خلايا Hep3B: أبحاث واكتشافات سرطان الخلايا الكبدية

HEP3B هو خط خلايا سرطان الخلايا الكبدية الخالد المشتق من الإنسان. ويُستخدم على نطاق واسع في أبحاث السمية الكبدية واستقلاب الأدوية. وتعتبر كفاءة نقل خلايا HEP3B كبيرة؛ لذلك تُستخدم هذه الخلايا عادةً لدراسة تطور سرطان الكبد وتطوره والتدخلات العلاجية. تغطي هذه المقالة جميع المعلومات الضرورية حول خط خلايا HEP3B لمساعدتك في التعامل معه. وستتضمن بشكل أساسي ما يلي:

  1. الخصائص العامة لخلايا HEP3B وأصلها
  2. معلومات عن زراعة خط الخلايا HEP3B
  3. خط خلايا HEP3B المزايا والقيود
  4. تطبيقات خلايا HEP3B في الأبحاث
  5. منشورات عن خط الخلايا HEP3B
  6. موارد خط الخلايا HEP3B: البروتوكولات ومقاطع الفيديو والمزيد

1.الخصائص العامة لخلايا HEP3B وأصلها

المعلومات الأساسية التي تحتاجها حول خط الخلية هي أصلها وخصائصها العامة. يمكن أن تساعدك في تحديد استخدامه في بحثك وتساعدك في التعامل معه. يغطي هذا القسم من المقالة جميع المعلومات الأساسية حول أصل HEP3B وخصائصه. ستتعلم هنا: ما هي خطوط خلايا Hep 3B الخلوية؟ ما هو أصل خلايا Hep3B؟ ما هي مورفولوجيا خلايا HEP3B؟

  • Hep3B، هو خط خلوي مستمر لورم الكبد البشري، نشأ من نسيج كبد صبي أفريقي يبلغ من العمر 8 سنوات مصاب بسرطان الخلايا الكبدية (HCC). تم إنشاؤه من قبل أدين وزملائه في عام 1979 في مختبر باربرا ب. نولز في معهد ويستار، فيلادلفيا، الولايات المتحدة الأمريكية [1].
  • تحتوي خلايا HEP3B على دمج جينوم فيروس التهاب الكبد B (HBV) في كروموسومها.
  • تُظهر خلايا سرطان الخلايا الكبدية هذه مورفولوجيا طلائية.
  • يبلغ عدد كروموسومات خلايا HEP3B عدد كروموسوم نموذجي 60. وعلى عكس خلايا HepG2، فهي لا تحتوي على كروموسوم 1 معاد ترتيبه.

ما الفرق بين HepG2 وHep3B؟

يختلف كل من HepG2 وHepG2 وHep3B في عدد الكروموسومات لكل خلية. تحتوي خلايا HepG2 على 60 كروموسومًا، بينما تحتوي خلايا HepG2 على 55 كروموسومًا في المتوسط. وعلاوة على ذلك، فإن خلايا HepG2 غير مولدة للأورام وسالبة للالتهاب الكبدي B، في حين أن خلايا HEP3B مولدة للأورام وموجبة لفيروس التهاب الكبد B.

سرطان الكبد بالتكبير العالي تحت المجهر.

2.معلومات الاستزراع حول خط الخلايا HEP3B

يمكن أن تجعلك معرفة معلومات الاستزراع الخاصة بخط الخلية تتساهل في التعامل معه. يغطي هذا القسم جميع النقاط الرئيسية لزراعة خط خلايا HEP3B HB، بما في ذلك: ما هو وقت مضاعفة خلايا Hep3B؟ ما هي شروط زراعة سلالة HEP3B؟ كيف تتم زراعة خلايا HEP3B HCC؟

النقاط الرئيسية لزراعة خلايا HEP3B

زمن المضاعفة:

وقت مضاعفة خلايا HEP3B هو 36 ساعة تقريبًا.

ملتصقة أو معلقة:

سلالة خلايا الورم الكبدي هذه ملتصقة.

نسبة الانقسام:

تُزرع خلايا HEP3B بنسبة 1:2 إلى 1:4. يتم شطف خلايا HEP3B الملتصقة ب 1 × PBS ثم يتم تحضينها بمحلول التفكك Accutase. بعد 8 إلى 10 دقائق، تُضاف وسائط جديدة ويتم طرد الخلايا مركزيًا. ثم يتم إعادة تعليق الخلايا التي تم حصادها بعناية وسكبها في قوارير تحتوي على وسائط الاستزراع بنسبة تقسيم موصى بها.

وسط النمو:

يُستخدم وسط EMEM الذي يحتوي على 10% من FBS، و2.2 جم/لتر NaHCO3، و2 ملي مولار من الجلوتامين L-Glutamine، ومحلول الملح المتوازن من إيرل (EBSS) لزراعة خلايا HEP3B.

ظروف النمو:

تُزرع خلايا HEP3B في حاضنة مرطبة بدرجة حرارة 37 درجة مئوية مع إمداد مستمر بنسبة 5% من ثاني أكسيد الكربون.

التخزين:

يتم تخزين خلايا HEP3B المجمدة في درجة حرارة أقل من -150 درجة مئوية في مجمد كهربائي أو في مرحلة بخار النيتروجين السائل.

عملية التجميد والوسط:

وسط التجميد الموصى به لخلايا HEP3B هو CM-1 أو CM-ACF. تُجمّد الخلايا باستخدام عملية تجميد بطيئة تسمح بانخفاض درجة الحرارة بمقدار 1 درجة مئوية فقط في الدقيقة الواحدة لحماية حيوية الخلية.

عملية الإذابة:

يتم إذابة الخلايا المجمدة في حمام مائي مضبوط مسبقاً على 37 درجة مئوية لمدة 40 إلى 60 ثانية. تُضاف هذه الخلايا لاحقًا إلى وسط النمو الطازج ويتم طردها مركزيًا لإزالة عناصر وسط التجميد. يتم إعادة تعليق الخلايا المجمعة وتوزيعها في قوارير جديدة للنمو.

مستوى السلامة البيولوجية:

يلزم وجود مختبر من مستوى السلامة البيولوجية 1 لزراعة خلايا HEP3B.

طبقة ملتصقة شبه متماسكة من خلايا Hep3B بتكبير 10× و20×.

3.خط خلايا HEP3B: المزايا والقيود

HEP3B هو خط خلايا سرطان الخلايا الكبدية المستخدم على نطاق واسع. سيركز هذا القسم على بعض المزايا والقيود الرئيسية لخلايا الورم الكبدي هذه.

المزايا

المزايا الرئيسية لخلايا HEP3B هي:

سهولة الاستزراع

ليس لخلايا HEP3B متطلبات زراعة الخلايا الصعبة، مما يسهل التعامل معها وصيانتها في المختبر البحثي. وهذا يبسط الإجراءات التجريبية.

كفاءة نقل عالية

تُظهر خلايا HEP3B كفاءة عالية في نقل الجينات، مما يجعلها تُستخدم على نطاق واسع في التلاعب الجيني والدراسات المتعلقة بالتعبير الجيني.

التولّد الورمي

HEP3B هو سلالة خلايا سرطانية كبدية سرطانية ورمية قادرة على تكوين أورام عند حقنها في فأر ضعيف المناعة. ويساعد ذلك في دراسة تطور السرطان وتطوره باستخدام نماذج الطعم المجهري HEP3B.

حالة HEP3B P53

تحتوي خلايا HEP3B على طفرة جينية P53 مشابهة لسرطان الخلايا الكبدية (HCC) وغيرها من أنواع السرطان الأخرى، مما يجعلها ذات صلة بدراسة تأثيرات طفرة P53 على نمو السرطان وتطوره وتطوره.

القيود

القيد المرتبط بخط خلايا HEP3B هو:

نموذج الخلية في المختبر

يعمل خط خلايا HEP3B كنموذج مختبري لخلايا سرطان الخلايا الكبدية (HCC). ومع ذلك، قد لا يمثل بشكل كامل تعقيد سرطان الكبد كما هو موجود في الكائنات الحية. وبالتالي، قد تختلف النتائج التجريبية في المختبر عن تلك التي لوحظت في الجسم الحي.

4.تطبيقات خلايا HEP3B في الأبحاث

يقدم خط خلايا HEP3B العديد من التطبيقات البحثية في الأبحاث الطبية الحيوية. وتشمل بعض التطبيقات البحثية الرئيسية لخلايا HEP3B ما يلي:

  • بيولوجيا السرطان: HEP3B هو خط خلايا سرطان الخلايا الكبدية البشرية. وهو نموذج خلوي لا يقدر بثمن للتحقيق في الآليات الخلوية والجزيئية الكامنة وراء تطور سرطان الكبد HCC وتطوره. يستخدم الباحثون هذه الخلايا لدراسة الطفرات الجينية والعمليات الخلوية ومسارات إشارات الخلايا المرتبطة بسرطان الكبد. مثل دراسة استخدمت خلايا HEP3B ووجدت أن الحمض النووي الريبوزي الميكروي - 223-3p ينظم مكونات NLRP3 الالتهابية ويمنع تكاثر خلايا سرطان الكبد HEP3B ويعزز موت الخلايا المبرمج لخلايا سرطان الكبد [2].
  • فحص الأدوية وتطويرها: يُستخدم خط خلايا HEP3B أيضًا لاختبار وفحص وتطوير علاجات جديدة ضد سرطان الكبد. علاوة على ذلك، يُستخدم لتقييم سمية وفعالية مختلف الأدوية والعلاجات المضادة للسرطان. كما استخدم الباحثون هذه الخلايا الكبدية لدراسة استقلاب الأدوية. استخدم الباحثون خلايا HEP3B وقاموا بتقييم القدرة السامة للخلايا لمستخلص نبات كوتينوس كوجيجريا على خلايا سرطان الكبد HEP3B [3].
  • العدوى الفيروسية: إن HEP3B هو خط خلوي إيجابي لفيروس التهاب الكبد B؛ لذلك يتم استخدامه لدراسة العدوى الفيروسية التي قد تؤدي إلى تطور سرطان الكبد، أي فيروس التهاب الكبد B وفيروس التهاب الكبد الوبائي HCV. قد يساعد ذلك على فهم أفضل للعدوى الفيروسية وتطوير علاجات محتملة مضادة للفيروسات. على سبيل المثال، استخدمت إحدى الدراسات خلايا سرطان الكبد من نوع HEP3B وبحثت في أهمية اليوبيكويتين في انتشار فيروس التهاب الكبد الوبائي سي. أشارت النتائج إلى أن البروتياز الخاص بيوبيكويتين 15 (USP15) يشارك في انتشار فيروس التهاب الكبد الوبائي سي عن طريق تنظيم الوظائف الخاصة بالخلايا الكبدية، بما في ذلك تكوين قطرات الدهون وترجمة الحمض النووي الريبي لفيروس التهاب الكبد الوبائي سي [4].

5.منشورات عن خط خلايا HEP3B

سيغطي هذا القسم من المقالة بعض المنشورات البحثية المثيرة للاهتمام حول خلايا HEP3B.

تنظيم موت الخلايا المبرمج والالتهام الذاتي بواسطة اللوتولين في خلايا سرطان الخلايا الكبدية البشرية Hep3B

اقترح هذا المنشور في مجلة Biochemical and Biophysical Research Communications (2019) أن إجهاد الشبكة الإندوبلازمية الناجم عن مركب اللوتولين قد يمارس تأثيرات مضادة للورم في خلايا HEP3B الخالية من P53 بطريقة مستقلة عن P53.

الاستهداف المحتمل لخلايا سرطان الكبد Hep3B بواسطة اللوبيول المعزول من أفيسينيا مارينا

اقترحت هذه الدراسة في مجلة Archiv der Pharmazie (2021) مادة خماسية خماسية ثلاثية التريبينويد تسمى لوبول كعامل محتمل مضاد للسرطان ضد خلايا HEP3B.

يحث مستخلص الإيثانول من Cnidium monnieri (L.) Cusson على توقف دورة الخلية وموت الخلايا المبرمج عن طريق تنظيم المسار المستقل p53 في خلايا سرطان الخلايا الكبدية HepG2 و Hep3B

نُشرت هذه المقالة في تقارير الطب الجزيئي (2017). تشير نتائج الدراسة إلى أن مستخلص الإيثانول Cnidium monnieri (L.) Cusson يحفز موت الخلايا (موت الخلايا المبرمج) وتوقف دورة الخلية في خلايا سرطان الكبد HepG2 وHep3B من خلال تنظيم مسار الإشارات p53 ومسار الإشارات p53 وAkt/GSK-3β.

يعزز الأورانوفين من موت الخلايا المبرمج بوساطة السلفورافان في خلايا سرطان الكبد Hep3B من خلال تعطيل مسار إشارات PI3K/Akt

اقترح هذا البحث المنشور في مجلة "الجزيئات الحيوية والعلاجات" (2020) أن الأورانوفين يُظهر نشاطًا تآزريًا ويعزز موت الخلايا المبرمج بوساطة السلفورافان في خلايا سرطان الكبد Hep3B عبر تنشيط مسار PI3K/AKT.

يحتوي RNA-0072309 الدائري على تأثيرات مضادة للأورام في خط خلايا Hep3B عن طريق استهداف الحمض النووي الريبي الدقيق-665

اقترحت هذه المقالة البحثية في BioFactors (2023) أن RNA-0072309 الدائري يمارس تأثيرات مضادة للورم في خلايا سرطان الخلايا الكبدية HEP3B عن طريق استهداف الحمض النووي الريبي الدقيق-665.

6.مصادر خط خلايا HEP3B: البروتوكولات ومقاطع الفيديو والمزيد

فيما يلي بعض الموارد المتاحة عن خلايا HEP3B:

  • نقل HEP3B: يشرح هذا الفيديو بروتوكول نقل العدوى لخلايا HEP3B.
  • كفاءة نقل HEP3B: سيساعدك هذا الرابط في معرفة تركيبة وسط DMEM لخلايا HEP3B، وتمرير الخلايا، وبروتوكول نقل العدوى لخلايا HEP3B. بالإضافة إلى ذلك، فإنه يوفر معلومات لتحسين كاشف ليبوفيكتامين 3000 HEP3B في بروتوكول نقل العدوى الخاص بك.

يحتوي الرابط التالي على بروتوكول زراعة خلايا HEP3B:

  • شروط مزرعة HEP3B: سيساعدك هذا الرابط في معرفة بروتوكول التعامل مع مزارع خلايا Huh7 و HEP3B والحفاظ عليها.
  • خلايا HEP3B: يحتوي هذا الموقع الإلكتروني على الكثير من المعلومات عن خلايا HEP3B، بما في ذلك وسائط HEP3B، وبروتوكول تقسيم الخلايا، وإذابتها والتعامل مع المزارع التكاثرية والمحفوظة بالتبريد.

المراجع

  1. Puttahanumantantharayappa, L.D., et al., أصل وخصائص خطوط خلايا سرطان الخلايا الكبدية. Japan J J Gastroenterol Res، 2021. 1(8): p. 1040.
  2. Wan, L., et al., miRNA-223-3p ينظم NLRP3 لتعزيز موت الخلايا المبرمج وتثبيط تكاثر خلايا الكبد 3B. الطب التجريبي والعلاجي، 2018. 15(3): p. 2429-2435.
  3. Danjolli-Hashani, D. and S. Selen-Isbilir، التأثير السام للخلايا لمستخلص كوتينوس كوجيغريا، على خط خلايا سرطان الكبد Hep3B. أبحاث المنتجات الطبيعية، 2022: ص 1-4.
  4. Kusakabe, S., وآخرون، يشارك USP15 في انتشار فيروس التهاب الكبد C من خلال تنظيم ترجمة الحمض النووي الريبي الفيروسي وتكوين قطرات الدهون. مجلة علم الفيروسات، 2019. 93(6): p. 10.1128/jvi. 01708-18.

لقد اكتشفنا أنك في بلد مختلف أو أنك تستخدم لغة متصفح مختلفة عن اللغة المحددة حاليًا. هل ترغب في قبول الإعدادات المقترحة؟

إغلاق