Buňky U87MG – výzkum glioblastomu s využitím buněk U87MG a jeho dopad na studium nádorů mozku
U-87 MG, primární lidská buněčná linie glioblastomu, je široce využívána v biologickém výzkumu. Tyto buňky se používají zejména v oblastech neurovědy a imuno-onkologie.
- Růstové médium
- Buněčná linie U-87 MG se kultivuje v médiu EMEM (Eagle's minimal essential medium) obohaceném o 1,0 g/l L-glukózy, 2,0 mM L-glutaminu, 2,2 g/l NaHCO₃, 1 % NEAA, 1 mM pyruvátu sodného a 10 % roztoku FBS. Médium by se mělo obnovovat každé 2 až 3 dny.
- Doba zdvojnásobení
- Buňky U 87 MG mají dobu zdvojnásobení populace v rozmezí 18–38 hodin.
- Typ růstu
- U 87 MG je adhezivní buněčná linie. Buňky mají protáhlý tvar a rostou jako monovrstvy.
- Úroveň biologické bezpečnosti
- BSL-1
- K dispozici u
- Cytion — Objednat U-87 MG
- Obecné charakteristiky a původ buněčné linie U-87 MG
- Informace o kultivaci buněk U-87 MG
- Výhody a nevýhody buněk U-87 MG
- Výzkumné aplikace využívající buňky U-87 MG
- Objednejte si buněčnou linii gliomu U-87 MG ještě dnes
- Buněčná linie U-87 MG: Výzkumné publikace
- Zdroje pro buňky U-87 MG: protokoly, videa a další
- Vhled do výzkumu gliomu U-87 MG: Často kladené otázky
- Reference
- Často kladené otázky
Obecné charakteristiky a původ buněčné linie U-87 MG
V této části se budeme zabývat původem a obecnými charakteristikami buněčné linie U87. Dozvíte se, co jsou buňky U-87 MG, odkud pocházejí buňky U87, co znamená zkratka U-87 MG, jak velké jsou buňky U87 a jaká je morfologie buněčné linie U87.
- Buněčná linie U87 je buněčná linie glioblastomu, astrocytomu. Byla založena v roce 1966 na Univerzitě v Uppsale. Buňky byly získány od 44letého muže kavkazského původu trpícího glioblastomem. Tato buněčná linie se oficiálně nazývá U 87 MG, což je zkratka pro Uppsala 87 Malignant Glioma.
- Buňky U 87 MG mají morfologii podobnou epiteliálním buňkám.
- Velikost buněk U 87 MG se pohybuje v rozmezí 12 až 14 µm v průměru.
- Tato lidská glioblastomová buněčná linie je hypodiploidní a vykazuje modální počet chromozomů 44 u přibližně 48 % buněčné populace. Vyšší ploidie se však vyskytují také u 5,9 % buněčné populace.
Informace o kultivaci buněk U-87 MG
Před zahájením práce s buňkami U 87 MG byste se měli seznámit s následujícími klíčovými body týkajícími se kultivace těchto glioblastomových buněk. Zejména byste měli vědět: Jaká je doba zdvojnásobení populace buněk U 87 MG? Jaká média se používají pro kultivaci buněk U87? Jaká je hustota výsevu buněčné linie U-87 MG?
Klíčové body pro kultivaci buněk U-87 MG
Doba zdvojnásobení populace:
Buňky U 87 MG mají dobu zdvojnásobení populace v rozmezí 18–38 hodin.
Adhezivní nebo v suspenzi:
U 87 MG je adhezivní buněčná linie. Buňky mají protáhlý tvar a rostou jako monovrstvy.
Hustota výsevu:
U buněčné linie glioblastomu U 87 MG se doporučuje výsev v hustotě 1 × 10⁴ buněk/cm². Adherentní buňky U87 se promyjí 1× PBS a inkubují s roztokem Accutase. Poté se disociované buňky odstředí a izolují. Buňky se opatrně resuspendují a přidají do nových lahví obsahujících růstové médium.
Růstové médium:
Buněčná linie U 87 MG se kultivuje v médiu EMEM (Eagle's minimal essential medium) obohaceném o 1,0 g/l L-glukózy, 2,0 mM L-glutaminu, 2,2 g/l NaHCO₃, 1 % NEAA, 1 mM pyruvátu sodného a 10 % roztoku FBS. Médium by se mělo obnovovat každé 2 až 3 dny.
Podmínky růstu:
Pro optimální růst vyžadují buňky U-87 MG zvlhčený inkubátor s přívodem 5 % CO₂ a teplotou 37 °C.
Skladování:
Buňky U87 se uchovávají buď v plynné fázi kapalného dusíku, nebo při teplotě pod -150 °C, aby se zachovala maximální životaschopnost buněk glioblastomu.
Proces zmrazování a médium:
Pro zmrazení buněk U 87 MG jsou vhodná zmrazovací média CM-1 nebo CM-ACF. Doporučuje se pomalý proces zmrazování, protože zabraňuje šoku buněk a chrání jejich životaschopnost.
Proces rozmrazování:
Zmrazené lahvičky s buněčnou linií U-87 MG se rozmrazují ve vodní lázni o teplotě 37 °C. Do buněk se přidá růstové médium, buňky se resuspendují a přenesou do nových baňek k kultivaci. Alternativně lze buňky U87 odstředit, aby se odstranilo zmrazovací médium, a poté je kultivovat.
Úroveň biologické bezpečnosti:
Pro manipulaci s buněčnými kulturami U 87 MG je vyžadována úroveň biologické bezpečnosti 1.
Výhody a nevýhody buněk U-87 MG
Když se zamyslíme nad buněčnou linií, jako první nás napadne: Jaké jsou výhody použití buněk U-87 MG? Jaké jsou nevýhody buněk U-87 MG?
Výhody
Buněčné linie U-87 MG se široce používají ve výzkumu. Mezi výhody spojené s touto buněčnou linií patří:
Výhody
- Snadné pěstování: Buňky U-87 MG se snadno udržují v kultuře. Nevyžadují náročné ani složité podmínky pro kultivaci.
- Homogenita: U-87 MG je homogenní buněčná linie. Většina buněk v populaci má stejnou genetickou výbavu, a proto sdílejí podobné vlastnosti. Tyto buňky se využívají ke studiu buněčných procesů, screeningu léčiv a testování.
- Dobře charakterizovaná: Tato buněčná linie glioblastomu je dobře charakterizována z hlediska růstových vlastností, morfologie a genové exprese, což z ní činí cenný výzkumný nástroj.
Nevýhody
- Omezená použitelnost: U-87 MG je buněčná linie glioblastomu, takže její použití je primárně omezeno na studium glioblastomů a souvisejících molekulárních mechanismů. Nemusí být vhodná pro výzkum jiných typů rakoviny.
Výzkumné aplikace využívající buňky U-87 MG
Buněčná linie glioblastomu U87MG je široce využívána ve studiích rakoviny, zejména ve výzkumu glioblastomu. Mezi výzkumné aplikace buněk U 87 MG patří:
- Výzkum biologie rakoviny: Buněčná linie U87 se používá ke studiu růstu a vývoje rakoviny, souvisejících molekulárních mechanismů, signálních drah a mikroprostředí nádoru. Studie publikovaná v roce 2020 využila in vitro model glioblastomu, buněčnou linii U-87 MG, k prozkoumání genu BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) jako terapeutického cíle. Výsledky ukázaly, že gen BMAL1 inhibuje proliferaci, migraci a invazi buněk glioblastomu potlačením exprese genů cyklinu B1, metaloproteinázy-9 a fosfo-AKT [1]. Další výzkum provedený v roce 2019 využil buněčnou linii U87 a zjistil, že snížená exprese transkripčního faktoru LITAF (lipopolysacharidem indukovaný faktor nekrózy nádorů alfa) může zvýšit radiosenzitivitu buněk gliomu prostřednictvím zvýšení exprese signální dráhy FOXO-1. LITAF je také známý jako p53-indukovaný gen 7 (PIG7) [2].
- Objev a vývoj léčiv: Buňky U-87 MG lze využít pro screening a testování léčiv, což umožňuje výzkumníkům identifikovat nové potenciální protinádorové léky a posoudit jejich účinnost a toxicitu. V rámci výzkumu byla použita buněčná linie glioblastomu U-87 MG k vyhodnocení protinádorového a antioxidačního potenciálu extraktu z Inula helenium (L.) [3]. Podobně i jiná publikace zmiňovala použití buněčné linie U-87 k testování cytotoxického a apoptotického účinku rostlinných extraktů [4]. Kromě toho se výzkum publikovaný v roce 2018 zabýval cytotoxickým účinkem seskviterpenových alkaloidů extrahovaných z rostlin rodu Nuphar na citlivé a na léčiva rezistentní buněčné linie U-87 MG [5].
Objednejte si ještě dnes buněčnou linii gliomu U87 MG
Buněčná linie U-87 MG: Vědecké publikace
Zde uvádíme některé významné výzkumné publikace zabývající se buněčnou linií U87 MG.
Tento článek, publikovaný v časopise Neuroreport v roce 2018, navrhuje, že hypoxie může zvýšit migraci a invazi buněk lidského glioblastomu regulací signální dráhy PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α.
Tato studie byla publikována v časopise Frontiers in Pharmacology v roce 2020. Výsledky výzkumu uvádějí, že flavonoid eriodiktol vykazuje protinádorové účinky na buněčnou linii U87 a potlačuje buněčnou proliferaci a metastázy. Tato sloučenina zprostředkovává své protinádorové vlastnosti modulací signální dráhy PI3K/Akt/NF-κB.
Tento výzkum publikovaný v časopise „Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine“ (2018) naznačuje, že čínský bylinný přípravek zvaný pilulka Xihuang může indukovat apoptózu v buňkách U87 prostřednictvím působení na kaskádu Akt/mTOR/FOXO1 aktivovanou ROS.
LITAF zvyšuje radiosenzitivitu buněk lidského gliomu prostřednictvím signální dráhy FoxO1
Tento výzkumný článek byl publikován v časopise „Cellular and Molecular Neurobiology“ v roce 2019. Studie navrhla, že transkripční faktor LITAF potlačuje expresi a zvyšuje radiosenzitivitu buněk gliomu regulací signální dráhy FOXO-1.
Tento článek byl publikován v časopise „Biointerface Research in Applied Chemistry“ (2019). Vědci použili buňky U87MG k vyšetření cytotoxického účinku nanočástic PLGA s obsahem kurkuminu.
Zdroje informací o buňkách U-87MG: protokoly, videa a další
Buněčná linie glioblastomu U87MG se používá v mnoha laboratořích zabývajících se výzkumem rakoviny. Mezi zdroje týkající se této buněčné linie patří:
- Transfekce buněčné linie U87: Tento dokument popisuje protokol transfekce buněk U87MG.
- Transfekce buněčné linie U 87 MG: Toto video je návodem, který krok za krokem vysvětluje protokol transfekce buněk U87.
Zdroje s protokolem pro kultivaci buněk U87 jsou uvedeny níže:
- Buňky U87 MG: Tento odkaz obsahuje základní informace o buněčné linii U87 MG. Zahrnuje stručné protokoly pro dělení, zmrazování a rozmrazování buněk.
Poznatky o výzkumu MG gliomu U87: Často kladené otázky
Gliomové buněčné linie, jako jsou glioblastomové buňky U87, jsou kultivované buňky odvozené z lidských gliomů, které se hojně používají ve výzkumu rakoviny ke studiu biologie nádorů, genetiky a reakcí na léky. Slouží jako modely pro pochopení chování nádorů a testování terapeutických strategií.
Izogenní buněčnou linií se rozumí buňky odvozené z jedné buňky, což zajišťuje genetickou uniformitu. Ve výzkumu gliomů poskytují izogenní linie konzistentní model pro studium genetických změn a jejich vlivu na růst nádoru a odpověď na léčbu.
Profil DNA gliomových buněčných linií je zásadní pro identifikaci genetických změn, pochopení vývoje nádoru a vývoj cílené léčby. Pomáhá při klasifikaci nádorů na základě genetických markerů, jako jsou mutace IDH1.
Sérum v médiích pro buněčné kultury poskytuje gliomovým buňkám nezbytné růstové faktory, hormony a živiny. Jeho složení však může ovlivnit reprodukovatelnost experimentů, a proto se stále častěji používají podmínky bez séra nebo s definovaným sérem.
Cytotoxicita buněk gliomových buněčných linií se hodnotí pomocí testů, jako je průtoková cytometrie, která měří stav, životaschopnost a smrt buněk po léčbě léky nebo imunitními buňkami, jako jsou přirozené zabíječské buňky (NK).
Cytotoxicita NK buněk hraje ve výzkumu léčby gliomů zásadní roli, protože NK buňky mohou rozpoznat a usmrtit nádorové buňky bez předchozí senzibilizace. Studium interakcí NK buněk s gliomovými buňkami pomáhá vyvíjet strategie pro zlepšení odstraňování nádorů prostřednictvím NK buněk.
Nádor původu poskytuje kontext o původním biologickém prostředí a vlastnostech nádoru. Jejich pochopení pomáhá při porovnávání výsledků studií buněčných linií se skutečným chováním nádoru a prognózou pacienta.
Elektronová mikroskopie umožňuje detailní vizualizaci buněčných a subcelulárních struktur v gliomových buněčných liniích, což je zásadní pro zkoumání morfologie buněk, stavu organel a změn po léčbě.
Ligand NKG2D je exprimován na nádorových buňkách a váže se na receptor NKG2D na NK buňkách, čímž vyvolává cytotoxickou odpověď. Studium této interakce pomáhá pochopit a potenciálně posílit imunitní reakce proti gliomu.
3D modely buněčných kultur přesněji napodobují nádorové mikroprostředí, což umožňuje lepší vhled do růstu, migrace a rezistence gliomů vůči lékům. Tato technika má zásadní význam pro relevantnější translační onkologické studie.
Literatura
- Gwon, D.H. a kol., BMAL1 potlačuje proliferaci, migraci a invazi buněk U87MG prostřednictvím downregulace cyklinu B1, fosfo-AKT a metaloproteinázy-9. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
- Huang, C. a kol., LITAF zvyšuje radiosenzitivitu lidských gliomových buněk prostřednictvím signální dráhy FoxO1. Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): s. 871–882.
- Koc, K., et al., Antioxidantní a protinádorové účinky extraktu z Inula helenium (L.) na lidskou buněčnou linii glioblastomu U-87 MG. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): s. 658–661.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh a A. Ghasempour, Cytotoxicita a indukce apoptózy v buňkách karcinomu prsu, kožního karcinomu a glioblastomu pomocí rostlinných extraktů. Mol Biol Rep, 2019. 46(5): s. 5131–5142.
- Fukaya, M. a kol., Cytotoxicita seskviterpenových alkaloidů z rostlin rodu Nuphar vůči citlivým a na léčiva rezistentním buněčným liniím. Food Funct, 2018. 9(12): s. 6279–6286.