-60 ke zjištění protileukemických vlastností sloučenin extrahovaných z mořských organismů, které odhalily jak antiproliferativní, tak proapoptotické účinky [2]. Dále tato buněčná linie usnadnila zkoumání klíčových signálních drah, jako je JAK/STAT, a jejich vlivu na proliferaci leukemických buněk, spolu s hodnocením terapeutických slibů bioaktivních sloučenin, jako je thymochinon [3].

Imunologie

Buňky HL-60 jsou robustním in vitro systémem pro zkoumání různých imunitních reakcí, včetně komplexního procesu chemotaxe a regulace exprese klíčových imunitních mediátorů. Tyto buňky se mohou diferencovat v myeloidní buňky podobné makrofágům a neutrofilům, což slouží jako univerzální model pro zkoumání zánětlivých drah. Například buňky podobné makrofágům odvozené od HL-60 byly použity ke zkoumání protizánětlivého potenciálu fytochemikálií z rodu Brassica [4]. V jiné studii umožnila diferenciace buněk HL-60 na buňky podobné neutrofilům vědcům identifikovat geny klíčové pro buněčnou diferenciaci a související imunitní funkce [5].

Objevování léčiv

Schopnosti myeloidní diferenciace HL-60 byly využity také při objevování léčiv, zejména při identifikaci kandidátů, kteří by mohli potenciálně modulovat diferenciační dráhu, jež je klíčová při léčbě leukémie. Příkladem jsou studie, které použily buněčnou linii HL-60 k hodnocení protinádorového potenciálu přírodních produktů [6].

Kromě toho se buněčná linie HL-60 používá ke studiu různých aspektů biologie myeloidních buněčných linií, například k pochopení toho, jak může léčba látkami, jako je kyselina retinová, vést k monocytární diferenciaci nebo jak tyto buňky napodobují primární neutrofily při vytváření extracelulárních pastí. Využití modelu při objasňování molekulárních dějů hematologických malignit je dále rozšířeno jeho použitím ve studiích mutačních buněčných panelů, zejména v souvislosti s analýzou leukemických p53 hotspotů.

Pro ty, kdo zkoumají buněčnou mechaniku, dobu zdvojení HL-60 a jejich reakci na elektroporaci v mikrofluidních kanálech, nabízí tato buněčná linie spolehlivou platformu pro zkoumání.

Buněčná linie HL-60 pro váš výzkum

430,00 €*

Obsah: 1.5 milliliter

Ceny bez daní a nákladů na dopravu

cryovial

Číslo výrobku: 300209

Buňky HL-60: Výzkumné publikace

O buňkách HL-60 je k dispozici několik výzkumných studií. Zde uvádíme některé významné příklady:

Apoptotické a antiproliferační účinky stigmast-5-en-3-olu z Dendronephthya gigantea na buňky lidské leukémie HL-60 a lidské rakoviny prsu MCF-7

Tato výzkumná práce navrhla protinádorový účinek sloučeniny Stigmast-5-en-3-ol na leukemické buňky HL-60 a buňky rakoviny prsu MCF7.

Thymoquinone potlačuje buněčnou proliferaci a zvyšuje apoptózu leukemických buněk HL60 prostřednictvím reexprese JAK/STAT negativních regulátorů

Tato studie popisuje úlohu signalizace JAK/STAT při proliferaci buněk HL-60. Kromě toho vědci zkoumají terapeutický potenciál sloučeniny thymochinonu s využitím této leukemické buněčné linie. Sloučenina inhibuje buněčnou proliferaci a vyvolává buněčnou smrt oživením exprese negativních regulátorů kaskády JAK/STAT.

Analýza protizánětlivého potenciálu bioaktivních sloučenin Brassica v modelu lidských makrofágům podobných buněk odvozených z buněk HL-60

Tato studie využila buňky HL-60 k odvození makrofágům podobného buněčného modelu ze zkoumání protizánětlivé aktivity sloučenin rostlin rodu Brassica.

ERK se podílí na diferenciaci a funkci dimethylsulfoxidem indukovaných neutrofilům podobných buněk HL-60, které napodobují zánětlivé neutrofily

Tato studie publikovaná v časopise International Immunopharmacology vyvinula z buněčné linie HL-60 pomocí dimethylsulfoxidu buňky napodobující neutrofily. Studie zjistila, že na diferenciaci těchto buněk se podílí gen ERK.

Protinádorové účinky vybraných rostlinných polyfenolů, kyseliny gallové a kyseliny ellagové, na citlivé a multirezistentní leukemické buňky HL60

Tato výzkumná práce se zabývá protinádorovým potenciálem rostlinných polyfenolických sloučenin, tj. kyseliny gallové a kyseliny ellagové, na leukemických buňkách HL-60 citlivých a rezistentních na léčiva.

Zdroje buněčné linie HL-60: Zdroje: Protokoly, videa a další zdroje

O buněčné linii HL-60 je k dispozici více online výukových zdrojů. Tato část se bude zabývat několika zdroji popisujícími kultivaci a transfekci této buněčné linie.

Protokoly kultivace buněk

Zdroje popisující metody kultivace buněk HL-60 jsou následující:

Propagace HL-60: Tento dokument poskytne informace o subkultivaci buněk HL-60.
Buněčná linie HL-60: Tato webová stránka obsahuje základní informace o buňkách HL-60 a protokoly, včetně kultivace, zmrazení a rozmrazení buněk.

Protokoly transfekce

Zde jsou uvedeny některé zdroje popisující metody transfekce zvolené pro buňky HL-60.

Transfekce buněk HL-60: Tento odkaz obsahuje podrobný postup transfekce leukemických buněk HL-60.
Transientní transfekce buněk HL-60: Tento dokument obsahuje užitečné informace o buněčné linii a podrobný protokol pro transientní transfekci buněk HL-60.

Videa týkající se buněčné linie HL-60

Existuje jen velmi omezené množství videí o buňkách HL-60.

Pasážování buněk HL-60: Toto video vysvětluje protokol pro subkultivaci buněk HL-60.

Očekáváme, že vám tento článek poskytne základní informace o kultivaci a udržování buněčné linie HL-60. Kromě toho může rozšířit vaše znalosti o výhodách použití těchto leukemických buněk ve výzkumu. Pokud plánujete použití této buněčné linie, objednejte si ji u nás.

Buněčná linie HL-60: Nejčastější dotazy pro výzkumné pracovníky

Odkazy

Fleck, R., S. Romero-Steiner a M. Nahm, Použití buněčné linie HL-60 k měření opsonické kapacity pneumokokových protilátek. Clinical and Vaccine Immunology, 2005. 12(1): p. 19-27.
Fernando, I.S., et al., Apoptotické a antiproliferativní účinky stigmast-5-en-3-olu z Dendronephthya gigantea na buňky lidské leukémie HL-60 a lidského karcinomu prsu MCF-7. Toxicology in Vitro, 2018. 52: p. 297-305.
Almajali, B., a další, Thymoquinone suppresses cell proliferation and enhances apoptosis of HL60 leukemia cells through re-expression of JAK/STAT negative regulators. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention: APJCP, 2021. 22(3): p. 879.
Ruiz-Alcaraz, A.J., et al. analýza protizánětlivého potenciálu bioaktivních sloučenin Brassica v modelu lidských makrofágům podobných buněk odvozených z buněk HL-60. Biomedicína a farmakoterapie, 2022. 149: p. 112804.
Wang, D., et al., ERK se podílí na diferenciaci a funkci dimethylsulfoxidem indukovaných neutrofilům podobných buněk HL-60, které napodobují zánětlivé neutrofily. International Immunopharmacology, 2020. 84: p. 106510.
Núñez-Sánchez, M.Á., et al., Anti-Leukemic Activity of Brassica-Derived Bioactive Compounds in HL-60 Myeloid Leukemia Cells. International Journal of Molecular Sciences, 2022. 23(21): p. 13400.