Buňky P19 – Výzkum embryonálního karcinomu s využitím buněk P19
P19 je buněčná linie myšího embryonálního karcinomu. Je široce využívána v biomedicínském výzkumu, zejména ke studiu vývojové biologie, biologie kmenových buněk, buněčné diferenciace a screeningu léčiv. Vzhledem k tomu, že buňky P19 mají schopnost diferenciace, mohou být užitečné při zkoumání složitých biologických procesů, jako je tvorba tkání a časný embryonální vývoj. V tomto článku se budeme zabývat základními informacemi o myších buňkách P19.
- Růstové médium
- Média DMEM/Ham's F12 obsahující 5 % fetálního bovinního séra, 3,1 g/l glukózy, 1,6 mM L-glutaminu, 1,0 mM pyruvátu sodného, 15 mM HEPES a 1,2 g/l NaHCO₃.
- Doba zdvojnásobení
- Doba zdvojnásobení uváděná pro buněčnou linii P19 je přibližně 2 až 3 dny.
- Typ růstu
- Embryonální karcinomová buněčná linie P19 je adhezivní.
- Úroveň biologické bezpečnosti
- BSL-1
- K dostání u
- Cytion — Objednat P19
- Obecné charakteristiky a původ buněk P19
- Informace o kultivaci buněk P19
- Buněčná linie P19: výhody a nevýhody
- Výzkumné aplikace buněk P19
- Objednejte si buněčnou linii P19 ještě dnes
- Buňky P19: Výzkumné publikace
- Zdroje pro buněčnou linii P19: protokoly, videa a další
- Seznámení s buněčnou linií P19: Často kladené otázky
- Reference
- Často kladené otázky
Obecné charakteristiky a původ buněk P19
Než začnete s buněčnou linií pracovat, je nezbytné znát její obecné charakteristiky a původ. Tato část se bude zabývat následujícími tématy: Co je buněčná linie P19? Jaká je velikost buňky P19? Jaký je původ buněk P19?
- P19 je typ pluripotentních buněk embryonálního karcinomu, původně získaných z teratokarcinomu, který se vyvinul u myši kmene C3H/He. Buněčnou linii poprvé izolovali v roce 1982 McBurney a Rogers.
- Buňky P19 mohou nepřetržitě růst v kultivačním médiu doplněném sérem. Lze je diferencovat do jiných buněčných typů, jsou-li vystaveny působení netoxických látek, jako je kyselina retinová a dimethylsulfoxid (DMSO) [1].
- Tyto myší karcinomové buňky mají epiteliální morfologii.
- Buněčná linie P19 má euploidní samčí karyotyp (n = 40; XY).
Informace o kultivaci buněk P19
Buněčná linie P19 je díky svým jedinečným vlastnostem široce pěstována ve výzkumných laboratořích. Její kultivace je snadná a zvládnutelná. V této části jsou uvedeny všechny klíčové informace, které potřebujete k udržování a pěstování buněčné kultury P19. Dozvíme se: Jaká je doba zdvojnásobení buněk P19? Jak se kultivuje buněčná linie P19? Je P19 adhezivní buněčná linie?
Klíčové body pro kultivaci buněk P19
Doba zdvojnásobení:
Doba zdvojnásobení uváděná pro buněčnou linii P19 je přibližně 2 až 3 dny.
Adhezivní nebo v suspenzi:
Embryonální karcinomová buněčná linie P19 je adhezivní.
Poměr subkultivace:
Buňky P19 by měly být subkultivovány každých 48 hodin a měl by být dodržován poměr rozdělení 1:10. Adherentní buňky se promyjí 1× fosfátovým pufrem a inkubují se s Accutase, dokud se buňky nerozdělí. Do buněk se přidá kultivační médium a buňky se sklidí odstředěním. Shromážděné buňky se opatrně resuspendují a rozdělí do nových lahví.
Růstové médium:
Média DMEM/Ham's F12 obsahující 5 % fetálního bovinního séra, 3,1 g/l glukózy, 1,6 mM L-glutaminu, 1,0 mM pyruvátu sodného, 15 mM HEPES a 1,2 g/l NaHCO₃.
Podmínky růstu:
Pro růst a kultivaci embryonální karcinomové buněčné linie P19 je nezbytný zvlhčený inkubátor nastavený na 37 °C s přívodem 5 % CO₂.
Skladování:
Zmrazené zkumavky s buňkami P19 by měly být skladovány při teplotě pod -150 °C v mrazáku nebo v plynné fázi kapalného dusíku, aby byla zachována životaschopnost buněk po delší dobu.
Proces zmrazování a médium:
K zmrazení buněk P19 lze použít média CM-1 nebo CM-ACF metodou pomalého zmrazování, která chrání buňky před šokem a zachovává jejich životaschopnost.
Proces rozmrazování:
Zmrazené buňky P19 lze rozmrazit ve vodní lázni o teplotě 37 °C rychlým protřepáváním zkumavky po dobu 40 až 60 sekund. K buňkám se přidá čerstvé médium a centrifugují se, aby se odstranily zbytky zmrazovacího média. Buněčná suspenze se znovu resuspenduje a buňky se přelijí do nové baňky pro růst.
Úroveň biologické bezpečnosti:
Pro buněčnou linii P19 je nutné laboratorní prostředí s úrovní biologické bezpečnosti 1.
Buněčná linie P19: Výhody a nevýhody
V této části se budeme zabývat výhodami a nevýhodami buněčné linie P19.
Výhody
- Diferenciační potenciál: Buňky P19 se mohou diferencovat do různých buněčných typů, včetně kardiomyocytů, neuronů a mikrogliálních buněk. K diferenciaci vyžadují netoxické látky, jako je kyselina retinová a dimethylsulfoxid (DMSO). Kyselina retinová indukuje vývoj neuronů, mikroglií a astroglií, zatímco DMSO iniciuje vývoj pulzujících kardiomyocytů a buněk hladkého svalstva. Buňky P19 jsou proto užitečné při studiu buněčné diferenciace a vývojových procesů.
- Modelový systém: Pluripotentní embryonální karcinomová buněčná linie P19 je cenným modelem pro studium časného embryonálního vývoje. Vědci využívají buňky P19 k objasnění buněčných signálních drah a buněčných a molekulárních mechanismů zapojených do těchto procesů.
Nevýhody
- Myší původ: P19 je buněčná linie myšího embryonálního karcinomu. Z toho vyplývá, že výsledky studií využívajících tyto buňky nemusí být plně přenositelné na lidskou biologii a procesy.
Výzkumné aplikace buněk P19
Buňky P19 mají díky své schopnosti diferenciace a významu pro vývojovou biologii a výzkum kmenových buněk několik výzkumných aplikací. Mezi důležité výzkumné aplikace embryonálních karcinomových buněk P19 patří:
- Studie buněčné diferenciace: Jak je známo, buňky P19 se mohou diferencovat na neurony, mikroglie, buňky hladkého svalstva a kardiomyocyty; proto se široce používají ke studiu procesů buněčné diferenciace. Kromě toho pomáhají ve výzkumu vývoje nervové a srdeční soustavy a souvisejících mechanismů. Studie provedená v roce 2018 zjistila, že reaktivní formy kyslíku (ROS) řídí diferenciaci buněk P19 do specifických buněčných typů a brání indukci jiných [3]. Další studie se zabývala procesem nervové diferenciace zprostředkovaným kyselinou retinovou a zjistila zapojení signální dráhy PI3K/Akt/GSK3β [4].
- Vývojová biologie: Buňky P19 představují neocenitelný model pro studium časného embryonálního vývoje. Pomáhají vědcům porozumět složitým biologickým procesům, jako je tvorba tkání během vývoje embrya. V rámci výzkumu byly použity buňky P19 ke studiu molekulárních faktorů přispívajících k tvorbě defektu komorového septa (VSD). Výsledky odhalily, že dlouhá nekódující RNA SNHG6 přispívá k VSD tím, že negativně reguluje miRNA-101 a aktivuje signální dráhu Wnt/β-katenin [5].
- Testování léčiv: Embryonální karcinomová buněčná linie P19 myši se také používá ke screeningu potenciálních kandidátů na léčiva. Jedna studie využila diferencované neurony z buněk P19 a zkoumala neuroprotektivní účinky syntetické L-Dopy a vodného extraktu ze semen Mucuna pruriens na inhibici acetylcholinesterázy. Výsledky ukázaly, že rostlinný extrakt vykazoval ve srovnání s L-Dopou slibné výsledky [6].
Pořiďte si buněčnou linii P19 ještě dnes
Buňky P19: Vědecké publikace
Tato část článku se bude zabývat několika zajímavými výzkumnými publikacemi, které se zabývají buňkami P19.
Tento článek byl publikován v časopise Oncology Reports v roce 2017. Studie navrhla, že pohlavní hormony hypofýzy řídí adhezi, proliferaci a migraci buněčných linií teratokarcinomu, včetně buněk P19.
Dlouhá nekódující RNA uc.4 ovlivňuje buněčnou diferenciaci prostřednictvím signální dráhy TGF-beta
Tato publikace v časopise Experimental & Molecular Medicine (2018) využila buňky P19 a zkoumala funkci dlouhé nekódující RNA uc.4. Výsledky odhalily, že uc.4 ovlivňuje buněčnou diferenciaci prostřednictvím modulace signální dráhy TGF-beta.
Tento výzkumný článek byl publikován v roce 2018 v časopise „Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine“. Studie zjistila, že přírodní extrakt z mozkové tkáně a 3D buněčná kultura mohou urychlit diferenciaci buněk embryonálního karcinomu P19 na neurální buňky.
Tato studie byla publikována v roce 2020 v časopise Journal of Ethnopharmacology. Studie navrhla, že extrakt z listů Cichorium intybus L. může indukovat diferenciaci buněk embryonálního karcinomu P19 na β-buňky slinivky břišní produkující inzulín.
Tento výzkum byl publikován v časopise Molecules (2022). Studie zkoumala neuroprotektivní účinky a účinky inhibující acetylcholinesterázu extraktu ze semen Mucuna pruriens na neurony buněčné linie P19.
Zdroje informací o buněčné linii P19: protokoly, videa a další
Níže uvádíme několik zdrojů týkajících se buněk P19.
- Protokol neuronální diferenciace buněk P19: Tento článek obsahuje protokol neuronální diferenciace buněk P19 a další užitečné informace o diferenciaci buněk P19.
- Transfekce buněk P19: Tento odkaz vám pomůže seznámit se s protokolem transfekce buněk P19.
Následující odkaz obsahuje protokol pro kultivaci buněk P19.
- Buňky P19: Tato webová stránka obsahuje všechny užitečné informace o buněčné linii P19, včetně podmínek kultivace, kultivačních médií pro buňky P19, dělení buněk a mnoho dalšího.
Zkoumání buněčné linie P19: Často kladené otázky
Literatura
- McBurney, M.W., Embryonální karcinomové buňky P19. Int J Dev Biol, 1993. 37(1): s. 135–40.
- Bressler, J., et al., Embryonální karcinomová buněčná linie P19: model pro studium interakcí mezi geny a prostředím. Cell Culture Techniques, 2011: s. 223–240.
- Pashkovskaia, N., U. Gey a G. Rödel, Mitochondriální ROS řídí diferenciaci myších pluripotentních buněk P19. Stem Cell Research, 2018. 30: s. 180–191.
- Fu, F. a kol., Kyselina all-trans-retinoidová indukuje diferenciaci buněk P19 na neurony zapojené do signální dráhy PI3K/Akt/GSK3β. Journal of Cellular Biochemistry, 2020. 121(11): s. 4386–4396.
- Jiang, Y., a kol., Dlouhá nekódující RNA SNHG6 přispívá k tvorbě defektu komorového septa prostřednictvím negativní regulace miR-101 a aktivace signální dráhy Wnt/β-katenin. Die Pharmazie – Mezinárodní časopis farmaceutických věd, 2019. 74(1): s. 23–28.
- Kamkaen, N., et al., Vodný extrakt ze semen Mucuna pruriens vykazoval ve srovnání se syntetickým L-dopou lepší neuroprotektivní účinky a inhibici acetylcholinesterázy. Molecules, 2022. 27(10): s. 3131.