Buňky DU-145 - komplexní průvodce pro výzkumné pracovníky

DU-145 je buněčná linie lidského karcinomu prostaty široce používaná v biomedicínském výzkumu. Tyto buňky slouží jako neocenitelný model pro studium biologie karcinomu prostaty, testování a vývoj léčiv. Kromě toho vědci využívají buňky DU-145 také ke zkoumání molekulárních mechanismů, které jsou základem vývoje, růstu a progrese karcinomu prostaty.

Tento článek vám poskytne cenné informace o buňkách rakoviny prostaty DU-145. Zejména se bude zabývat:

Obecné informace a původ buněčné linie DU-145
Kultivaci buněk DU-145
Buněčná linie DU-145: Výhody a omezení
Výzkumné aplikace buněk DU-145
Výzkumné publikace s buňkami DU-145
Zdroje pro buněčnou linii DU-145: Protokoly, videa a další zdroje

1. Obecné informace a původ buněčné linie DU-145

Před zahájením práce s buněčnou linií je nezbytné porozumět jejím základním vlastnostem a původu. Tato část poskytne komplexní informace o vlastnostech a původu buněčné linie DU-145. Dozvíte se: Co jsou nádorové buňky DU145? Jaká je morfologie buněk DU145? Jaký je rozdíl mezi PC-3 a DU145?

DU-145, lidská buněčná linie karcinomu prostaty, byla odvozena z mozku muže kavkazské rasy (69 let) s metastazujícím karcinomem prostaty. Tyto buňky byly poprvé uloženy K. R. Stonem a jeho kolegy v roce 1978.
Stejně jako buňky karcinomu prostaty PC-3 i DU-145 exprimuje androgenní receptory. Když jsou však tyto buňky vystaveny působení androgenních ligandů, nevykazují žádnou aktivitu genů reagujících na androgenní receptory, a proto jsou považovány za buňky nezávislé na androgenech.
Buňky DU-145 mají epiteliální morfologii.
Buňky DU-145 jsou hypotriploidní a mají modální počet chromozomů 64. Vykazují několik markerových chromozomů, například del (11) (q23), t(11q12q), 16q+, del (1) (p32) a del (9) (p11).

PC-3 vs DU145

Obě buněčné linie karcinomu prostaty jsou nezávislé na androgenních receptorech. Liší se svým tumorigenním a metastatickým potenciálem. Buněčná linie PC-3 vytváří po injekci do imunokompromitované myši vysoce metastatický adenokarcinom IV. stupně. Naproti tomu u buněčné linie DU-145 vzniká karcinom prostaty se středním metastatickým potenciálem [1].

Narušení mikrofilament v buňkách lidského karcinomu prostaty PC-3.

2. kultivace buněk DU-145

Buněčná linie DU-145 je široce používána v laboratořích pro výzkum rakoviny prostaty. Měli byste si osvojit následující klíčové body, které usnadní její snadnou a efektivní kultivaci. Tato část bude obsahovat informace o médiu DU145, době zdvojení, podmínkách kultivace buněk a protokolech.

Klíčové body pro kultivaci buněk DU-145

Doba zdvojení populace:	Doba zdvojení buněk DU-145 se pohybuje mezi 30 a 40 hodinami.
Adherentní nebo v suspenzi:	DU-145 je adherentní buněčná linie.
Hustota výsevu:	DU-145 se vysévá při doporučené hustotě buněk 2 x¹⁰⁴^buněk/cm2. Při této hustotě buňky vytvoří splývající monovrstvu téměř za 4 dny. Pro výsev se buňky promyjí 1 x fyziologickým roztokem fosfátového pufru a inkubují se s pasážovacím roztokem Accutase. Po 8 až 10 minutách inkubace při pokojové teplotě se buňky doplní čerstvým kultivačním médiem a odstředí se. Odebraná buněčná peleta se opatrně resuspenduje a buňky se přelijí do nových kultivačních baněk pro růst.
Růstové médium:	EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) s doplňky média, tj. 10% fetálním hovězím sérem (FBS), 2 mM L-Glutaminem, 2,2 g/l NaHCO3 a EBSS. Médium se obnovuje 2 až 3krát týdně.
Růstové podmínky:	DU-145 jsou uchovávány ve zvlhčeném inkubátoru o teplotě 37 °C se zdrojem 5 % CO2.
Skladování:	Buňky DU-145 se skladují v plynné fázi kapalného dusíku nebo při teplotě nižší než -150 °C v elektrickém mrazáku, aby se zachovala dlouhodobá životaschopnost buněk.
Proces zmrazování a médium:	Pro buňky karcinomu prostaty DU-145 se doporučují mrazicí média CM-1 nebo CM-ACF. Pro zmrazení buněk se volí metoda pomalého zmrazování, která umožňuje postupný pokles teploty o 1 °C. Tím se zabrání jakémukoli šoku buněk a pomůže se zachovat jejich životaschopnost.
Proces rozmrazování:	Zmrazené lahvičky s buňkami DU-145 se rychle rozmrazují ve vodní lázni o teplotě 37 °C po dobu 40 až 60 sekund. Poté se k buňkám přidá kultivační médium a odstředí se, aby se odstranily složky mrazicího média. Sklizené buňky se resuspendují v růstovém médiu a nalijí se do baňky pro růst. Obnova zmrazením trvá téměř 24 hodin.
Úroveň biologické bezpečnosti:	Pro kultivaci buněčné linie DU145 nezávislé na androgenních receptorech je nutné nastavení úrovně biologické bezpečnosti 1.

Buňky karcinomu prostaty DU-145 při zvětšení 10x a 20x.

3. buněčná linie DU-145: Výhody a omezení

Stejně jako jiné buněčné linie je i buněčná linie karcinomu prostaty DU-145 spojena s některými výhodami a nevýhodami. Tyto vlastnosti vám mohou pomoci při rozhodování o jejím použití ve vašem výzkumu. Hlavní výhody a nevýhody buněčné linie DU-145 jsou uvedeny níže.

Výhody

Mezi výhody buněk DU-145 patří:

Nádorová aktivita	DU-145 je agresivní tumorigenní buněčná linie karcinomu prostaty se středním metastatickým potenciálem. Používá se k vývoji xenografického modelu DU145 u imunokompromitovaných myší ke studiu biologie, vývoje a růstu karcinomu prostaty in vitro a in vivo.
Nezávislost na androgenním receptoru	Buňky karcinomu prostaty DU-145 jsou nezávislé na androgenních receptorech. Jejich růst není závislý na androgenech a při léčbě androgeny nevykazují žádnou odezvu na buněčné ani molekulární úrovni. Ideální pro výzkum mechanismů hormonálně nezávislého karcinomu prostaty.

Omezení

Buněčná linie DU-145 má tato omezení:

In Vitro model

DU-145 je in vitro buněčný model metastatického karcinomu prostaty, takže nemusí plně reprezentovat složitost primárních nádorů prostaty. Navíc nemusí implikovat všechny typy a podtypy karcinomu prostaty kvůli specifickým vlastnostem, jako je nezávislost na androgenních receptorech.

4. výzkumné využití buněk DU-145

Buněčná linie DU-145 pro karcinom prostaty má širokou škálu výzkumných aplikací. Zde je uvedeno několik slibných aplikací.

Biologie rakoviny prostaty: DU-145 je vhodným modelem pro studium biologie rakoviny prostaty. Výzkumníci využívají tyto buňky ke zkoumání molekulárních mechanismů, které řídí vývoj, progresi a metastazování rakoviny. Kromě toho se zkoumají také genetické změny běžně spojené s rakovinou prostaty. Výzkum prováděný v roce 2021 zkoumal buňky DU-145 s cílem identifikovat potenciální biomarkery pro účinné diagnostické a terapeutické důsledky. Studie navrhla aktin gama 1 (ACTG1) jako potenciální biomarker rakoviny prostaty, protože podporuje proliferaci nádorových buněk a reguluje metastazování prostřednictvím aktivace dráhy MAPK/ERK [2].
Screening a vývoj léčiv: Buňky karcinomu prostaty DU-145 se široce používají k testování cytotoxicity a účinnosti potenciálních protinádorových léčiv. To pomáhá vědcům identifikovat nová léčiva, pochopit rezistenci vůči lékům a základní molekulární mechanismy. Studie provedená v roce 2022 zkoumala cytotoxický účinek pryskyřičné směsi, propolisu neboli včelího klihu, u buněčných linií rakoviny prostaty PC-3 a DU-145. V roce 2022 byla provedena studie, která zkoumala cytotoxický účinek propolisu. Studie prokázala inhibiční účinky této přírodní látky na růst u obou buněčných linií a navrhla její protinádorový potenciál [3]. V roce 2019 byla provedena další studie, která zkoumala antiproliferační účinky přírodní sloučeniny betainu u buněk karcinomu prostaty DU-145. Výzkum ukázal, že betain působí antiproliferativně tím, že zvyšuje buněčnou smrt zprostředkovanou oxidačním stresem a zánětem v buňkách DU-145 [4].

430,00 €*

Obsah: 1.5 milliliter

Ceny bez daní a nákladů na dopravu

cryovial

Číslo výrobku: 300168

5.výzkumné publikace s buňkami DU-145

Níže jsou uvedeny některé výzkumné publikace týkající se buněčné linie DU-145.

Účinky síranu zinečnatého na buněčnou linii lidského karcinomu prostaty DU-145 v závislosti na koncentraci: oxidační, apoptotické, zánětlivé a morfologické analýzy

Tato studie v časopise Biological Trace Element Research, 2020, navrhla, že síran zinečnatý (_ZnSo4) působí antiproliferativně na buňky DU-145 prostřednictvím indukce apoptózy, morfologických změn, oxidačního poškození a zánětu.

Selektivní cytotoxická a antimetastatická aktivita u buněk karcinomu prostaty DU-145 vyvolaná extraktem z kůry Annona muricata L. a fytochemikálií, annonacinem

Tento výzkumný článek byl publikován v časopise BMC Complementary Medicine and Therapies v roce 2020. Tato studie zkoumala cytotoxický a antimetastatický potenciál rostliny, extraktu z kůry Annona muricata L., a jejího bioaktivního annonacinu u buněčné linie DU-145.

LncRNA LOXL1-AS1/miR-let-7a-5p/EGFR-relatedpathway reguluje rezistenci buněk karcinomu prostaty DU-145 vůči doxorubicinu

Tato publikace v časopise IUBMB Life (2019) navrhuje, že interakce dlouhé nekódující RNA LOXL1-AS1 s miR-let-7a-5p a dráhou související s EGFR reguluje rezistenci k doxorubicinu u buněk karcinomu prostaty DU-145.

Snížení regulace DDR1 indukuje apoptózu a inhibuje EMT prostřednictvím fosforylace Pyk2/MKK7 v buněčných liniích karcinomu prostaty DU-145 a Lncap-FGC

Tento článek v časopise Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (2020) uvádí, že downregulace genu Discoidin Domain Receptor1 (DDR1) způsobuje smrt buněk DU-145 a inhibuje přechod z epitelu na mezenchym (EMT) prostřednictvím aktivace dráhy Pyk2/MKK7.

Kasticin inhibuje migraci a invazi buněk lidského karcinomu prostaty DU 145 prostřednictvím signálních drah Ras/Akt/NF-κB

Tato studie v časopise Journal of Food Biochemistry (2019) navrhla, že kasticin, polymethoxyflavon, inhibuje migraci a invazi buněk DU-145 regulací signalizace Ras/Akt/NF-κB.

6. zdroje pro buněčnou linii DU-145: Další zdroje: protokoly, videa a další

O buněčné linii karcinomu prostaty DU-145 je k dispozici mnoho online zdrojů. V této části bude zmíněno několik zdrojů vysvětlujících zacházení s těmito buňkami, jejich údržbu a transfekční protokol:

DU-145 transfekce: Tento videonávod je postupným průvodcem pro osvojení si protokolu transfekce buněk DU-145.

Je zde zmíněn protokol kultivace buněk DU-145.

Subkultivace DU-145: Tento odkaz vám pomůže naučit se protokol pro subkultivaci nebo subkultivaci buněk DU-145.
DU-145 buňky: Tato webová stránka obsahuje mnoho užitečných informací o buněčné linii DU-145, včetně média DU145, protokolu pro subkultivaci a zacházení s proliferačními a kryokonzervovanými kulturami.

Odkazy

Lima, A.R., et al., Discrimination between the human prostate normal and cancer cell exometabolome by GC-MS (Diskriminace exometabolomu normálních a nádorových buněk lidské prostaty pomocí GC-MS ). Scientific reports, 2018. 8(1): p. 5539.
Xiao, L., et al., Silencing ACTG1 expression induces prostate cancer epithelial mesenchymal transition through MAPK/ERK signaling pathway. DNA and Cell Biology, 2021. 40(11): p. 1445-1455.
Gogacz, M., et al., Anticancer effects of propolis extracts obtained with the cold separation method on PC-3 and DU-145 prostate cancer cell lines [Protinádorové účinky propolisových extraktů získaných metodou separace za studena na buněčné linie karcinomu prostaty PC-3 a DU-145 ]. Molekuly, 2022. 27(23): p. 8245.
Kar, F., et al., Betain potlačuje buněčnou proliferaci zvýšením apoptózy zprostředkované oxidačním stresem a zánětem u buněčné linie lidského karcinomu prostaty DU-145. Cell Stress and Chaperones, 2019. 24: p. 871-881.