Buňky DLD-1: Aplikace a poznatky o buňkách DLD-1 ve výzkumu kolorektálního karcinomu

DLD-1 je buněčná linie lidského kolorektálního karcinomu, která se běžně používá ve výzkumu rakoviny. Je cenným nástrojem pro zkoumání různých aspektů rakoviny tlustého střeva, včetně vývoje nádoru, progrese, základních molekulárních mechanismů a odpovědi na terapeutické látky. DLD-1 je tak vynikající pro pochopení onemocnění a vývoj potenciálních léčebných strategií.

V tomto článku najdete důležité informace o buněčné linii DLD-1, které byste měli znát, než s ní začnete pracovat. Bude se týkat:

Obecnou charakteristiku a původ buněk DLD-1
Informace o kultivaci buněčné linie DLD-1
Buněčnou linii DLD-1: Výhody a omezení
Výzkumné aplikace buněčné linie DLD-1
Výzkumné publikace o buňkách DLD-1
Zdroje pro buněčnou linii DLD-1: Protokoly, videa a další zdroje informací o DLD-1

1. Obecná charakteristika a původ buněk DLD-1

Před prací s buněčnou linií se výzkumník nejprve zaměří na její původ a obecné vlastnosti. Tato část článku je podrobným úvodem do buněčné linie DLD-1. Bude se zabývat následujícími často kladenými otázkami: Co jsou buňky DLD-1? Co je to nádorová buněčná linie DLD-1? Jaké jsou mutace buněčné linie DLD-1? Jaká je velikost buňky DLD-1? Jaká je morfologie buněk DLD-1?

DLD-1, buněčná linie rakoviny tlustého střeva, pochází z tlustého střeva 67letého muže s kolorektálním adenokarcinomem. Byla izolována D. L. Dexterem a jeho kolegy v letech 1977-1979. Tato buněčná linie má stejný původ jako buněčné linie HCT-8, HCT-15 a HRT-18.
Stejně jako kolorektální karcinomy mají buňky DLD-1 fenotyp mikrosatelitní nestability [1].
Mezi mutace DLD-1 patří KRAS, P53, BRAF, BRCA1 a BRCA2. Vzhledem ke stavu DLD-1 P53, DLD-1 BRCA, DLD-1 BRCA2 a DLD-1 KRAS mutace jsou tyto buňky považovány za ideální pro studium rakoviny.
Tyto buňky mají morfologii podobnou epitelu.
Velikost buněčné linie DLD-1 je přibližně 15 µm.
Lidská buněčná linie kolorektálního karcinomu DLD-1 má pseudodiploidní karyotyp. Přibližně 86 % buněk má modální počet chromozomů 46. U 17,1 % buněčné populace se však může vyskytovat i polyploidie.

3D zobrazení CT kolonografie nebo CT vyšetření tlustého střeva zobrazené na obrazovce pro diagnostiku rakoviny tlustého střeva, rakoviny tlustého střeva a kolorektálního karcinomu.

2.informace o kultivaci buněčné linie DLD-1

Před kultivací jakékoli buněčné linie je třeba znát její základní požadavky na kultivaci. Tato část upozorňuje na důležité body, které se musíte naučit před zahájením práce s buněčnou linií DLD-1. Patří sem: Jaký je zdvojovací čas DLD-1? Co je kultivační médium DLD-1? Jaká je hustota výsevu buněk DLD-1? Jak se kultivují buňky DLD-1?

Klíčové body pro kultivaci buněk DLD-1

Doba zdvojení:	Doba zdvojení DLD-1 je přibližně 15 hodin.
Adherentní nebo v suspenzi:	DLD-1 je adherentní linie lidských buněk rakoviny tlustého střeva. Buňky rostou v monovrstvách.
Hustota výsevu:	Buňky DLD-1 se vysévají v hustotě 1 až 2 x¹⁰⁴ ^buněk/cm2. Adherentní buňky se promyjí 1x fosfátovým pufrem (PBS) a inkubují se s pasážovacím roztokem (Accutase) při pokojové teplotě. Po 8 až 10 minutách inkubace se oddělené buňky přidají do kultivačního média a odstředí. Buněčná peleta se poté opatrně resuspenduje a buňky se přelijí do nových kultivačních nádob obsahujících růstové médium.
Růstové médium:	Ke kultivaci buněk DLD-1 se používá RPMI 1640 s doplňky média, včetně 10% fetálního hovězího séra FBS, 2,1 mM stabilního glutaminu a 2,0 g/l NaHCO3. Médium by se mělo vyměňovat 2-3krát týdně.
Růstové podmínky:	DLD-1 kultury se udržují ve zvlhčeném inkubátoru o teplotě 37 °C s přívodem 5 % CO2.
Skladování:	Buňky DLD-1 se skladují v plynné fázi tekutého dusíku nebo v elektrické mrazničce s velmi nízkou teplotou (při teplotě nižší než -150 °C).
Proces zmrazování a médium:	Ke zmrazení buněk DLD-1 lze použít zmrazovací médium CM-1 nebo CM-ACF. Vždy se doporučuje pomalý proces zmrazování, který umožňuje postupné snižování teploty o 1 °C, čímž se zabrání šoku buněk a ochrání se jejich životaschopnost.
Postup rozmrazování:	Zmrazené buňky se rozmrazují ve vodní lázni nastavené na teplotu 37 °C po dobu 40 až 60 sekund, dokud nezůstane malý ledový chuchvalec. Poté se buňky přidají do čerstvého média a odstředí se. Tento krok je nutný k odstranění složek zmrazovacího média z buněk. Odebrané buňky se resuspendují v růstovém médiu a dávkují se do růstové baňky.
Úroveň biologické bezpečnosti:	Buněčná linie DLD-1 je udržována v laboratořích s úrovní biologické bezpečnosti 1.

Buňky DLD-1 pozorované při zvětšení 10x a 20x, které odhaluje jejich charakteristickou epiteliální morfologii.

3.buněčná linie DLD-1: Výhody a omezení

V této části článku se budeme zabývat výhodami a omezeními buněčné linie DLD-1 pro rakovinu tlustého střeva.

Výhody

Hlavní výhody buněčné linie DLD-1 jsou:

Model kolorektálního karcinomu	Buňky DLD-1 mají mutace, které se běžně vyskytují u pacientů s kolorektálním karcinomem, jako je mutace KRAS DLD-1, BRCA DLD-1 a BRCA2 DLD-1. Díky této relevanci jsou klinicky vhodným buněčným modelem pro studium tohoto onemocnění.
Nádorová buněčná linie	Buňky DLD-1 jsou tumorigenní. Po injekčním podání nahým myším mohou vyvolat nádory. Proto vědci využívají tyto buňky k vývoji xenograftových nádorových modelů, které pomáhají zkoumat vznik, vývoj a progresi nádorů in vivo.

Omezení

S buňkami DLD-1 jsou spojena tato omezení:

Heterogenita

Populace buněk DLD-1 pro rakovinu tlustého střeva vykazují genetickou a fenotypovou heterogenitu. To může ovlivnit zobecnitelnost výsledků výzkumu.

4.výzkumné aplikace buněčné linie DLD-1

Buněčná linie DLD-1 nabízí řadu aplikací ve výzkumu rakoviny. Některé významné aplikace jsou popsány v tomto oddíle.

Studium rakoviny: Buňky DLD-1 slouží jako cenný in vitro model pro pochopení molekulárních mechanismů, které jsou základem růstu, vývoje a progrese kolorektálního karcinomu. Kromě toho se používají ke studiu genové exprese, signálních drah a vlivu specifických genetických mutací na chování nádorových buněk. Výzkum provedený v roce 2022 zjistil, že signální kaskáda PI3K/Akt/YAP reguluje migraci a invazi buněčné linie kolorektálního karcinomu DLD-1 [2].
Vývoj léčivých přípravků: Vědci využívají buněčnou linii DLD-1 k testování účinnosti protinádorových léčiv a k hodnocení jejich potenciálu pro léčbu rakoviny tlustého střeva. To napomáhá vývoji léků a účinnému boji proti onemocnění. Studie provedená v roce 2022 použila rakovinnou buněčnou linii DLD-1 a zkoumala protinádorovou aktivitu křemíkových ftalocyaninů, chemicky syntetizovaných sloučenin. Výsledky studie naznačily, že tyto sloučeniny jsou silnými protinádorovými látkami [3]. Zajímavé je, že jiný výzkum zjistil protinádorový potenciál proteinu P8 odvozeného od probiotik za použití buněk DLD-1 [4].

430,00 €*

Obsah: 1.5 milliliter

Ceny bez daní a nákladů na dopravu

cryovial

Číslo výrobku: 300220

5.výzkumné publikace o buňkách DLD-1

V této části je uvedeno několik zajímavých a často citovaných publikací, které se týkají buněčné linie karcinomu tlustého střeva DLD-1.

Flavonoidní glykosid diosmin indukuje apoptózu a zástavu buněčného cyklu u buněčné linie DLD-1 lidského karcinomu tlustého střeva

Tato publikace vyšla v časopise Journal of Biologically Active Products from Nature (2022). Studie zjistila, že flavonoid diosmin indukuje buněčnou smrt u buněk DLD-1 a způsobuje také zástavu buněčného cyklu; může tak být potenciální protinádorovou látkou.

Bromelain účinně potlačuje Kras-mutantní kolorektální karcinom stimulací ferroptózy

Tato studie v časopise Animal Cells and Systems (2018) navrhla, že enzym bromelain potlačuje mutaci KRAS u DLD-1 a má silné cytotoxické účinky.

Bergapten indukuje zástavu G1 a proapoptotickou kaskádu v buňkách kolorektálního karcinomu ve spojení s osou p53/p21/PTEN

Tento výzkumný článek byl publikován v roce 2019 v časopise "Environmental Toxicology". Studie zkoumala protinádorové účinky přírodní sloučeniny bergapten za použití linie koronárních buněk DLD-1.

Ekologicky šetrná výroba kompozitu nanokurkuminu/nanooxidů železa: Zvýšená protinádorová aktivita in vitro proti buněčným liniím DLD-1

Tato studie v časopise Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials (2023) zjistila, že nanokompozity kurkuminu a oxidu železitého jsou vysoce účinné proti buňkám kolorektálního karcinomu DLD-1.

Epibrassinolid aktivuje AKT ke spuštění autofagie s polyaminovým metabolismem v buněčných liniích rakoviny tlustého střeva SW480 a DLD-1

Tento výzkumný článek byl publikován v roce 2020 v časopise Turkish Journal of Biology. Studie navrhla, že přírodní produkt, epibrassinolidem zprostředkovaná aktivace AKT v buňkách DLD-1, stimuluje autofagii související s polyaminy.

6.zdroje pro buněčnou linii DLD-1: Protokoly, videa a další zdroje pro DL-1D DL-1: zdroje pro DL-1D DL-1D: protokoly, videa a další zdroje

Níže je uvedeno několik zdrojů o buňkách DLD-1:

DLD-1 transfekce: Tento videonávod je komplexním průvodcem protokolem transfekce DLD-1 in vitro.
Buňky DLD-1: Jak se dostat k buňkám DLD-1? Tento výzkumný článek stručně popisuje požadavky na kultivaci buněk DLD-1, včetně médií a kultivačních podmínek. Kromě toho vám může pomoci naučit se transfekční protokol používaný pro buňky DLD-1.

Následující odkazy obsahují protokol pro kultivaci DLD-1, buněk rakoviny tlustého střeva odvozených od člověka.

Buněčná linie DLD-1: Tato webová stránka poskytne základní informace o buněčné linii DLD-1. Pomůže vám seznámit se s různými protokoly kultivace buněk DLD-1, včetně subkultivace a manipulace s kryokonzervovanými a proliferujícími kulturami.

Odkazy

Gavrilas, L.I., et al., Pro-apoptotické geny jako nové cíle pro samostatnou a kombinovanou léčbu resveratrolem a kurkuminem u kolorektálního karcinomu. Food & function, 2019. 10(6): p. 3717-3726.
Takeda, T., a další, PI3K/Akt/YAP signalizace podporuje migraci a invazibuněk kolorektálního karcinomu DLD-1. Oncology Letters, 2022. 23(4): p. 1-9.
Farajzadeh, N., et al., Anticancer activity of novel silicon phthalocyanines against the colorectal adenocarcinoma cell line (DLD-1) (Protinádorová aktivita nových křemíkových ftalocyaninů proti buněčné linii kolorektálního adenokarcinomu (DLD-1) ). New Journal of Chemistry, 2022. 46(41): p. 19863-19873.
An, B.C., et al., Anti-Cancer Roles of Probiotic-Derived P8 Protein in Colorectal Cancer Cell Line DLD-1 (Protinádorová role proteinu P8 odvozeného z probiotik v buněčné linii kolorektálního karcinomu DLD-1 ). International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(12): p. 9857.