انتقل إلى الصفحة الرئيسية

خلايا Hep3B: أبحاث واكتشافات سرطان الخلايا الكبدية

HEP3B هو خط خلايا سرطانية كبدية مستمدة من الإنسان ومخلدة. ويستخدم على نطاق واسع في أبحاث السمية الكبدية واستقلاب الأدوية. تتميز خلايا HEP3B بكفاءة عالية في نقل الجينات؛ ولذلك، تُستخدم هذه الخلايا عادةً لدراسة تطور سرطان الكبد وتقدمه والتدخلات العلاجية. تغطي هذه المقالة جميع المعلومات الضرورية حول خط الخلايا HEP3B لمساعدتك في العمل معها. وستتضمن بشكل أساسي:

📋 خط الخلايا HEP3B — حقائق سريعة
وسط النمو
يُستخدم وسط EMEM الذي يحتوي على 10٪ FBS و2.2 جم/لتر NaHCO3 و2 مليمولار L-Glutamine ومحلول ملح متوازن من Earle (EBSS) لزراعة خلايا HEP3B.
وقت التضاعف
يبلغ وقت مضاعفة خلايا HEP3B حوالي 36 ساعة.
نوع النمو
هذا الخط الخلوي لسرطان الكبد هو خط خلوي ملتصق.
مستوى السلامة الحيوية
BSL-1
متوفر من
Cytion — طلب HEP3B
  1. الخصائص العامة وأصل خلايا HEP3B
  2. معلومات حول زراعة خط الخلايا HEP3B
  3. سلسلة خلايا HEP3B: المزايا والقيود
  4. تطبيقات خلايا HEP3B في الأبحاث
  5. منشورات حول خط الخلايا HEP3B
  6. موارد خط الخلايا HEP3B: بروتوكولات، مقاطع فيديو، والمزيد

الخصائص العامة وأصل خلايا HEP3B

المعلومات الأساسية التي تحتاجها عن خط الخلايا هي أصله وخصائصه العامة. يمكن أن تساعدك هذه المعلومات في تحديد استخدامه في أبحاثك وفي التعامل معه. يغطي هذا القسم من المقالة جميع المعلومات الأساسية حول أصل خلايا HEP3B وخصائصها. ستتعرف هنا على: ما هي سلالات الخلايا Hep 3B؟ ما هو أصل خلايا Hep3B؟ ما هي مورفولوجيا خلايا HEP3B؟

  • HEP3B، خط خلايا سرطان الكبد البشري المستمر، نشأ من نسيج الكبد لطفل أفريقي يبلغ من العمر 8 سنوات مصاب بسرطان الخلايا الكبدية (HCC). تم إنشاؤها بواسطة Aden وزملاؤه في عام 1979 في مختبر Barbara B. Knowles، معهد Wistar، فيلادلفيا، الولايات المتحدة الأمريكية [1]. 
  • تحتوي خلايا HEP3B على تكامل لجينوم فيروس التهاب الكبد B (HBV) في كروموسومها.
  • تظهر خلايا سرطان الخلايا الكبدية هذه مورفولوجيا ظهارية.
  • يبلغ العدد النموذجي للكروموسومات في خلايا HEP3B 60. وعلى عكس خلايا HepG2، لا تحتوي هذه الخلايا على كروموسوم 1 معاد ترتيبه.

ما الفرق بين HepG2 و Hep3B؟

يختلف HepG2 و HEP3B في عدد الكروموسومات لكل خلية. يحتوي HEP3B على 60 كروموسومًا، بينما تحتوي خلايا HepG2 على 55 كروموسومًا في المتوسط. علاوة على ذلك، فإن HepG2 غير مسبب للأورام وسالب لفيروس التهاب الكبد B، في حين أن HEP3B مسبب للأورام وإيجابي لفيروس التهاب الكبد B.

سرطان الكبد تحت المجهر بتكبير عالٍ.

معلومات حول زراعة خط الخلايا HEP3B

يمكن أن تسهل عليك المعرفة بمعلومات زراعة خط الخلايا التعامل معه. يغطي هذا القسم جميع النقاط الرئيسية لزراعة خط الخلايا HEP3B HBV، بما في ذلك: ما هو وقت تضاعف خلايا Hep3B؟ ما هي ظروف زراعة HEP3B؟ كيف تزرع خلايا HEP3B HCC؟

النقاط الرئيسية لاستزراع خلايا HEP3B

زمن التضاعف:

يبلغ وقت تضاعف خلايا HEP3B حوالي 36 ساعة.

ملتصقة أم معلقة:

هذا الخط الخلوي لسرطان الكبد ملتصق.

نسبة الانقسام:

تُزرع خلايا HEP3B بنسبة تتراوح بين 1:2 و 1:4. تُشطف خلايا HEP3B الملتصقة بمحلول PBS 1x ثم تُحضن بمحلول تفكيك Accutase. بعد 8 إلى 10 دقائق، تضاف وسائط جديدة، وتُطرح الخلايا في جهاز الطرد المركزي. ثم تُعاد تعليق الخلايا المجمعة بعناية وتُصب في قوارير تحتوي على وسائط استزراع بنسبة تقسيم موصى بها.

وسط النمو:

يتم استخدام وسط EMEM الذي يحتوي على 10٪ FBS، و2.2 جم/لتر NaHCO3، و2 مليمولار L-Glutamine، ومحلول Earle's Balanced Salt Solution (EBSS) لزراعة خلايا HEP3B.

ظروف النمو: 

تُزرع خلايا HEP3B في حاضنة مرطبة بدرجة حرارة 37 درجة مئوية مع إمداد مستمر بنسبة 5٪ من ثاني أكسيد الكربون.

التخزين: 

يتم تخزين خلايا HEP3B المجمدة عند درجة حرارة أقل من -150 درجة مئوية في ثلاجة كهربائية أو في المرحلة البخارية من النيتروجين السائل.

عملية التجميد والوسط:

الوسط الموصى به لتجميد خلايا HEP3B هو CM-1 أو CM-ACF. يتم تجميد الخلايا باستخدام عملية تجميد بطيئة لا تسمح بانخفاض درجة الحرارة إلا بمقدار 1 درجة مئوية في الدقيقة الواحدة لحماية قابلية الخلايا للحياة.

عملية الذوبان:

يتم إذابة الخلايا المجمدة في حمام مائي محدد مسبقًا عند درجة حرارة 37 درجة مئوية لمدة 40 إلى 60 ثانية. بعد ذلك، تضاف هذه الخلايا إلى وسط النمو الطازج وتُطرح في جهاز الطرد المركزي لإزالة عناصر وسط التجميد. تُعاد تعليق الخلايا المجمعة وتُوزع في قوارير جديدة للنمو.

مستوى السلامة الحيوية:

يلزم وجود مختبر بمستوى السلامة الحيوية 1 لزراعة خلايا HEP3B.

 

Hep3b cells

طبقة ملتصقة شبه متلاصقة من خلايا Hep3B بتكبير 10× و20×.

سلسلة الخلايا HEP3B: المزايا والقيود

HEP3B هو خط خلوي لسرطان الخلايا الكبدية يستخدم على نطاق واسع. سيركز هذا القسم على بعض المزايا والقيود الرئيسية لهذه الخلايا السرطانية الكبدية.

المزايا

المزايا الرئيسية لخلايا HEP3B هي:

سهولة الاستزراع

لا تتطلب خلايا HEP3B متطلبات زراعة خلايا معقدة، مما يجعلها سهلة التعامل والصيانة في مختبر الأبحاث. وهذا يبسط الإجراءات التجريبية.

كفاءة عالية في نقل الجينات

تتميز خلايا HEP3B بكفاءة نقل جينية ملحوظة، مما يجعلها مستخدمة على نطاق واسع في التلاعب الجيني والدراسات المتعلقة بالتعبير الجيني.

القدرة على تكوين الأورام

HEP3B هي سلالة خلايا سرطانية كبدية قادرة على تكوين أورام عند حقنها في فأر يعاني من ضعف المناعة. وهذا يساعد في دراسة تطور السرطان وتقدمه باستخدام نماذج زرع الأعضاء الغريبة HEP3B.

حالة P53 في HEP3B

تمتلك خلايا HEP3B طفرة في جين P53 مشابهة لسرطان الخلايا الكبدية (HCC) وأنواع أخرى من السرطان، مما يجعلها ذات صلة بدراسة آثار طفرة P53 على نمو السرطان وتطوره وتقدمه.

 

القيود

القيود المرتبطة بسلالة الخلايا HEP3B هي:

نموذج الخلايا المختبري

يُستخدم خط الخلايا HEP3B كنموذج مختبري لخلايا سرطان الخلايا الكبدية (HCC). ومع ذلك، قد لا يمثل بشكل كامل تعقيد سرطان الخلايا الكبدية كما هو موجود في الكائنات الحية. وبالتالي، قد تختلف نتائج التجارب المختبرية عن تلك التي يتم ملاحظتها في الجسم الحي.

 

تطبيقات خلايا HEP3B في الأبحاث

يوفر خط الخلايا HEP3B العديد من التطبيقات البحثية في مجال البحوث الطبية الحيوية. تشمل بعض التطبيقات البحثية الرئيسية لخلايا HEP3B ما يلي:

  • بيولوجيا السرطان: HEP3B هو خط خلايا سرطان الخلايا الكبدية البشرية. وهو نموذج خلوي لا يقدر بثمن لدراسة الآليات الخلوية والجزيئية الكامنة وراء تطور سرطان الخلايا الكبدية (HCC) وتقدمه. يستخدم الباحثون هذه الخلايا لدراسة الطفرات الجينية والعمليات الخلوية ومسارات إشارات الخلايا المرتبطة بسرطان الكبد. على سبيل المثال، استخدمت إحدى الدراسات خلايا HEP3B ووجدت أن microRNA-223-3p ينظم مكونات إنفلاماسوم NLRP3، ويثبط التكاثر، ويعزز موت الخلايا المبرمج لخلايا سرطان الكبد HEP3B [2].
  • فحص الأدوية وتطويرها: تُستخدم سلالة الخلايا HEP3B أيضًا لاختبار وفحص وتطوير علاجات جديدة لسرطان الكبد. علاوة على ذلك، تُستخدم لتقييم سمية وفعالية الأدوية والعلاجات المختلفة المضادة للسرطان. استخدم الباحثون أيضًا خلايا سرطان الكبد هذه لدراسة استقلاب الأدوية. استخدم الباحثون خلايا HEP3B وقاموا بتقييم الإمكانات السامة لمستخلص نبات Cotinus coggygria على خلايا سرطان الكبد HEP3B [3].
  • الالتهابات الفيروسية: HEP3B هو خط خلوي إيجابي لفيروس التهاب الكبد B؛ لذلك، يتم استخدامه لدراسة الالتهابات الفيروسية التي قد تؤدي إلى تطور سرطان الكبد، أي HBV و HCV. قد يساعد هذا في فهم الالتهابات الفيروسية بشكل أفضل وتطوير علاجات مضادة للفيروسات محتملة. على سبيل المثال، استخدمت إحدى الدراسات خلايا سرطان الكبد HEP3B ودرست أهمية عملية التوبيقيتين في انتشار فيروس التهاب الكبد C. وأشارت النتائج إلى أن البروتياز 15 الخاص باليوبيكويتين (USP15) يشارك في انتشار فيروس التهاب الكبد C (HCV) من خلال تنظيم وظائف خلايا الكبد، بما في ذلك تكوين قطرات الدهون وترجمة الحمض النووي الريبي لفيروس التهاب الكبد C [4].

5. المنشورات المتعلقة بسلسلة الخلايا HEP3B

سيتناول هذا القسم من المقالة بعض المنشورات البحثية المثيرة للاهتمام حول خلايا HEP3B.

تنظيم موت الخلايا المبرمج والالتهام الذاتي بواسطة اللوتولين في خلايا Hep3B السرطانية الكبدية البشرية

اقترح هذا المنشور في مجلة Biochemical and Biophysical Research Communications (2019) أن الإجهاد الذي يسببه مركب اللوتولين في الشبكة الإندوبلازمية قد يكون له تأثيرات مضادة للأورام في خلايا HEP3B الخالية من P53 بطريقة مستقلة عن P53.

الاستهداف المحتمل لخلايا سرطان الكبد Hep3B بواسطة اللوبيول المعزول من Avicennia marina

اقترحت هذه الدراسة المنشورة في مجلة Archiv der Pharmazie (2021) استخدام مركب تريتيربينويد خماسي الحلقات، وهو اللوبيول، كعامل محتمل لمكافحة السرطان ضد خلايا HEP3B.

مستخلص الإيثانول من Cnidium monnieri (L.) Cusson يحفز توقف دورة الخلية وموت الخلايا المبرمج عبر تنظيم المسار المستقل عن p53 في خلايا سرطان الكبد HepG2 و Hep3B

نُشرت هذه المقالة في مجلة Molecular Medicine Reports (2017). تشير نتائج الدراسة إلى أن مستخلص الإيثانول من Cnidium monnieri (L.) Cusson يحفز موت الخلايا (الاستماتة الخلوية) وتوقف دورة الخلية في خلايا سرطان الكبد HepG2 و HEP3B من خلال تنظيم مسار إشارات p53 و Akt/GSK-3β.

يعزز الأورانوفين موت الخلايا المبرمج بوساطة السلفورافان في خلايا سرطان الكبد Hep3B من خلال تعطيل مسار إشارات PI3K/Akt

اقترح هذا البحث المنشور في مجلة Biomolecules and Therapeutics (2020) أن الأورانوفين يُظهر نشاطًا تآزريًا ويعزز موت الخلايا المبرمج بوساطة السلفورافان في خلايا HEP3B عبر تنشيط مسار PI3K/AKT.

يتمتع الحمض النووي الريبي الدائري RNA-0072309 بتأثيرات مضادة للأورام في خط الخلايا Hep3B من خلال استهداف microRNA-665

اقترحت هذه المقالة البحثية المنشورة في مجلة BioFactors (2023) أن الحمض النووي الريبي الدائري RNA-0072309 له تأثيرات مضادة للأورام في خلايا سرطان الكبد HEP3B من خلال استهداف miRNA-665.

موارد لسلسلة خلايا HEP3B: بروتوكولات ومقاطع فيديو والمزيد

فيما يلي بعض الموارد المتاحة حول خلايا HEP3B:

  • تحويل HEP3B: يشرح هذا الفيديو بروتوكول التحويل لخلايا HEP3B.
  • كفاءة نقل HEP3B: سيساعدك هذا الرابط على التعرف على تركيبة وسط DMEM لـ HEP3B، وتمرير الخلايا، وبروتوكول نقل الخلايا لخلايا HEP3B. بالإضافة إلى ذلك، يوفر معلومات حول تحسين كاشف Lipofectamine 3000 لـ HEP3B في بروتوكول النقل الخاص بك.

يحتوي الرابط التالي على بروتوكول زراعة خلايا HEP3B:

  • ظروف زراعة HEP3B: سيساعدك هذا الرابط على التعرف على بروتوكول التعامل مع مزارع Huh7 و HEP3B والحفاظ عليها.
  • خلايا HEP3B: يحتوي هذا الموقع على الكثير من المعلومات حول خلايا HEP3B، بما في ذلك وسائط HEP3B، وبروتوكول تقسيم الخلايا، وإذابة الثلج، والتعامل مع المزارع المتكاثرة والمحفوظة بالتبريد.

المراجع

  1. Puttahanumantharayappa, L.D., et al., Origin and properties of hepatocellular carcinoma cell lines. Japanese J Gastroenterol Res, 2021. 1(8): p. 1040.
  2. Wan, L., et al., miRNA-223-3p regulates NLRP3 to promote apoptosis and inhibit proliferation of hep3B cells. Experimental and therapeutic medicine, 2018. 15(3): p. 2429-2435.
  3. Danjolli-Hashani, D. و S. Selen-Isbilir، التأثير السام لمستخلص Cotinus coggygria على خط الخلايا السرطانية Hep3B. أبحاث المنتجات الطبيعية، 2022: ص. 1-4.
  4. Kusakabe, S.، وآخرون، يشارك USP15 في انتشار فيروس التهاب الكبد C من خلال تنظيم ترجمة الحمض النووي الريبي الفيروسي وتكوين قطرات الدهون. مجلة علم الفيروسات، 2019. 93(6): ص. 10.1128/jvi. 01708-18.

 

لقد اكتشفنا أنك في بلد مختلف أو أنك تستخدم لغة متصفح مختلفة عن اللغة المحددة حاليًا. هل ترغب في قبول الإعدادات المقترحة؟

إغلاق