Buněčná linie T98G
Buňky T98G představují lidskou buněčnou linii glioblastomu, která se běžně používá v biomedicínském výzkumu. Tyto buňky se zejména využívají ve studiích rakoviny mozku k výzkumu klíčových buněk a molekulárních faktorů, které k tomuto onemocnění přispívají. Kromě toho pomáhají výzkumníkům při screeningu a testování nových protinádorových léků, což může přispět k vývoji nových léčiv.
Obecné charakteristiky a původ buněčné linie T98G
Tato část článku vám pomůže seznámit se se základními charakteristikami buněčné linie T98G. Obsahuje informace o původu buněčné linie, její morfologii, velikosti a ploidii. Dále poskytne komplexní odpovědi na následující otázky: Co jsou buňky T98G? O jaký typ buněk se u T98G jedná? Odkud pochází buněčná linie T98G? Jaké jsou charakteristiky buněčné linie T98G? Co je to glioblastomová buněčná linie T98G U87?
- Buněčná linie T98G byla založena GH Steinem. Je tvořena fibroblastovými buňkami, které byly izolovány z mozkové tkáně 61letého muže kavkazského původu s glioblastomem multiforme [1].
- Buňky T98G nejsou tumorigenní; při injekčním podání nahým myším nezpůsobují nádory. V buněčné kultuře však při vhodném ukotvení mají sklon k proliferaci.
- Tyto buňky mají morfologii podobnou fibroblastům.
- Buněčná linie glioblastomu T98G představuje hyperpentaploidií. Modální počet chromozomů se pohybuje v rozmezí 128 až 132. Vyšší ploidie se mohou vyskytovat u 1,39 % buněčné populace.
T98 vs. T98G
Obě jsou lidské buněčné linie glioblastomu a mají podobný původ. Jediným rozdílem mezi těmito buněčnými liniemi je počet chromozomů. T98G má téměř dvojnásobný počet chromozomů než T98. Proto je T98G známá jako polyploidní varianta T98.
T98G vs. U87
U87 i T98G jsou lidské buněčné linie glioblastomu používané ve výzkumu rakoviny mozku. U87 vykazuje agresivnější fenotyp ve srovnání s GBM T98G.
2. Informace o kultivaci buněčné linie T98G
Před zahájením práce s buněčnou linií je nezbytné znát informace o její kultivaci. Pomohou vám snadno a pohodlně s ní pracovat v laboratoři. Měli byste vědět: Jaká je doba zdvojnásobení buněčné linie T98G? Jaké růstové médium je pro buňky T98G nejvhodnější? Jaké jsou růstové charakteristiky buněk T98G? Jaká je výsevní hustota buněk T98G? Jak se buňky T98G zmrazují?
Klíčové body pro kultivaci buněk T98G
Doba zdvojnásobení:
Přibližná doba zdvojnásobení buněk T98G je 40 hodin. Může se lišit v závislosti na podmínkách kultivace.
Adherentní nebo v suspenzi:
Buňky T98G jsou adhezivní. Přichytávají se ke dnu kultivačních nádob a tvoří monovrstvy.
Poměr dělení:
Buňky T98G se subkultivují v poměru dělení 1:2 až 1:5. Za tímto účelem se buňky nejprve promyjí 1× PBS pufrem a poté se inkubují s pasážovacím roztokem (Accutase) po dobu 8 až 10 minut při pokojové teplotě. Po inkubaci se odloučené buňky přidají do čerstvého růstového média a odstředí se. Poté se získaný buněčný pelet opatrně resuspenduje a buňky se nanesou do kultivační baňky obsahující růstové médium.
Růstové médium:
K kultivaci buněk T98G se používá médium EMEM obsahující 10 % fetálního bovinního séra, 2 mM L-glutaminu, 2,2 g/l NaHCO₃ a EBSS. Médium by se mělo vyměňovat 3 až 4krát týdně.
Podmínky kultivace:
Buňky T98G se udržují ve zvlhčeném inkubátoru nastaveném na 37 °C a připojeném k přívodu CO₂.
Skladování:
Zmrazené buňky lze skladovat při teplotě pod -150 °C nebo v plynné fázi kapalného dusíku, aby se zajistila jejich životaschopnost po delší dobu.
Proces zmrazování a médium:
Pro zmrazení buněk T98G se doporučuje použít zmrazovací média CM-1 nebo CM-ACF. K tomu se doporučuje postup pomalého zmrazování, při kterém teplota klesá pouze o 1 °C za minutu. Tím se zabrání teplotnímu šoku buněk a zachová se jejich životaschopnost.
Proces rozmrazování:
Zmrazené buňky se šetrně rozmrazují umístěním do předehřáté vodní lázně o teplotě 37 °C na dobu 40 až 60 sekund. Poté se resuspendují v čerstvém růstovém médiu a přenesou do nové baňky. Po 24 hodinách inkubace se médium vymění, aby se odstranily složky mrazicího média.
Úroveň biologické bezpečnosti:
Kultury T98G jsou udržovány v laboratoři s úrovní biologické bezpečnosti 1.
Vydáno: 2023 | Poslední revize: květen 2026
- Buněčná linie T98G: Výhody a nevýhody
- Využití buněk T98G
- 2. Informace o kultivaci buněčné linie T98G
- Klíčové body pro kultivaci buněk T98G
- Obecné charakteristiky a původ buněčné linie T98G
- 5. Vědecké publikace zabývající se buňkami T98G
- Zdroje informací o buňkách T98G: protokoly, videa a další
- Často kladené otázky
Buněčná linie T98G: Výhody a nevýhody
T98G je široce používaná buněčná linie glioblastomu lidského původu. Má několik kladů a záporů, které ji odlišují od ostatních. V této části článku se budeme zabývat několika nejvýznamnějšími z nich.
Výhody
Mezi výhody buněk T98G patří:
-
Dobře charakterizovaná
Dobře zavedená a dobře charakterizovaná buněčná linie. Rozsáhle studovaná a zdokumentovaná v odborné literatuře.
-
In vitro model
Reprezentuje charakteristiky glioblastomu, nejagresivnějšího mozkového nádoru. Cenný nástroj pro výzkum onemocnění, porozumění biologii a vývoj léčby.
Nevýhody
Nevýhody spojené s buňkami T98G jsou:
-
Heterogenita
Genetická heterogenita v populaci buněk T98G může vést k nejednotnosti experimentálních výsledků a zkomplikovat interpretaci dat.
Aplikace buněk T98G
Buněčná linie T98G je cenným nástrojem používaným ve výzkumu rakoviny. Zde je uvedeno několik hlavních oblastí využití buněk T98G ve výzkumu:
- Výzkum rakoviny: Buněčná linie T98G je cenným nástrojem pro zkoumání biologie glioblastomových nádorů. Tyto buňky se používají hlavně ke studiu složitých molekulárních drah, které jsou základem vzniku a progrese glioblastomu. Kromě toho se využívají k identifikaci genetických mutací, které řídí růst nádoru, a dalších mechanismů rakovinných buněk. Yang Chen a jeho kolegové se těmito buňkami zabývali a zjistili, že nadměrná exprese miRNA-21 snižuje hladiny PDCD4 (protein programované buněčné smrti 4) v buňkách T98G. To vede k inhibici apoptózy buněk T98G zprostředkované PDCD4. Studie tedy naznačuje, že miRNA-21 by mohla být potenciálním cílem pro vývoj terapií [2]. Podobně jako v této studii zkoumali Fanqiang Kong a jeho kolegové roli mikroRNA-15a v proliferaci a invazi buněk glioblastomu T98G. Zjistili, že miRNA-15a-5p podporuje tyto buněčné procesy tím, že se váže na molekulu buněčné adheze 1 (CADM1) [3].
- Testování léčiv a vývoj terapií: T98G slouží jako vynikající in vitro model glioblastomu pro screening nových léčiv a poskytuje platformu pro hodnocení účinnosti potenciálních protinádorových terapií. Vědci také testují řadu sloučenin a terapií s cílem identifikovat a objevit kandidáty na léčiva s nejslibnějšími protiglioblastomovými vlastnostmi. To vede k vývoji nových léků a léčebných strategií, které přinášejí naději pacientům s glioblastomem. Jedna z takových studií zkoumala protinádorový potenciál přírodní sloučeniny zvané korilagin v buněčné linii T98G GBM rezistentní na temozolomid. Výsledky studie naznačují, že korilagin v kombinaci s temozolomidem vyvolává v buňkách vyšší míru antiproliferačních a antiapoptotických účinků [4].
5. Vědecké publikace zabývající se buněčnou linií T98G
Níže jsou uvedeny některé zajímavé a často citované výzkumné publikace týkající se T98G, buněčné linie glioblastomu.
Chemoterapeutický účinek SR9009, agonisty REV-ERB, na lidské glioblastomové buňky T98G
Tato publikace v časopise ASN Neuro (2019) zkoumala protinádorové účinky agonisty REV-ERB s názvem SR9009 na buňky glioblastomu T98G.
Tento výzkumný článek v časopise Neurochemical Research (2019) navrhl, že butyrát sodný a kvercetin synergicky inhibují ochrannou autofagii v buňkách T98G a zvyšují buněčnou apoptózu.
Tato studie publikovaná v časopise *Genes* (2023) podrobila buněčnou linii T98G přizpůsobenou hypoxii sekvenování RNA a navrhla IRE1 (enzym vyžadující inositol 1) jako slibný terapeutický cíl.
Tento článek byl publikován v časopise Oncology Letters (2017). Studie prokázala, že miRNA-548c-3p se zaměřuje na onkogeny T98G (c-Myb) a tím inhibuje proliferaci a migraci buněk T98G.
Tento článek v časopise Journal of Medicinal Plants Research (2011) navrhuje, že chloroformový extrakt z Dracocephalum tanguticum vykazuje antiproliferační účinky na buňky T98G prostřednictvím modulace genů kaspázy-3, Bax a p21.
Zdroje informací o buňkách T98G: protokoly, videa a další
Zde jsou uvedeny dostupné zdroje obsahující protokoly pro kultivaci a transfekci buněk T98G.
- Transfekce buněk T98G: Tento výzkumný článek obsahuje protokol pro transfekci buněk T98G. Stručně vysvětluje metodu a potřebná činidla.
Následující odkazy vám velmi pomohou seznámit se s protokolem kultivace buněk T98G a usnadní vám práci s nimi.
- Buňky T98G: Tato webová stránka obsahuje klíčové informace týkající se protokolů pro kultivaci buněk T98G, včetně subkultivace a manipulace s proliferativními a kryokonzervovanými kulturami. Navíc vám pomůže seznámit se s růstovými médii, podmínkami a dobou zdvojnásobení buněk.
Reference
- Haehl, E., Radioresistence glioblastomu indukovaná endoteliálními buňkami. 2021, Universität Tübingen.
- Chen, Y., et al., MikroRNA-21 potlačuje expresi tumorového supresoru PDCD4 v lidské glioblastomové buňce T98G. Cancer letters, 2008. 272(2): s. 197–205.
- Kong, F., et al., MikroRNA-15a-5p podporuje proliferaci a invazi buněk glioblastomu T98G prostřednictvím cílení na molekulu buněčné adheze 1. Oncology Letters, 2021. 21(2): s. 1–1.
- Milani, R., et al., Corilagin indukuje vysokou míru apoptózy v buněčné linii gliomu T98G rezistentní na temozolomid. Oncol Res, 2018. 26(9): s. 1307–1315.