Buněčná linie KG-1
Obecné charakteristiky a původ buněčné linie KG-1
Původ a obecné charakteristiky buněčné linie pomáhají výzkumníkům rozhodnout se o jejím využití ve své práci. Tyto informace si můžete prostudovat ještě předtím, než s ní začnete pracovat. Tato část článku se věnuje původu a charakteristikám makrofágů KG-1. Dozvíte se zde: Co jsou buňky KG-1? Co je buněčná linie KG-1a? Jaký je původ buněčné linie KG-1? Jaká je morfologie KG-1?
- KG-1 je lymfoblastová buněčná linie odvozená z aspirátu kostní dřeně bělošského muže (59 let) s akutní myeloidní leukémií. Byla založena Koefflerem a Goldeem v roce 1978. Tyto buňky se nacházejí převážně ve stadiu zrání promyelocytů nebo myeloblastů [1].
- Buňky KG-1 mají morfologii podobnou lymfoblastům.
- Karyotyp buněčné linie KG-1 vykazuje pseudodiploidní modální počet chromozomů.
KG-1 a KG-1a
KG-1a je sublinie mateřských buněk KG-1. Byla vyvinuta po 35 pasážích buněčné linie KG-1. Ve srovnání s buněčnou linií KG-1 je méně diferencovaná. Navíc je tato sublinie z cytochemického, morfologického i funkčního hlediska méně zralá než mateřská buněčná linie (KG-1).
Informace o kultivaci buněčné linie KG-1
Tato část článku obsahuje všechny nezbytné informace o kultivaci buněk KG-1, které vám mohou usnadnit práci. Dozvíte se zde: Jaká je doba zdvojnásobení buněčné linie KG-1? Jaké jsou podmínky kultivace makrofágů KG-1? Jak se kultivují buňky KG-1?
Klíčové body pro kultivaci buněk KG-1
Doba zdvojnásobení:
Doba zdvojnásobení buněk KG-1 je přibližně 45 hodin. Může se však lišit v závislosti na kultivačních podmínkách.
Adherentní nebo v suspenzi:
Buňky KG-1 rostou v suspenzi.
Hustota buněk:
Optimální buněčná hustota pro buněčnou linii KG-1 je 1 až 3 × 10⁵ buněk/ml. Pro subkultivaci se buněčná suspenze přenese do sterilní zkumavky a odstředí se. Získané buňky se poté doplní čerstvým médiem a opatrně se resuspendují. Poté se buňky rozdělí do nových lahví a kultivují se při optimální buněčné hustotě. Buňky lze rozdělit, jakmile dosáhnou maximální buněčné hustoty 1–2 × 10⁶ buněk/ml.
Růstové médium:
IMDM (Iscove's Modified Dulbecco's Medium) obsahující 10 % FBS, 4,5 g/l glukózy, 4 mM L-glutaminu, 1,0 mM pyruvátu sodného a 3,0 g/l NaHCO₃. Kultivační médium by mělo být vyměněno po třech dnech.
Podmínky kultivace:
Buněčná linie KG1 AML se kultivuje ve zvlhčeném inkubátoru při teplotě 37 °C a s přívodem 5 % CO₂.
Skladování:
Zmrazené buňky se uchovávají v plynné fázi kapalného dusíku nebo při teplotě pod -150 °C v elektrickém mrazáku s extrémně nízkou teplotou, aby byla zachována životaschopnost buněk.
Proces zmrazování a médium:
Pro zmrazení buněk KG-1 je vhodné médium CM-1 nebo CM-ACF. Buňky se zmrazují pomalým procesem, aby byly chráněny před teplotním šokem. Tato metoda umožňuje postupný pokles teploty o 1 °C za minutu.
Proces rozmrazování:
Buňky se rozmrazují v předem zahřáté vodní lázni při teplotě 37 °C, dokud nezůstane pouze malá hrudka ledu. K rozmrazeným buňkám se přidá čerstvé médium a buňky se odstředí, aby se odstranily složky mrazicího média. Buněčný pelet se opatrně resuspenduje a přelije do nových baňek obsahujících růstové médium.
Úroveň biologické bezpečnosti:
Pro udržování buněčných kultur KG-1 je nezbytná laboratoř s úrovní biologické bezpečnosti 1.
Vydáno: 2023 | Poslední revize: květen 2026
Buněčná linie KG-1: Výhody a omezení
Stejně jako jiné buněčné linie má i myeloidní leukemická buněčná linie KG-1 řadu výhod a omezení. V této části se seznámíme s některými významnými z nich, které mohou být rozhodující při rozhodování o jejím použití ve vašem výzkumu.
Výhody
Mezi hlavní výhody buněk KG-1 patří:
-
Snadná kultivace
Buňky KG-1 se snadno kultivují ve výzkumných laboratořích a vyznačují se nenáročnými požadavky na kultivaci. Díky snadné údržbě a jednoduchým podmínkám růstu jsou dostupné širokému spektru výzkumníků, kteří disponují základním vybavením pro buněčnou kultivaci.
-
Model akutní myeloidní leukémie (AML)
Buněčná linie KG-1 AML, odvozená od mužského pacienta s akutní myeloidní leukémií (AML), slouží jako cenný nástroj pro zkoumání biologie AML a provádění výzkumu potenciálních terapeutik, přičemž nabízí vhled do základních mechanismů tohoto onemocnění a strategií léčby.
Omezení
Mezi omezení spojená s buněčnou linií KG1 patří:
-
Model in vitro
Buňky KG-1 představují cenný in vitro model pro výzkum AML; je však důležité si uvědomit, že nemusí plně odrážet komplexnost onemocnění in vivo, jelikož se jedná o zjednodušený buněčný model, který nemusí zahrnovat všechny aspekty biologie AML.
Využití buněk KG-1 ve výzkumu
KG-1 nabízí několik slibných aplikací v biomedicínském výzkumu. Mezi důležité oblasti výzkumu, ve kterých se makrofágy KG1 využívají, patří:
- Výzkum rakoviny: Buňky KG-1 byly odvozeny od pacienta s akutní myeloidní leukémií, a proto jsou považovány za cenný výzkumný nástroj pro zkoumání biologie AML. Výzkumníci tyto buňky využívají ke studiu buněčných a molekulárních mechanismů, které řídí vývoj, růst a rezistenci na léky u AML. To zahrnuje také identifikaci a objevování nových biomarkerů, genetických mutací a signálních drah spojených s AML. Například studie provedená v roce 2019 zkoumala, že dlouhá nekódující RNA linc00239 usnadňuje rezistenci na doxorubicin a maligní chování v buňkách akutní myeloidní leukémie KG-1. Další studie odhalila, že lncRNA aktivuje signální dráhu PI3K/Akt/mTOR, čímž vyvolává tyto účinky v buňkách AML [2].
- Toxikologie: Buněčná linie KG1 je široce využívána v toxikologickém výzkumu. Vědci testují toxicitu a účinnost potenciálních terapeutických látek, včetně chemoterapeutik a cílených terapií, na buňkách myeloidní leukémie KG1, aby identifikovali slibné kandidáty na léky pro budoucí předklinické a klinické hodnocení. Výzkum provedený v roce 2018 analyzoval toxicitu nano-niosomů obsahujících doxorubicin na buněčné linii KG1 AML. Studie naznačila, že nano-niosomy jsou vhodným nosičem pro podávání léčiv, protože zvyšují účinnost léčby [3]. V rámci dalšího výzkumu se vědci zabývali terapeutickými účinky čaje z kopřivy připraveného z listů rostliny Urtica dioica. Studie odhalila, že tento vodný extrakt z listů této rostliny vykazuje protinádorové účinky na buňky akutní myeloidní leukémie KG-1 a U937 [4].
Publikace o buňkách KG-1
Tato část článku uvádí několik zajímavých výzkumných publikací o buňkách KG-1.
Kvercetin zvyšuje citlivost buněk KG-1 lidské myeloidní leukémie na apoptózu indukovanou TRAIL
Tento článek byl publikován v časopise Journal of Cellular Physiology (2019). Studie navrhla, že sloučenina kvercetinu zvyšuje citlivost buněčné linie KG1 AML na ligand indukující apoptózu příbuzný TNF (TRAIL) a může zesílit účinek cytotoxicity vyvolané TRAIL v buňkách.
Tento článek v časopise „Tropical Journal of Pharmaceutical Research“ (2022) navrhuje, že snížení exprese transkripčního faktoru 8 typu Krüppel (KLF8) potlačuje proliferaci buněk AML a glykolýzu, čímž podporuje apoptózu prostřednictvím regulace signální dráhy AKT/mTOR.
Účinky sorafenibu a oxidu arsenitého na buněčné linie U937 a KG-1: apoptóza nebo autofagie?
Tato studie publikovaná v časopise „Cell Journal“ (Yakhteh) (2020) zkoumala potenciální účinky oxidu arsenitého a sorafenibu na buňky U937 a KG-1.
Tato studie publikovaná v časopise Medical Oncology (2020) hodnotila OXPHOS a glykolýzu jako terapeutické cíle v buněčné linii AML, KG-1.
Tento článek z časopisu *Drug Design, Development, and Therapy* z roku 2020 navrhl, že sloučeniny kurkuminu a thalidomidu synergicky vyvolávají apoptotické účinky v buňkách KG-1 prostřednictvím snížení exprese STAT3 a Bcl-xL.
6. Zdroje informací o buněčné linii KG-1: protokoly, videa a další
Níže uvádíme několik online zdrojů týkajících se buněk KG-1.
- Subkultivace suspenzních buněk: Toto video popisuje protokol pro subkultivaci suspenzních buněčných kultur, jako je KG-1.
Následující odkaz obsahuje protokol pro kultivaci buněk KG-1:
- Buněčná linie KG-1: Tato webová stránka obsahuje základní informace o buněčné kultuře buněčné linie KG-1. Zahrnuje informace o kultivačních médiích pro tuto buněčnou linii a protokoly pro subkultivaci a manipulaci s kryokonzervovanými a proliferativními kulturami.
Reference
- Pelliccia, F., V. Ubertini a N. Bosco, Význam molekulárně-cytogenetické analýzy před použitím buněčných linií ve výzkumu: Případ leukemické buněčné linie KG-1a. Oncol Lett, 2012. 4(2): s. 237–240.
- Yang, Y. a kol., Dlouhá nekódující RNA linc00239 podporuje maligní chování a chemorezistenci vůči doxorubicinu částečně prostřednictvím aktivace signální dráhy PI3K/Akt/mTOR v buňkách akutní myeloidní leukémie. Oncology Reports, 2019. 41(4): s. 2311–2320.
- Bahrami-Banan, F., a kol., Příprava a studie nano-niosomů obsahujících doxorubicin a hodnocení jejich toxicity na buněčné linii KG-1 akutní myeloblastické leukémie. Payavard Salamat, 2018. 12(4): s. 309–323.
- Hodroj, M.H. a kol., Čaj z kopřivy brání růstu buněk akutní myeloidní leukémie in vitro tím, že podporuje apoptózu. Nutrients, 2020. 12(9): s. 2629.