سلسلة الخلايا A375 - دليل لأبحاث سرطان الجلد

A375 هو خط خلايا سرطان الجلد البشري المستخدم على نطاق واسع في أبحاث علم السموم وعلم الأورام المناعي. يستخدم الباحثون هذا الخط الخلوي لدراسة بيولوجيا السرطان ومسارات الإشارات، واختبار أو فحص العوامل المضادة للسرطان المحتملة، وتطوير علاجات جديدة وفعالة.

أصل خلايا A375 وخصائصها العامة

يمكن أن تساعدك معرفة أصل خط الخلايا وخصائصه العامة في التخطيط لاستخدامه في الأبحاث. سيغطي هذا القسم من المقالة أصل وخصائص خط الخلايا A375. على سبيل المثال، ما هو خط الخلايا A375؟ ما هي خصائص خط الخلايا A375؟ من أين تأتي خلايا A375؟ ما هي مورفولوجيا خلايا سرطان الجلد A375؟ ما هو حجم خلايا A375؟

• نشأ خط الخلايا السرطانية الجلدية A375 من زراعة نسيج مستخرج من ورم صلب لامرأة تبلغ من العمر 54 عامًا مصابة بسرطان الجلد الخبيث [1].
• تتميز خلايا A375 بمورفولوجيا شبيهة بالخلايا الظهارية.
• حجم خلايا A375 أصغر نسبيًا مقارنة بخطوط الخلايا الأخرى. يبلغ قطرها حوالي 12 ميكرومتر.
• خلايا سرطان الجلد A375 هي خلايا ثلاثية الصبغيات. يبلغ العدد النموذجي للكروموسومات في هذا الخط الخلوي 62. عادةً ما تحتوي كل خلية على تسعة كروموسومات علامة ونسخة واحدة من الكروموسومات N2 وN6 وN22 الطبيعية.

خلايا A375: معلومات عن زراعة الخلايا

من السهل الحفاظ على مزارع الخلايا A375. فهي لا تتطلب أي متطلبات صارمة لزراعة الخلايا. سيساعدك هذا القسم على معرفة المعلومات الضرورية عن زراعة الخلايا. مثل ما هو وقت تضاعف الخلايا A375. ما هي وسائط خط الخلايا A375؟ ما هي كثافة بذر الخلايا A375؟ هل خلايا سرطان الجلد A375 ملتصقة؟

النقاط الرئيسية لزراعة خلايا A375

زمن تضاعف الكتلة الخلوية:

يبلغ وقت تضاعف الخلايا A375 20 ساعة.

ملتصقة أم معلقة:

A375 هو خط خلايا سرطان الجلد البشري الملتصق.

كثافة البذر:

كثافة الخلايا المثالية لزراعة خلايا A375 هي 1 × 10⁴ خلية/^سم². تُشطف الخلايا الملتصقة بمحلول ملحي فوسفاتي (PBS) 1 × وتُحضن بمحلول التمرير (Accutase). بعد ذلك، تُضاف الخلايا إلى وسط الاستزراع وتُطرد. تُعاد تعليق الخلايا المجمعة في وسط استزراع وتُوزع في قوارير جديدة للنمو.

وسط النمو:

يوصى باستخدام DMEM كوسط مثالي لـ A375 عند إضافته إلى 10٪ من مصل الأبقار الجنينية (FBS)، و4.5 جم/لتر من الجلوكوز، و1.5 جم/لتر من NaHCO3، و4 مليمولار من L-Glutamine، و1.0 مليمولار من بيروفات الصوديوم. يجب تجديد وسط A375 مرتين إلى ثلاث مرات في الأسبوع.

ظروف النمو:

تُزرع خلايا سرطان الجلد A375 في حاضنة مرطبة (37 درجة مئوية) مع تزويدها بـ 5٪ من ثاني أكسيد الكربون.

التخزين:

يجب حفظ خلايا A375 المجمدة عند درجة حرارة أقل من -150 درجة مئوية في المرحلة البخارية من النيتروجين السائل أو في ثلاجة كهربائية.

عملية التجميد والوسط:

تُستخدم وسائط CM-1 أو CM-ACF لتجميد خط الخلايا A375. تم اختيار عملية تجميد بطيئة تسمح بانخفاض تدريجي في درجة الحرارة بمقدار 1 درجة مئوية لحماية قابلية الخلايا للحياة.

عملية الذوبان:

يتم تقليب قارورة خلايا سرطان الجلد A375 المجمدة بسرعة في حمام مائي لمدة 40 إلى 60 ثانية حتى يتبقى فقط كتلة صغيرة من الجليد. تضاف الخلايا إلى وسط جديد وتُطرد مركزيًا لإزالة عناصر وسط التجميد. يتم إعادة تعليق حبيبات الخلايا الناتجة وصبها في قوارير جديدة.

مستوى السلامة الحيوية:

تتم معالجة مزارع A375 وصيانتها في بيئة مختبرية بمستوى السلامة الحيوية 1.

التطبيقات البحثية لسلسلة الخلايا A375

يتمتع خط الخلايا A375 بتطبيقات بحثية واسعة النطاق في مجال أبحاث السرطان. فيما يلي بعض المجالات الشائعة التي تُستخدم فيها خلايا A375.

• أبحاث السرطان: للخلايا A375 تطبيقات واسعة النطاق في أبحاث سرطان الجلد. استخدم الباحثون هذه الخلايا لدراسة بيولوجيا سرطان الجلد وعملياته وآليات الإشارات الخلوية الكامنة وراءه، بما في ذلك تكاثر الخلايا وهجرتها وغزوها. وقد يساعد ذلك الباحثين أيضًا في تحديد أهداف علاجية جزيئية جديدة. استخدمت دراسة أجراها لين زو وزملاؤه في عام 2019 خلايا سرطان الجلد A375 شديدة العدوانية، ووجدت دور microRNA-3662 في نمو وغزو خلايا سرطان الجلد A375. تشير نتائج الدراسة إلى أن microRNA-3662 يستهدف جين ZEB1 وينظم نمو خلايا سرطان الجلد في المختبر وفي الجسم الحي في نموذج ورم A375 [2]. وبالمثل، وجدت الأبحاث التي أجريت في عام 2018 أن مسارات PI3K/AKT و MAPK/ERK تشارك في تكاثر وانتشار خط الخلايا A375 [3].
• اكتشاف الأدوية واختبارها: خط الخلايا A375 هو نموذج ورمي مفيد في المختبر لاختبار وفحص العوامل المضادة للسرطان المحتملة. يقوم الباحثون بتقييم سمية وفعالية الأدوية الكيميائية الجديدة والمركبات والعلاجات الأخرى باستخدام خلايا سرطان الجلد A375 هذه. على سبيل المثال، استكشفت دراسة الخصائص المضادة للسرطان للميكرو-والنانو-حويصلات المشتقة من الجريب فروت على خلايا سرطان الجلد البشري A375. أظهرت النتائج أن الميكرو-والنانو-حويصلات تحفز توقف دورة الخلية وموت الخلايا المبرمج وتعيق التعبير الجيني في تكاثر الخلايا وهجرتها وغزوها [4].

خلايا A375: المنشورات

يتم هنا ذكر بعض المنشورات البحثية المهمة التي تتناول خلايا A375.

فيتامين د ونظائره منخفضة الكالسيوم تعدل الخصائص المضادة للسرطان للسيسبلاتين والداكاربازين في خط خلايا سرطان الجلد البشري A375

نُشرت هذه الدراسة في مجلة Journal of Oncology في عام 2019. اقترحت الدراسة أن العلاج المشترك بفيتامين د ومثيلاته يحسن النشاط المضاد للسرطان للسيسبلاتين والداكاربازين في خلايا سرطان الجلد A375.

تقييم مختبري لتأثيرات مضادة لسرطان الجلد (سلسلة خلايا A375) لمستخلصات الهلام والأوراق الكاملة من أنواع مختارة من الصبار

نُشرت هذه الدراسة في مجلة الطب العشبي (Journal of Herbal Medicine) في عام 2022. استكشفت هذه الدراسة التأثيرات المضادة لسرطان الجلد لجل الصبار في خلايا سرطان الجلد A375.

يعزز عضو عائلة فيرميتين 2 تطور سرطان الجلد عن طريق تعزيز ارتباط p-α-Pix بـ Rac1 لتنشيط مسار MAPK

اقترحت هذه الدراسة المنشورة في مجلة Oncogene (2021) أن عضو عائلة فيرميتين 2 (FERMT2 أو كيندلين-2) يشجع تطور سرطان الجلد عن طريق تنشيط MAPK من خلال الارتباط مع p-α-Pix و Rac1.

يسهل FARP1 تكاثر الخلايا من خلال تعديل مسار إشارات MAPK في سرطان الجلد

اقترحت هذه الدراسة المنشورة في مجلة The American Journal of Dermatopathology (2019) أن FARP1 قد يسهل تطور وتقدم سرطان الجلد الميلانيني. وبالتالي، يمكن أن يكون هدفًا علاجيًا مفيدًا.

القدرة السامة للخلايا والمسببة لموت الخلايا المبرمج لمستخلصات Phyllodium elegans على سلالات الخلايا السرطانية البشرية

نُشرت هذه المقالة البحثية في مجلة Bioengineered (2019). استكشفت هذه الدراسة النشاط السام للخلايا والمسبب لموت الخلايا المبرمج لمستخلص نبات Phyllodium elegans على سلالات الخلايا السرطانية البشرية، بما في ذلك A375.

موارد لسلسلة الخلايا A375: بروتوكولات ومقاطع فيديو والمزيد

فيما يلي بعض الموارد عبر الإنترنت التي تتناول خلايا A375.

• تحويل الخلايا A375: سيساعدك هذا الفيديو التعليمي على تعلم تحويل الخلايا A375 خطوة بخطوة.
• زراعة الخلايا: يحتوي هذا الفيديو على معلومات مفيدة للغاية بشأن زراعة سلالات الخلايا.

بروتوكولات زراعة الخلايا لخط الخلايا A375 مدرجة هنا.

• سلسلة الخلايا A375: يحتوي هذا الرابط على معلومات مفيدة حول زراعة سلسلة الخلايا A375 وصيانتها، بما في ذلك وسائط A375 والتعامل مع مزارع A375 المجمدة والمتكاثرة.

المراجع

1. Avram, S., et al., Standardization of A375 human melanoma models on chicken embryo chorioallantoic membrane and Balb/c nude mice. Oncol Rep, 2017. 38(1): p. 89-99.
2. Zhu, L., et al., MicroRNA-3662 يستهدف ZEB1 ويخفف من غزو خط الخلايا السرطانية A375 شديد العدوانية. Cancer Manag Res, 2019. 11: ص. 5845-5856.
3. Peng, X., et al., Oxyfadichalcone C يثبط تكاثر خلايا سرطان الجلد A375 وانتشارها عن طريق تثبيط مسارات PI3K/Akt و MAPK/ERK. Life sciences, 2018. 206: ص. 35-44.
4. Stanly, C., et al., تُظهر الحويصلات الدقيقة والنانوية المشتقة من الجريب فروت ملامح استقلابية مميزة وأنشطة مضادة للسرطان في خط الخلايا البشرية لسرطان الجلد A375. Cells, 2020. 9(12): p. 2722.