Buňky HK-2 - zkoumání funkce a patologie ledvin pomocí buněk HK-2 ve výzkumu ledvin

HK-2 je imortalizovaná epiteliální buněčná linie lidských ledvin, která se běžně používá v toxikologickém výzkumu. Výzkumní pracovníci hodnotí účinky toxinů životního prostředí na tyto ledvinové buňky. Kromě toho využívají buňky HK-2 také ke zkoumání onemocnění ledvin a jejich základních mechanismů.

Tento článek vysvětluje téměř základní informace o buňkách HK-2, včetně jejich obecných charakteristik, podmínek kultivace buněk, výzkumných aplikací a mnoha dalších. Dozvíte se následující informace:

HK-2 buňky: Původ a obecná charakteristika
Buněčná linie HK-2: Informace o kultivaci
Výhody a omezení buněk HK-2
Použití buněčné linie HK-2 ve výzkumu
Buňky HK-2: Výzkumné publikace
Zdroje pro buněčnou linii HK-2: Zdroje informací o HK-2: Protokoly, videa a další

1.buňky HK-2: HK-2: Původ a obecná charakteristika

Původ a obecné charakteristiky buněčné linie je nezbytné znát pro správné zacházení, údržbu a použití buněčné linie. V této části článku se budeme zabývat následujícími informacemi: Co jsou buňky HK-2 v lidské ledvině 2? Jaká je úloha HK2? Co jsou to buňky HK2? Jaký je původ buněčné linie HK-2? Jaká je velikost a morfologie buněk HK-2?

Buňky lidské ledviny 2 (HK-2) jsou typem proximálních tubulárních buněk pocházejících z normální ledvinové tkáně dospělého Evropana. Buněčná linie HK-2 byla vytvořena transfekcí ledvinových buněk rekombinantním retrovirem obsahujícím geny E6/E7 lidského papilomaviru 16. Tento experiment způsobil imortalizaci a vytvoření kontinuálně rostoucí linie epiteliálních buněk ledvin HK-2.
Buňky HK-2 vykazují epiteliální morfologii.
Velikost buněk HK-2 se pohybuje v rozmezí 17,4 -18,6 µm v průměru. Průměrný průměr je 18,2 µm [1].

Zdravé buňky lidských ledvin pod mikroskopem.

2.buněčná linie HK-2: Informace o kultivaci

Informace o kultivaci buněčné linie lidské ledviny 2 vám mohou významně pomoci před prací s ní. Nezbytné informace o kultivaci buněčné linie HK-2 jsou uvedeny v této části článku. Dozvíte se: Jsou buňky HK-2 adherentní? Jaká je doba zdvojení buněk HK-2? Jaké médium se používá ke kultivaci buněk HK-2?

Klíčové body pro kultivaci buněk HK-2

Doba zdvojení populace:	Doba zdvojení buněk HK-2 se pohybuje mezi 47,3 h a 61,7 h.
Adherentní nebo v suspenzi:	Buněčná linie HK-2 je adherentní.
Poměr subkultivace:	Buňky HK-2 se subkultivují v poměru 1:2 až 1:4. Adherentní buňky HK-2 se promyjí 1 x PBS a po přidání roztoku akutázy se inkubují při pokojové teplotě po dobu 8 až 10 minut. K disociovaným buňkám se přidá kultivační médium a odstředí se. Shromážděné buňky se opatrně resuspendují a přelijí do nových baněk pro kultivaci.
Kultivační médium:	Ideálním médiem pro buňky HK-2 je médium obsahující 10 % fetálního hovězího séra, 0,05 mg/ml extraktu z hovězí hypofýzy (BPE) a 5 ng/ml epidermálního růstového faktoru (EGF). Médium by se mělo vyměňovat každé 2 až 3 dny v týdnu.
Růstové podmínky:	Buněčné kultury linie lidských ledvin 2 se uchovávají ve zvlhčeném inkubátoru s 5% přívodem CO2 při teplotě 37 °C.
Skladování:	Zmrazené buňky se skladují v plynné fázi tekutého dusíku nebo při teplotě nižší než -150 °C v mrazničce s velmi nízkou teplotou.
Postup zmrazování a médium:	Pro zmrazování buněk HK-2 jsou ideální zmrazovací média CM-1 nebo CM-ACF. Stručně řečeno, volí se metoda pomalého zmrazování, která umožňuje pokles teploty pouze o 1 stupeň Celsia za minutu a chrání buňky před jakýmkoli šokem.
Postup rozmrazování:	Zmrazené buňky se rozmrazují ve vodní lázni nastavené na teplotu 37 stupňů Celsia. Tyto buňky se přidají do čerstvého kultivačního média a resuspendují. Poté se buňky dávkují do nové baňky obsahující kultivační médium. Po 24 hodinách se médium vymění, aby se odstranily složky zmrazovacího média.
Úroveň biologické bezpečnosti:	Buněčné kultury HK-2 jsou udržovány v laboratořích s úrovní biologické bezpečnosti 1.

Buňky HK-2 rostoucí v ostrůvcích při zvětšení 10x a 20x.

3.výhody a omezení buněk HK-2

HK-2 je široce používaná epiteliální linie lidských proximálních tubulů. Stejně jako jiné buněčné linie je i ona spojena s některými výhodami a omezeními. V tomto oddíle se budeme zabývat některými klíčovými výhodami a nevýhodami buněčné linie lidské ledviny 2.

Výhody

Mezi hlavní výhody buněčné linie HK-2 patří:

Dobře charakterizovaná	Buněčná linie HK-2 je rozsáhle charakterizována z hlediska morfologie, velikosti a genomu. Na těchto normálních ledvinových buňkách byla provedena řada výzkumných studií.
Imortalizované	HK-2 je kontinuální buněčná linie s prodlouženou životností, která umožňuje její množení v několika pasážích. Tato vlastnost zajišťuje nepřetržitý přísun buněk pro laboratorní experimenty.
Charakteristiky epitelu proximálních tubulů	Buňky HK-2 vykazují dobře diferencovaný fenotyp charakteristický pro buňky proximálních tubulů (PTC), které se nacházejí v lidských ledvinách. Tato jedinečná vlastnost činí z buněk HK-2 cenný in vitro model pro studium fyziologie ledvin, buněčných procesů a reakcí na různé podněty.

Omezení

Zde jsou uvedena některá omezení buněčné linie HK-2:

In vitro model

HK-2 slouží jako in vitro model normálních ledvinových buněk, zejména vykazuje vlastnosti epiteliálních buněk proximálního tubulu. Nemusí však plně kopírovat složitost lidské ledvinové tkáně a mikroprostředí, které se nachází in vivo.

4.použití buněčné linie HK-2 ve výzkumu

Buněčná linie HK-2 má řadu aplikací v toxikologickém výzkumu. Zde jsme se zabývali některými specifickými a významnými výzkumnými využitími této lidské proximální tubulární buněčné linie.

Fyziologie ledvin : Buňky HK-2 se běžně používají ke studiu normální fyziologie a funkcí ledvin. Výzkumníci využívají tyto proximální tubulární epiteliální buňky ke zkoumání iontových kanálů, transportních procesů a dalších buněčných mechanismů regulujících homeostázu ledvin. Vědci například studovali roli kanálů TRPC6 (Transient Receptor Potential Channel 6) v (+)-Konokarpanu (CNCP), neolignanu, indukovaném buněčnou smrtí v epiteliálních buňkách ledvin HK-2 [2].
Onemocnění ledvin: Lidská buněčná linie ledvin 2 se využívá ke zkoumání různých onemocnění ledvin, tj. akutního poškození ledvin a diabetické nefropatie, a jejich základních buněčných a molekulárních mechanismů. Výzkum například zjistil, že hladiny metylace proteinu klotho souvisejí s poškozením ledvin. Snížení metylace promotoru genu klotho může zvýšit jeho expresi a zmírnit poškození ledvin vyvolané u diabetických modelů db/db myší a buněk HK-2 ošetřených vysokou glukózou [3].
Toxikologické studie: Buňky HK-2 jsou skvělým výzkumným nástrojem pro hodnocení potenciálních účinků různých léčiv, chemických látek a látek znečišťujících životní prostředí. Studie mohou výzkumníkům pomoci při hodnocení bezpečnosti léků a jejich vedlejších účinků na ledvinové buňky. Například studie publikovaná v roce 2022 hodnotila potenciální účinky polysacharidů a vodného extraktu z přírodní byliny Polygonatumkingianum (PK) na nefrotoxicitu vyvolanou uranem v buňkách HK-2. Tato studie se zaměřila na hodnocení potenciálních účinků polysacharidů a vodného extraktu z přírodní byliny Polygonatumkingianum (PK) na buňky HK-2. Zjistili, že PK má ochranné účinky a zabraňuje otravě uranem v ledvinových buňkách [4].

650,00 €*

Obsah: 1.5 milliliter

Ceny bez daní a nákladů na dopravu

cryovial

Číslo výrobku: 305021

5.buňky HK-2: Výzkumné publikace

Níže jsou uvedeny některé zajímavé výzkumné publikace týkající se epiteliálních buněk ledvin HK-2.

CircHIPK3 zmírňuje toxicitu vysoké glukózy pro lidské renální tubulární epiteliální buňky HK-2 prostřednictvím regulace miR-326/miR-487a-3p/SIRT1

Tato studie v časopise Diabetes, Metabolic Syndrome, and Obesity (2022) navrhuje, že cirkulární RNA HIPK3 může snížit inhibici proliferace buněk HK-2 způsobenou toxicitou vysoké glukózy. Kromě toho může inhibovat buněčnou smrt regulací kaskády miR-326/miR-487a-3p/SIRT1.

Rozdílný mechanismus toxicity nanočástic zlata u buněk proximálního tubulárního systému ledvin HK-2 a buněk karcinomu 786-0

Tato výzkumná publikace v časopise Nanomedicine (2020) hodnotila rozdílné mechanismy toxicity nanočástic zlata (AuNPs) v buňkách karcinomu 786-0 a epiteliálních buňkách proximálních tubulů HK-2.

Toxicitu vyvolanou vysokým obsahem glukózy v buňkách HK-2 lze zmírnit inhibicí miRNA-320c

Tento článek byl publikován v časopise Renal Failure (2022). Zjištění uvádějí, že mikroRNA-320c může snížit toxicitu vyvolanou vysokou glukózou v ledvinových buňkách (HK-2) tím, že se zaměří na PTEN a inhibuje signalizaci PI3K/AKT.

Exozomy odvozené od mezenchymálních kmenových buněk tlumí epiteliálně-mezenchymální přechod buněk HK-2

Tato studie v časopise Tissue Engineering Part A (2022) navrhla, že exozomy odvozené z mezenchymálních kmenových buněk zabraňují epiteliálně-mezenchymálnímu přechodu buněk HK-2 ledvin.

LncRNA TapSAKI podporuje zánětlivé poškození u buněk HK-2 a poškození ledvin vyvolané sepsí odvozenou od moči

Článek v časopise Journal of Pharmacy and Pharmacology (2019) uvádí, že lncRNA TapSAKI zvyšuje zánětlivou odpověď a buněčnou smrt HK-2 regulací signální dráhy mikroRNA-22/PTEN/TLR4/NF-κB.

6.zdroje pro buněčnou linii HK-2: Zdrojové materiály pro HK-2: protokoly, videa a další

Známá je buněčná linie HK-2. Zde je několik zdrojů popisujících protokol kultivace buněk HK-2.

Buněčná kultura HK-2: Tato webová stránka je obohacena o informace o buněčné kultuře HK-2. Poskytuje například recepturu buněčného média HK-2, protokol pasážování a protokol pro manipulaci s proliferačními a kryokonzervovanými kulturami a jejich udržování.
Pasážování buněk: Toto video vám pomůže naučit se obecný protokol dělení nebo pasážování adherentních buněčných linií.

Odkazy

Handl, J., et al., The effect of repeated passaging on the susceptibility of human proximal tubular HK-2 cells to toxic compounds (Vliv opakovaného pasážování na citlivost lidských proximálních tubulárních buněk HK-2 vůči toxickým sloučeninám ). Physiological Research, 2020. 69(4): p. 731.
Yang, G., et al., Activation of TRPC6 channels contributes to (+)-conocarpan-induced apoptotic cell death in HK-2 cells [Aktivace kanálů TRPC6 přispívá k apoptotické buněčné smrti vyvolané (+)-konokarpanem v buňkách HK-2 ]. Food and Chemical Toxicology, 2019. 129: p. 281-290.
Yang, X.H., et al., EGCG attenuates renal damage via reversing klotho hypermethylation in diabetic db/db mice and HK-2 cells (EGCG zmírňuje poškození ledvin prostřednictvím zvrácení hypermetylace klotho u diabetických db/db myší a buněk HK-2). Oxidative Medicine and Cellular Longevity, 2020. 2020.
Li, W., et al., Protective effects of Polygonatum kingianum polysaccharides and aqueous extract on uranium-induced toxicity in human kidney (HK-2) cells (Ochranné účinky polysacharidů a vodného extraktu Polygonatum kingianum na toxicitu vyvolanou uranem v buňkách lidských ledvin (HK-2) ). International Journal of Biological Macromolecules, 2022. 202: p. 68-79.