Buněčná linie BxPC-3
BxPC-3 je buněčná linie rakoviny slinivky břišní pocházející z člověka. Je široce využívána ve výzkumu rakoviny. Vědci tyto buňky používají hlavně ke studiu biologie rakoviny slinivky břišní, k identifikaci terapeutických cílů a k vývoji protinádorových léků.
- Růstové médium
- K kultivaci buněčné linie BxPC-3 se používá médium RPMI 1640. Pro dosažení ideálního růstu buněk je doplněno 10 % fetálního bovinního séra, 2,1 mM stabilního glutaminu a 2,0 g/l NaHCO3. Médium by se mělo vyměňovat 2 až 3krát týdně.
- Doba zdvojnásobení
- Doba zdvojnásobení buněk BxPC-3 se pohybuje mezi 48 a 60 hodinami.
- Typ růstu
- BxPC-3 je adhezivní buněčná linie.
- Úroveň biologické bezpečnosti
- BSL-3
- K dispozici u
- Cytion — Objednat BxPC-3
Tento článek obsahuje důležité informace o buněčné linii BxPC-3, které vám mohou výrazně pomoci při práci s ní. Hlavně se bude zabývat:
- Obecné informace a původ buněčné linie BxPC-3
- Kultivace buněk BxPC-3
- Buněčná linie BxPC-3: Výhody a omezení
- Využití buněk BxPC-3 ve výzkumu
- Výzkumné publikace o buňkách BxPC-3
- Zdroje pro buněčnou linii BxPC-3: protokoly, videa a další
Obecné informace a původ buněčné linie BxPC-3
Znalost původu buněčné linie je zásadní pro její využitelnost ve výzkumu. Znalost jejích charakteristik, včetně morfologie, velikosti buněk a ploidie, usnadňuje a zjednodušuje její použití. Zde se dozvíte o původu a obecných vlastnostech buněk BxPC-3: Co jsou buňky BxPC-3? Co je buněčná linie BxPC-3? Jaký je původ buněčné linie BxPC-3? Jaká je morfologie buněk BxPC-3?
- BxPC-3, lidské buňky karcinomu pankreatu, byly izolovány v roce 1986 od 61leté evropské ženy s adenokarcinomem pankreatu. Bylo potvrzeno, že tyto buňky jsou tumorigenní i poté, co pacientka podstoupila několik cyklů radioterapie a chemoterapie. Vytvořená buněčná linie je tedy neocenitelným modelem pro studium vývoje a progrese rakoviny.
- Buňky BxPC-3 mají morfologii podobnou epitelovým buňkám.
- Modální počet chromozomů pro BxPC-3 je 59. Tyto buňky mají homozygotní deleci na chromozomu 18q, který kóduje protein SMAD4/DPC4. Kromě toho buněčná linie postrádá mutaci BxPC-3 kras, běžnou u nádorů slinivky břišní. V těchto buňkách rakoviny slinivky břišní se také vyskytuje delece BxPC-3 braf.
Jaký je rozdíl mezi BxPC3 a PANC-1?
Buňky BxPC-3 PADC (duktální adenokarcinom pankreatu) a PANC-1 jsou primární buněčné linie rakoviny pankreatu s epiteliální morfologií. Zde mají první buňky více epiteliálních vlastností, zatímco druhé vykazují více mezenchymálních atributů [1].
Kultivace buněk BxPC-3
Buněčná linie BxPC-3 je široce používána v laboratořích zabývajících se výzkumem rakoviny. Pro efektivní kultivaci této buněčné linie rakoviny slinivky břišní je třeba znát následující klíčové body. Dozvíte se: Jaká je doba zdvojnásobení buněk BxPC-3? Jak se kultivuje buněčná linie BxPC-3?
Klíčové body pro kultivaci buněk BxPC-3
Doba zdvojnásobení populace:
Doba zdvojnásobení buněk BxPC-3 se pohybuje mezi 48 a 60 hodinami.
Adherentní nebo v suspenzi:
BxPC-3 je adhezivní buněčná linie.
Poměr dělení:
Buňky BxPC-3 se subkultivují v poměru 1:2 až 1:4. Buňky se promyjí 1x PBS a inkubují se s pasážovacím roztokem zvaným accutase. Po 8–10 minutách se k buňkám přidá čerstvé médium a buňky se odstředí. Peleta se znovu resuspenduje v médiu a buňky se přelijí do nové kultivační nádoby pro růst.
Růstové médium:
Pro kultivaci buněčné linie BxPC-3 se používá médium RPMI 1640. Je doplněno 10 % fetálním bovinním sérem, 2,1 mM stabilním glutaminem a 2,0 g/l NaHCO3, aby se dosáhlo ideálního růstu buněk. Média by měla být vyměňována 2 až 3krát týdně.
Podmínky růstu:
Buněčné kultury BxPC-3 se udržují ve zvlhčeném inkubátoru při teplotě 37 °C, který je napojen na přívod 5% CO2.
Skladování:
Zmrazené buňky se obvykle skladují při teplotě pod -150 °C nebo v plynné fázi kapalného dusíku, aby se zachovala jejich životaschopnost.
Proces zmrazování a médium:
K zmrazení buněčných kultur BxPC-3 lze použít CM-1 nebo CM-ACF. Aby se zabránilo šoku buněk, používá se proces pomalého zmrazování, při kterém teplota klesá pouze o 1 °C.
Proces rozmrazování:
Zmrazené buňky BxPC-3 se rozmrazují v předem nastavené vodní lázni o teplotě 37 °C po dobu 40 až 60 sekund. Poté, co zůstane malá hrudka ledu, se k buňkám přidá čerstvé kultivační médium a centrifugují se, aby se odstranily prvky mrazicího média. Poté se buněčný pelet resuspenduje a buňky se rozdělí do baňky pro růst.
Úroveň biologické bezpečnosti:
Buněčné kultury BxPC-3 se udržují v laboratořích s úrovní biologické bezpečnosti 1.
Buněčná linie BxPC-3: Výhody a omezení
BxPC-3 je dobře známá buněčná linie adenokarcinomu pankreatu, která má několik výhod a omezení. Klíčové výhody a nevýhody této buněčné linie jsou uvedeny zde.
Výhody
Hlavní výhody buněk BxPC-3 jsou:
-
In vitro model rakoviny slinivky břišní
Buňky BxPC-3, odvozené od pacientů s adenokarcinomem pankreatu, vykazují relevantní charakteristiky, díky čemuž jsou vhodným modelem pro studium chování rakoviny pankreatu in vitro.
-
Tumorigenní buněčná linie
Buňky BxPC-3 mají tumorigenní vlastnosti a mohou tvořit nádory, jsou-li injikovány nahým nebo imunokompromitovaným myším. Tyto nádory se velmi podobají primárním nádorům adenokarcinomu pankreatu, což činí xenotransplantační model BxPC-3 ideálním pro studium růstu a progrese rakoviny.
Omezení
Omezení spojená s buněčnou linií BxPC-3 jsou:
-
Křížová kontaminace
Buněčná linie BxPC-3, stejně jako každá jiná, s sebou nese riziko křížové kontaminace. Při manipulaci s těmito buňkami by měli výzkumníci postupovat opatrně a dodržovat přísné protokoly pro prevenci kontaminace.
-
Pomalá rychlost růstu
Buňky BxPC-3 vykazují relativně pomalou rychlost proliferace, přičemž doba zdvojnásobení se pohybuje mezi 48 a 60 hodinami. Tato vlastnost může vyžadovat delší inkubační doby pro konkrétní experimenty, což může způsobit zpoždění v postupu výzkumu.
Využití buněk BxPC-3 ve výzkumu
Buňky BxPC-3 nabízejí mnoho aplikací ve výzkumu rakoviny. Mezi nejčastější aplikace patří:
- Výzkum rakoviny slinivky břišní: Buňky BxPC-3 napodobují adenokarcinom slinivky břišní, a proto se používají k prozkoumání genetických a molekulárních mechanismů, které jsou základem vývoje a růstu nádoru. Kromě toho vědci pomocí těchto buněk objevují nové biomarkery a terapeutické cíle. Buňky BxPC-3 navíc významně exprimují angiogenní faktory, tj. interleukin-8 (IL-8), prostaglandin E2 (PGE2) a vaskulární endoteliální růstový faktor (VEGF), díky čemuž jsou vhodné pro studium angiogeneze. Angiogeneze je zde klíčovým procesem spojeným s růstem rakoviny a metastázami. Studie publikovaná v roce 2022 zkoumala, že nadměrná exprese lamininu-5 gama-2 (LAMC2) v BxPC3 PDAC (duktální adenokarcinom pankreatu) zvyšuje jeho tumorigenesi prostřednictvím regulace signální dráhy BxPC3 EGFR /ERK1/2/ AKT/mTOR [2].
- Objev a vývoj léčiv: Buněčná linie BxPC-3 slouží jako neocenitelný model pro testování protinádorových léčiv. Vědci zkoumají cytotoxické, antimetastatické a apoptotické účinky potenciálních léčiv na BxPC3 PDAC. Studie provedená Alexandrií Turnerovou a kolegy v roce 2020 zkoumala apoptotické vlastnosti extraktů z plodů Elaeocarpus reticulatus v buňkách rakoviny slinivky břišní BxPC-3 [3]. Podobně byl v roce 2020 proveden výzkum, který určil protinádorový potenciál metanolového extraktu z rostliny zvané Oxialis obtriangulata v buňkách BxPC-3. Kromě toho vědci také studovali buněčný mechanismus, prostřednictvím kterého rostlinný extrakt vykazoval terapeutické účinky [4].
5. Vědecké publikace o buňkách BxPC-3
V této části jsou uvedeny některé z nejcitovanějších a nejzajímavějších publikací zabývajících se buněčnou linií BxPC-3.
Licokumarón indukuje smrt buněk adenokarcinomu pankreatu BxPC-3 inhibicí DYRK1A
Tato publikace v časopise Chemico-Biological Interactions (2020) zkoumala apoptotické účinky přírodního produktu, licokumaronu, na buňky rakoviny slinivky břišní BxPC-3.
Tento výzkumný článek byl publikován v časopise Anticancer Research (2022). Studie navrhla, že hydroxychlorochin způsobuje buněčnou smrt BxPC3 inhibicí genu BCL-XL.
Tento výzkum byl publikován v roce 2020 v časopise Journal of Cellular Biochemistry. Studie uvádí, že přírodní sloučenina salidrosid vykazuje protinádorové účinky v buňkách BxPC-3 prostřednictvím regulace signální kaskády HIF-1α (hypoxií indukovaného faktoru) a LOXL2.
Tento článek v časopise Biomedicine & Pharmacotherapy naznačuje, že ibrutinib lze použít jako účinný radiosenzibilizátor u pacientů s rakovinou slinivky břišní. Studie in vitro na buňkách BxPC-3 ukazuje, že snižuje fosforylaci EGFR v buňkách BxPC3 a expresi pAKT a genů níže v signální dráze, jejichž exprese je zvýšena radioterapií.
Tato studie v časopise Integrative Cancer Therapies navrhuje, že přírodní produkt, chelidonin, vykazuje apoptotickou aktivitu v lidských buňkách slinivky břišní BxPC-3 prostřednictvím regulace signální dráhy BxPC3 p53 a GADD45a.
Zdroje pro buněčnou linii BxPC-3: protokoly, videa a další
Buněčná linie BxPC-3 má mnoho zajímavých výhod, díky nimž je vhodná pro výzkumné účely. Mnoho online zdrojů o buněčné linii BxPC-3 zmiňuje její manipulaci, údržbu a protokoly transfekce.
- Transfekce BxPC3: Toto video je podrobným návodem k osvojení si protokolu transfekce pro buňky BxPC-3.
Tato část článku obsahuje několik odkazů vysvětlujících protokoly pro kultivaci buněk BxPC3.
- Kultivace buněk BxPC-3: Tato webová stránka vám pomůže naučit se protokoly pro subkultivaci a manipulaci s kryokonzervovanými a proliferativními kulturami BxPC-3.
Reference
- Kim, Y., et al., Srovnávací proteomické profilování buněčných linií adenokarcinomu pankreatických vývodů. Mol Cells, 2014. 37(12): s. 888-98.
- Kirtonia, A., et al., Nadměrná exprese lamininu-5 gama-2 podporuje tumorigenezi adenokarcinomu pankreatických vývodů prostřednictvím kaskády EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR. Cellular and Molecular Life Sciences, 2022. 79(7): s. 362.
- Turner, A., et al., Extrakty z plodů Elaeocarpus reticulatus snižují životaschopnost a indukují apoptózu v buňkách rakoviny slinivky břišní in vitro. Molecular biology reports, 2020. 47: s. 2073–2084.
- An, E.-J., et al., Protinádorový potenciál Oxialis obtriangulata v buňkách rakoviny slinivky břišní prostřednictvím regulace dráhy zprostředkované ERK/Src/STAT3. Molecules, 2020. 25(10): s. 2301.