Buňky B16 – Základní průvodce po melanomových buňkách B16 v onkologickém výzkumu

B16 je buněčná linie rakoviny kůže (melanomu) myšího původu. Tato buněčná linie je účinným in vitro modelem pro studium rakoviny lidské kůže. Často se používá k výzkumu tvorby solidních nádorů a metastázování rakovinných buněk.

Tento článek vám pomůže porozumět základům buněčné linie melanomu B16. Konkrétně se bude zabývat následujícími tématy:

Obecné charakteristiky a původ buněčné linie B16

Tato část článku se bude zabývat charakteristickými rysy buněčné linie melanomu B16. Dozvíte se odpovědi na následující často kladené otázky. Například: Co je to buněčná linie rakoviny B16? Odkud pocházejí buňky B16? Jaká je velikost buněk B16?

• Buněčná linie B16 byla založena v roce 1954. Tyto buňky byly získány z myší C57BL/6J, u kterých se spontánně objevil nádor na kůži v laboratořích Jackson Laboratories v Maine.
• Jedná se o epitelové buňky produkující melanin, které mají schopnost metastazovat do sleziny, jater a plic.
• Buňky melanomu B16 rostou jako monovrstvy a vykazují epiteliální a vřetenovitou morfologii.
• Velikost buněk buněčné linie B16 je přibližně 15,4 μm.
• Existují odlišné subklony buněk B16, včetně B16GMCSF, B164A5, B16FLT3 a B16F10. Tyto sublinie se liší od mateřských buněk B16 a zachovávají si některé specifické vlastnosti. Například se liší morfologií, velikostí buněk a dalšími vlastnostmi. B16F10 má vysokou schopnost metastázovat do plic a B164A5 je nejagresivnější buněčná linie rakoviny kůže ve srovnání s B16F10, B16-GMCSF a B16FLT3 [1].

Buněčná linie B16: Výhody a nevýhody

Stejně jako jiné buněčné linie má i B16 svou jedinečnou kombinaci výhod a nevýhod. V této části jsou uvedeny některé významné klady a zápory této buněčné linie melanomu.

Výhody

B16 je díky svým výhodám prvním účinným myším nástrojem široce používaným ve výzkumu metastáz. Mezi výhody této buněčné linie rakoviny kůže patří:

Snadné pěstování

Buněčná linie B16 se snadno kultivuje ve výzkumných laboratořích. Je široce používána ke studiu biologie rakovinných buněk, signálních drah a dalších jevů.

Rychlý růst

Buněčná linie melanomu B16 vykazuje vysokou míru proliferace, díky čemuž je vhodná ke studiu buněčného dělení a růstových procesů.

Tumorigenita

B16 je tumorigenní buněčná linie s nádorovými vlastnostmi, jako je invaze, migrace a proliferace. Je cenná pro studium tvorby nádorů, jejich progrese a metastázování.

Nevýhody

Nevýhody spojené s buněčnou linií B16 jsou:

Nedostatečná relevance pro člověka

Vzhledem k tomu, že B16 je myší melanomová buněčná linie, nemusí přesně reprezentovat biologii lidského kožního karcinomu, což omezuje přenositelnost výsledků výzkumu.

Heterogenita

Buňky B16 jsou heterogenní a vykazují různé genetické a fenotypové vlastnosti v rámci stejné kultury. To může mít vliv na spolehlivost a reprodukovatelnost výsledků.

Aplikace buněk B16

Buněčná linie B16 je hojně využívána ve výzkumných studiích. Mezi slibné aplikace této buněčné linie patří:

• Biologie nádorů: Tato myší buněčná linie rakoviny kůže je tumorigenní a široce se používá k porozumění biologii nádorů. Bylo provedeno několik studií zaměřených na zkoumání buněčných mechanismů růstu, proliferace a metastázování nádorových buněk s využitím buněk B16. Výzkumná studie provedená v roce 2020 využila buňky B16 k prozkoumání role dlouhé nekódující RNA, LncRNA MEG3, při tvorbě, růstu a metastázování melanomu. Tento výzkum zjistil, že nekódující RNA moduluje osu miRNA-21/E-kadherin, aby stimulovala tyto buněčné procesy [2]. Podobně byl proveden výzkum zaměřený na zkoumání potenciální role signalizace Notch1 v nádorem indukované imunosupresi s využitím buněk B16 [3].
• Vývoj léčiv: Buňky B16 se používají k ověření a testování potenciálních terapeutických účinků kandidátů na léčiva. Jedna studie hodnotila protinádorový účinek kyseliny neogambogové, přírodní sloučeniny, s využitím buněčné linie B16. Výsledky studie odhalily, že tato sloučenina moduluje signální dráhu PI3K/Akt/mTOR a způsobuje smrt rakovinných buněk [4]. Další studie zkoumala protinádorový účinek ginsenosidu Rg3, saponinu, s využitím buněčné linie B16. Výzkum naznačil, že tato přírodní sloučenina vyvolává protinádorovou aktivitu prostřednictvím downregulace signálních drah ERK a Akt [5].

5. Vědecké publikace zabývající se buňkami B16

Zde uvádíme několik významných výzkumných publikací zabývajících se buněčnou linií melanomu B16.

LncRNA MEG3 podporuje růst, metastázy a tvorbu melanomu prostřednictvím modulace osy miR-21/E-kadherin

Tato publikace v časopise Cancer Cell International (2020) navrhuje, že dlouhá nekódující RNA MEG3 zvyšuje tvorbu, růst a metastázy buněk melanomu B16 modulací osy miRNA-21/E-kadherin.

Nový derivát psoralénu – MPFC – podporuje melanogenezi prostřednictvím aktivace signálních drah p38 MAPK a PKA v buňkách B16

Tento článek byl publikován v časopise International Journal of Molecular Medicine v roce 2018. Tato studie zkoumala melanogenní účinek a mechanismy derivátu psoralénu – 4-methyl-6-fenyl-2H-furo[3,2-g]chromen-2-onu (MPFC) – v buňkách B16. Studie navrhla, že tento derivát podporuje melanogenezi stimulací buněčné signalizace PKA a p38 MAPK.

Signalizace Notch1 v buňkách melanomu podporovala nádorem indukovanou imunosupresi prostřednictvím upregulace TGF-β1

Tento výzkum byl publikován v roce 2018 v časopise Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. Výsledky studie naznačují, že aktivace signální dráhy Notch1 v buňkách B16 může bránit protinádorové imunitě zvýšením exprese genu TGF-β1.

Kyselina neogambogová indukuje apoptózu buněk melanomu B16 prostřednictvím signální dráhy PI3K/Akt/mTOR

Tuto studii provedl Chunlan Wu a jeho kolegové v roce 2020 a byla publikována v časopise Acta Biochimica Polonica. Tato studie uvádí, že kyselina neogambogová, přírodní sloučenina, může způsobit smrt buněk melanomu B16 modulací signální kaskády PI3K/Akt/mTOR.

Komplex iridia (III) jako účinné protinádorové činidlo indukuje apoptózu a autofagii v buňkách B16 prostřednictvím inhibice signální dráhy AKT/mTOR

Tato výzkumná práce byla publikována v časopise European Journal of Medicinal Chemistry v roce 2018. V této studii vědci zkoumali protinádorovou aktivitu sloučeniny, komplexu iridia (III), na buňkách melanomu B16.

Ailanthon indukuje zastavení buněčného cyklu a apoptózu v buňkách melanomu B16 a A375

Tato studie navrhla, že rostlinná bioaktivní látka ailanthon má protinádorový potenciál, protože může indukovat apoptózu a zastavení buněčného cyklu v buňkách melanomu B16 a A375. Tato práce byla publikována v časopise Biomolecules v roce 2019.

Zdroje pro buněčnou linii B16: protokoly, videa a další

Zdroje týkající se buněčné linie B16, které vysvětlují protokoly pro její kultivaci a transfekci, jsou omezené.

• Kultivace melanomových buněk: Toto video poskytuje cenné tipy pro kultivaci buněčných linií melanomu.
• Subkultivace buněčné linie: Toto video vysvětluje obecný protokol subkultivace buněčné linie.
• Transfekce buněčné linie B16F10: Toto video vysvětluje protokol transfekce pro sublinii buněk melanomu B16. Může vám pomoci optimalizovat protokol transfekce pro buňky B16.

Následuje několik protokolů pro kultivaci buněk B16. 

• Kultivace buněk B16: Tato webová stránka obsahuje všechny potřebné informace pro kultivaci buněk B16, včetně růstových médií, subkultivace, rozmrazování a zmrazování buněk.

Reference

1. Danciu, C., et al., Chování čtyř různých sublinek myších melanomových buněk B 16: kůže C57 BL/6J. International journal of experimental pathology, 2015. 96(2): s. 73-80.
2. Wu, L., et al., LncRNA MEG3 podporuje růst, metastázy a tvorbu melanomu prostřednictvím modulace osy miR-21/E-kadherin. Cancer cell international, 2020. 20: s. 1–14.
3. Yang, Z., et al., Signální dráha Notch1 v buňkách melanomu podporovala nádorem indukovanou imunosupresi prostřednictvím upregulace TGF-β1. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research, 2018. 37(1): s. 1–13.
4. Wu, C., et al., Kyselina neogambogová indukuje apoptózu buněk melanomu B16 prostřednictvím signální dráhy PI3K/Akt/mTOR. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2): s. 197–202.
5. Meng, L., et al., Protinádorová aktivita ginsenosidu Rg3 u melanomu prostřednictvím downregulace drah ERK a Akt. International Journal of Oncology, 2019. 54(6): s. 2069–2079.