Buňky HL-60: Základy výzkumu akutní myeloidní leukémie
HL-60 je nesmrtelná lidská leukemická buněčná linie. Je široce využívána ke studiu biologie rakoviny a k výzkumu účinnosti protinádorových léků. Kromě toho může být také použita k pochopení různých buněčných a molekulárních mechanismů zapojených do proliferace a diferenciace leukemických buněk.
- Růstové médium
- Viz stránka produktu
- Doba zdvojnásobení
- Viz stránka produktu
- Typ růstu
- Adherentní
- Úroveň biologické bezpečnosti
- BSL-1
- K dispozici u
- Cytion — Objednat HL-60
- Buněčná linie HL-60: Původ a obecné informace
- Informace o buněčné kultuře HL-60
- Buňky HL-60: Výhody a nevýhody
- Využití buněčné linie HL-60 ve výzkumu: od onkologie po imunologii a další obory
- Buněčná linie HL-60 pro váš výzkum
- Buňky HL-60: Výzkumné publikace
- Zdroje k buněčné linii HL-60: protokoly, videa a další
- Buněčná linie HL-60: Nezbytné často kladené otázky pro výzkumníky
- Reference
- Často kladené otázky
Buněčná linie HL-60: Původ a obecné informace
Buněčná linie HL-60 slouží jako klíčový model v hematologickém výzkumu a nabízí hluboký vhled do povahy a léčby akutní promyelocytární leukémie. Tento blogový příspěvek se zabývá původem a charakteristickými rysy buněčné linie HL-60 a osvětluje její klíčovou roli v lékařském výzkumu a vývoji léčebných postupů.
HL-60 byla poprvé vytvořena z leukemických buněk 36leté ženy kavkazského původu, u které byla diagnostikována akutní promyelocytární leukémie. Tuto průkopnickou práci provedl S.J. Collins a jeho tým, což znamenalo významný průlom, protože HL-60 byla první buněčnou linií myeloidní leukémie, která byla úspěšně izolována a kultivována v suspenzi. Tento úspěch umožnil četné výzkumné příležitosti při studiu leukémie a dalších souvisejících onemocnění. Z hlediska fyzikálních charakteristik vykazují buňky HL-60 lymfoblastickou morfologii a je známo, že rostou v suspenzi a mají kulatý tvar. Velikost těchto buněk se liší, s průměry v rozmezí 9 až 25 μm, což odráží jejich heterogenitu. Na genomové úrovni je buněčná linie HL-60 převážně pseudodiploidní, s modálním počtem chromozomů 43. Zajímavé je, že malé procento (6,2 %) buněk vykazuje 2S komponentu, což přidává další vrstvu složitosti k jejich genetické výbavě [1].
Porozumění těmto základním aspektům buněk HL-60 nejen rozšiřuje naše znalosti o leukémii na buněčné úrovni, ale také podporuje probíhající výzkumné úsilí o objevování nových způsobů léčby. V následujících částech prozkoumáme, jak jedinečné vlastnosti buněčné linie HL-60 přispěly k významnému pokroku v lékařském výzkumu.
Informace o kultivaci buněk HL-60
Kultivace buněk HL-60 je jednoduchá a snadná. V této části se seznámíte se základními informacemi, jako například: Jaká je doba zdvojnásobení buněčné linie HL-60? Jedná se o adhezivní nebo suspenzní kulturu HL-60? Jaká je hustota výsevu buněčné linie HL-60? Jaké médium se používá pro růst HL-60?
Doba zdvojnásobení:
Doba zdvojnásobení buněk HL-60 je přibližně 36 až 48 hodin.
Adhezivní nebo suspenzní:
Buňky HL-60 rostou jako suspenzní kultury.
Hustota naočkování:
Tyto buňky se při subkultivaci vysévají v hustotě 1 x 106 buněk/ml a při založení nové kultury v hustotě 2 x 105 buněk/ml.
Růstové médium:
K kultivaci buněk HL-60 se používá růstové médium RPMI 1640 s přídavkem 10 % FBS a 2,5 mM L-glutaminu. Médium by se mělo obnovovat 2 až 3krát týdně.
Podmínky růstu:
Buňky HL-60 se pěstují ve zvlhčeném inkubátoru při teplotě 37 °C a s přívodem 5 % CO2.
Skladování:
Buňky HL-60 se skladují při teplotě pod -150 °C nebo v plynné fázi kapalného dusíku, aby se zachovalo co nejvíce životaschopných buněk.
Mrazicí médium a postup:
K zmrazení buněk HL-60 se používají zmrazovací média CM-1 nebo CM-ACF. Pro zmrazení buněk HL-60 se upřednostňuje metoda pomalého zmrazování.
Proces rozmrazování:
Zmrazená lahvička s buňkami HL-60 se rychle promíchá ve vodní lázni nastavené na teplotu 37 °C. Poté se buňky odstředí, aby se odstranilo zmrazovací médium. Přidá se nové kultivační médium a buňky se resuspendují, aby se mohly přenést do baňky pro růst.
Úroveň biologické bezpečnosti:
Pro manipulaci s kulturami HL-60 se doporučuje úroveň biologické bezpečnosti 1.
Buňky HL-60: Výhody a nevýhody
Než začnete pracovat s jakoukoli buněčnou linií, možná budete chtít znát její výhody a nevýhody. Tato část článku se bude zabývat několika klady a zápory používání buněk HL-60.
Výhody
Mezi hlavní výhody buněčné linie HL-60 patří:
- Všestrannost: Buňky HL-60 mají schopnost diferencovat se za vhodných růstových podmínek do různých buněčných typů, včetně monocytů, makrofágů a granulocytů. Díky tomu jsou užitečné pro studium buněčné diferenciace a dalších buněčných procesů.
- Snadná kultivace: Buňky HL-60 se snadno pěstují a udržují v suspenzních kulturách, což z nich činí vhodný nástroj pro studium různých buněčných procesů.
- In vitro model leukémie: Tyto buňky byly získány od pacienta s akutní myeloidní leukémií, a proto mají genetické a molekulární vlastnosti podobné této nemoci.
Nevýhody
Nevýhody buněčné linie HL-60 jsou:
- Omezený diferenciační potenciál: HL-60 se mohou v reakci na podněty diferencovat do některých myeloidních linií, ale jejich diferenciační potenciál je ve srovnání s primárními buňkami omezený.
Aplikace buněčné linie HL-60 ve výzkumu: od rakoviny po imunologii a dále
Buněčná linie HL-60, odvozená od pacienta s akutní promyelocytovou leukémií, se díky své univerzálnosti a snadné kultivaci stala základním kamenem lékařského výzkumu. Tyto kultury s nízkými nároky na údržbu jsou klíčové v nesčetných výzkumných aplikacích a naším cílem je prozkoumat některé z těch nejvýznamnějších, přičemž zahrneme širokou škálu klíčových slov pro výzkum, abychom poskytli komplexní přehled.
Výzkum rakoviny
V oblasti onkologie sehrála buněčná linie HL-60 klíčovou roli při odhalování složitostí signalizace rakovinných buněk, prohlubování našeho porozumění expresi onkogenů a urychlování objevů nových terapeutických cílů. Tato buněčná linie tvoří součást panelu buněčných linií leukémie používaného pro screening nových chemoterapeutických látek. Výrazným příkladem je použití buněk HL-60 k ověření protileukemických vlastností sloučenin extrahovaných z mořských organismů, které odhalily jak antiproliferační, tak proapoptotické účinky [2]. Kromě toho tato buněčná linie usnadnila zkoumání klíčových signálních drah, jako je JAK/STAT, a jejich vlivu na proliferaci leukemických buněk, stejně jako hodnocení terapeutického potenciálu bioaktivních sloučenin, jako je thymoquinon [3].
Imunologie
Buňky HL-60 představují robustní in vitro systém pro zkoumání různých imunitních reakcí, včetně komplexního procesu chemotaxe a regulace exprese klíčových imunitních mediátorů. Tyto buňky se mohou diferencovat na myeloidní buňky podobné makrofágům a neutrofilům, čímž slouží jako univerzální model pro zkoumání zánětlivých drah. Například buňky podobné makrofágům odvozené z HL-60 byly použity k prozkoumání protizánětlivého potenciálu fytochemikálií z rodu Brassica [4]. V jiné studii umožnila diferenciace buněk HL-60 na buňky podobné neutrofilům výzkumníkům identifikovat geny klíčové pro buněčnou diferenciaci a související imunitní funkce [5].
Vývoj léčiv
Schopnosti myeloidní diferenciace HL-60 byly rovněž využity při vývoji léčiv, zejména při identifikaci kandidátů, kteří by potenciálně mohli modulovat diferenciační dráhu, což je klíčové při léčbě leukémie. To dokládají studie, které využily buněčnou linii HL-60 k hodnocení protinádorového potenciálu přírodních produktů [6].
Kromě toho se buněčná linie HL-60 používá ke studiu různých aspektů biologie myeloidních buněčných linií, jako je například pochopení toho, jak může léčba látkami, jako je kyselina retinová, vést k monocytární diferenciaci, nebo jak tyto buňky napodobují primární neutrofily při tvorbě extracelulárních pastí. Využití tohoto modelu k objasnění molekulárních procesů u hematologických malignit je dále rozšířeno o jeho aplikaci ve studiích panelů mutačních buněk, zejména v kontextu analýzy p53 hotspotů u leukémie.
Pro ty, kteří zkoumají buněčnou mechaniku, dobu zdvojnásobení HL-60 a jejich reakci na elektroporaci v mikrofluidních kanálech, nabízí tato buněčná linie spolehlivou platformu pro výzkum.
Buněčná linie HL-60 pro váš výzkum
Buňky HL-60: Vědecké publikace
O buňkách HL-60 je k dispozici několik výzkumných studií. Zde uvádíme několik významných příkladů:
Tato výzkumná práce navrhuje protinádorový účinek sloučeniny stigmast-5-en-3-olu na buňky leukémie HL-60 a buňky rakoviny prsu MCF7.
Tato studie popisuje roli JAK/STAT signální dráhy v proliferaci buněk HL-60. Kromě toho vědci zkoumají terapeutický potenciál sloučeniny thymoquinonu s využitím této leukemické buněčné linie. Sloučenina inhibuje buněčnou proliferaci a indukuje buněčnou smrt obnovením exprese negativních regulátorů JAK/STAT kaskády.
Tato studie využila buňky HL-60 k odvození modelu buněk podobných makrofágům za účelem zkoumání protizánětlivé aktivity sloučenin rostliny Brassica.
Tato studie, publikovaná v časopise International Immunopharmacology, vyvinula napodobeninu neutrofilních buněk z buněčné linie HL-60 pomocí dimethylsulfoxidu. Studie zjistila, že gen ERK se podílí na diferenciaci těchto buněk.
Tento výzkumný článek zkoumá protinádorový potenciál rostlinných polyfenolických sloučenin, tj. kyseliny gallové a kyseliny ellagové, na citlivé a rezistentní leukemické buňky HL-60.
Buněčná linie HL-60 Zdroje: Protokoly, videa a další
K dispozici je řada online vzdělávacích zdrojů týkajících se buněčné linie HL-60. Tato sekce se bude zabývat několika zdroji popisujícími kultivaci a transfekci této buněčné linie.
Protokoly pro kultivaci buněk
Zdroje popisující metody kultivace buněk HL-60 jsou:
- Propagace HL-60: Tento dokument poskytuje informace o subkultivaci buněk HL-60.
- Buněčná linie HL-60: Tato webová stránka obsahuje základní informace o buňkách HL-60 a protokolech, včetně kultivace, zmrazování a rozmrazování buněk.
Protokoly transfekce
Zde jsou některé zdroje popisující metody transfekce zvolené pro buňky HL-60.
- Transfekce buněk HL-60: Tento odkaz obsahuje podrobný postup transfekce pro leukemické buňky HL-60.
- Přechodná transfekce buněk HL-60: Tento dokument obsahuje užitečné informace o buněčné linii a poskytuje podrobný protokol pro přechodnou transfekci buněk HL-60.
Videa týkající se buněčné linie HL-60
Zdroje videí o buňkách HL-60 jsou velmi omezené.
- Pasážování buněk HL-60: Toto video vysvětluje protokol pro subkultivaci buněk HL-60.
Očekáváme, že vám tento článek poskytne základní informace o kultivaci a udržování buněčné linie HL-60. Kromě toho může prohloubit vaše znalosti o výhodách použití těchto leukemických buněk ve výzkumu. Pokud plánujete tuto buněčnou linii použít, objednejte si ji u nás.
Buněčná linie HL-60: Nezbytné informace pro výzkumné pracovníky
Buněčná linie HL-60 je buněčná linie promyelocytární leukémie odvozená od pacienta s akutní promyelocytární leukémií. Tato buněčná linie se hojně využívá ve výzkumu ke studiu diferenciace myeloidních buněk a exprese onkogenů.
Kyselina retinová vyvolává diferenciaci v buněčné linii HL-60 a podněcuje buňky k dozrání do buněk podobných granulocytům. Tento proces je klíčový pro studium mechanismů, které jsou základem myeloidní diferenciace.
Sérum je klíčovou složkou kultivačního média pro hematopoetické buňky, které poskytuje nezbytné růstové faktory a živiny potřebné pro proliferaci a udržení buněk HL-60 v kultuře.
Ano, buněčná linie HL-60 je schopná chemotaxe, což je pohyb buněk v reakci na chemické podněty. Díky tomu se hodí pro testy chemotaxe a pro studium migrace buněk.
Buněčná linie HL60, u níž dochází k expresi buněčných onkogenů, slouží jako modelový systém pro zkoumání regulace exprese onkogenů a jejich role při vzniku leukémie.
Buněčná linie HL-60 má neocenitelný význam pro výzkum v oblasti buněčné biologie, zejména pro studium buněčného cyklu, procesů buněčné diferenciace a molekulárních mechanismů vedoucích k leukémii.
Panely leukemických buněčných linií umožňují srovnávací studie různých leukemických buněčných linií, včetně jejich genetické výbavy, mutačních profilů, reakce na léky a molekulárních drah podílejících se na vzniku leukémie, jako je například dráha MAPK.
Analytické certifikáty a certifikáty původu lze obvykle stáhnout nebo si je vyžádat od dodavatele či úložiště, které poskytuje buněčnou linii HL-60, čímž se zajistí, že výzkumníci pro své studie obdrží ověřené buňky bez kontaminace.
Buněčnou linii HL-60 lze diferencovat tak, aby získala vlastnosti podobné primárním neutrofilům, včetně schopnosti tvořit extracelulární pasti, což vědcům umožňuje využívat ji jako náhradní model ke studiu chování a funkce neutrofilů.
Buňky HL-60 se používají jako in vitro model pro studium akutní promyelocytární leukémie, biologie myeloidních buněčných linií a vlivu různých látek na diferenciaci a proliferaci. Využívají se také v experimentech zaměřených na zkoumání buněčných reakcí, jako je chemotaxe, exprese onkogenů a vliv mutací na buněčné procesy.
Zkratka „HL-60“ znamená „Human Leukemia 60“. Označuje 60. buněčnou linii, která byla v době svého vzniku izolována od pacientů s leukémií. Zkratka „HL“ odkazuje na to, že se jedná o buňky lidské leukémie.
Doba zdvojnásobení buněk HL-60 činí za optimálních růstových podmínek přibližně 36 až 48 hodin. Může se však lišit v závislosti na kultivačních podmínkách a počtu pasáží buněk.
Když jsou buňky HL-60 ošetřeny forbol-12-myristát-13-acetátem (PMA), obvykle se diferencují do buněčného typu připomínajícího makrofágy nebo monocyty. Tato diferenciace je součástí studia monocytárních diferenciačních drah a porozumění mechanismům diferenciace myeloidních buněk.
Literatura
- Fleck, R., S. Romero-Steiner a M. Nahm, Použití buněčné linie HL-60 k měření opsonické kapacity pneumokokových protilátek. Clinical and Vaccine Immunology, 2005. 12(1): s. 19–27.
- Fernando, I.S. a kol., Apoptotické a antiproliferační účinky Stigmast-5-en-3-olu z Dendronephthya gigantea na buňky lidské leukémie HL-60 a lidského karcinomu prsu MCF-7. Toxicology in Vitro, 2018. 52: s. 297–305.
- Almajali, B., et al., Thymoquinon potlačuje buněčnou proliferaci a zvyšuje apoptózu leukemických buněk HL60 prostřednictvím reexprese negativních regulátorů JAK/STAT. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention: APJCP, 2021. 22(3): s. 879.
- Ruiz-Alcaraz, A.J., et al., Analýza protizánětlivého potenciálu bioaktivních sloučenin rodu Brassica v modelu buněk podobných lidským makrofágům odvozeném z buněk HL-60. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2022. 149: s. 112804.
- Wang, D., et al., ERK se podílí na diferenciaci a funkci dimethylsulfoxidem indukovaných buněk podobných neutrofilům HL-60, které napodobují zánětlivé neutrofily. International Immunopharmacology, 2020. 84: s. 106510.
- Núñez-Sánchez, M.Á., et al., Protileukemická aktivita bioaktivních sloučenin pocházejících z rodu Brassica v myeloidních leukemických buňkách HL-60. International Journal of Molecular Sciences, 2022. 23(21): s. 13400.