سلسلة الخلايا HT22
HT22 هو خط خلايا عصبية فئرانية يستخدم بشكل شائع في أبحاث علم الأعصاب. وهو ذو قيمة كبيرة في دراسة الاضطرابات العصبية التنكسية واختبار العلاجات أو العلاجات المحتملة لحماية الأعصاب. إلى جانب ذلك، فإن خلايا HT22 حساسة للجلوتامات، وبالتالي تُستخدم لدراسة السمية التي يسببها الجلوتامات أو تلف الخلايا العصبية.
- وسط النمو
- يُستخدم وسط DMEM لزراعة خلايا HT22. ويُضاف إليه 10% من مصل الأجنة البقري (FBS)، و4.5 جم/لتر من الجلوكوز، و4 مليمولار من L-جلوتامين، و1.5 جم/لتر من NaHCO3، و1.0 مليمولار من بيروفات الصوديوم لتحقيق النمو الأمثل للخلايا.
- وقت التضاعف
- يبلغ وقت تضاعف خلايا HT22 حوالي 15 ساعة.
- نوع النمو
- خلايا HT22 ملتصقة.
- مستوى السلامة الحيوية
- BSL-1
- متوفرة من
- Cytion — طلب HT22
تسلط هذه المقالة الضوء على الجوانب الأساسية لخلايا HT22 التي يمكن أن تساعدك في عملك البحثي. وستناقش بشكل أساسي:
- الخصائص العامة وأصل خلايا HT22
- معلومات حول زراعة خط الخلايا HT22
- مزايا وعيوب خط الخلايا HT22
- التطبيقات البحثية لسلسلة خلايا HT22
- المنشورات البحثية التي تتناول خلايا HT22
- موارد خلايا HT22: بروتوكولات ومقاطع فيديو والمزيد
الخصائص العامة وأصل خلايا HT22
سيُسلط هذا القسم من المقال الضوء على أصل خلايا HT22 وخصائصها العامة. من الضروري معرفة هذه المعلومات عن خط الخلايا قبل البدء في العمل عليه. هنا، ستتعرف على: ما هي خلايا HT22؟ ما هي مورفولوجيا خلايا الحصين HT22؟ ما هو حجم خلايا HT22؟
HT22 هو خط خلوي مستمر مشتق من منطقة الحصين في دماغ الفأر. وهو نسخة فرعية من خط الخلايا الأصلي HT-4 الذي تم تطويره عن طريق إضفاء الخلود على أنسجة عصبية فئرانية عبر مستضد T لفيروس بوليومافيروس 40 (SV40) الحساس للحرارة.
تختلف هذه الخلايا عن خلايا الحصين الناضجة لأنها تفتقر إلى مستقبلات الغلوتامات والكولين مثل الخلايا العصبية الناضجة التي تنشأ من الحصين. وبالتالي، فهي غير مناسبة للدراسات البحثية المتعلقة بالذاكرة [1].
تتميز خلايا HT22 بمظهر يشبه الخلايا الظهارية.
معلومات حول زراعة خط الخلايا HT22
تُستخدم خلايا HT22 في مختبرات أبحاث علم الأعصاب. قبل زراعة هذه الخلايا، يبحث الباحثون عن المعلومات الأساسية الخاصة بزراعة الخلايا التي تجعل عملهم سهلاً وفعالاً. يغطي هذا القسم جميع النقاط الرئيسية لزراعة خلايا HT22. ستتعرف على: ما هو وقت تضاعف خلايا HT22؟ كيف تزرع خلايا HT22؟ ما هو بروتوكول زراعة خلايا HT22؟ ما هي وسط زراعة خلايا HT22؟
النقاط الرئيسية لزراعة خلايا HT22
زمن التضاعف:
يبلغ وقت تضاعف خلايا HT22 حوالي 15 ساعة.
الالتصاق أو التعليق:
خلايا HT22 ملتصقة.
نسبة إعادة الاستزراع:
نسبة إعادة الاستزراع لخلايا الحصين HT22 هي 1:3 إلى 1:6. باختصار، تتم إزالة الوسط، ويتم شطف الخلايا الملتصقة بـ 1 x PBS. يُضاف محلول الفصل Accutase إلى القارورة، وتُحضن الخلايا لمدة 8 إلى 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة. بعد ذلك، تُضاف وسائط استزراع جديدة، وتُجمع الخلايا في قارورة للطرد المركزي. يُعاد تعليق حبيبات الخلايا التي تم الحصول عليها بعناية، وتُوزع الخلايا في قارورة استزراع للنمو.
وسط النمو:
يُستخدم وسط DMEM لزراعة خلايا HT22. ويُضاف إليه 10% FBS، و4.5 جم/لتر جلوكوز، و4 مليمول L-جلوتامين، و1.5 جم/لتر NaHCO3، و1.0 مليمول بيروفات الصوديوم لتحقيق النمو الأمثل للخلايا.
ظروف النمو:
يتم حفظ مزارع خلايا HT22 في حاضنة مرطبة (درجة حرارة 37 درجة مئوية) مع تزويدها بـ 5٪ من ثاني أكسيد الكربون.
التخزين:
يمكن تخزين خلايا HT22 المجمدة عند درجة حرارة أقل من -150 درجة مئوية إما في المرحلة البخارية للنيتروجين السائل أو في مجمد كهربائي ذي درجة حرارة منخفضة للغاية على المدى الطويل.
عملية التجميد والوسط:
يمكن تجميد خلايا HT22 في وسط CM-1 أو CM-ACF باستخدام طريقة التجميد البطيء. تسمح هذه العملية بانخفاض درجة حرارة العينة بمقدار 1 درجة مئوية فقط في الدقيقة، وتحمي الخلايا من الصدمة، وتساعد في الحفاظ على قابليتها للحياة.
عملية الذوبان:
يتم إذابة الخلايا في حمام مائي بدرجة حرارة 37 درجة مئوية لمدة 40 إلى 60 ثانية حتى يتبقى كتلة صغيرة من الجليد. بعد ذلك، تضاف وسائط الاستزراع إلى الخلايا، ويتم طردها مركزيًا لإزالة مكونات وسائط التجميد. يتم إعادة تعليق حبيبات الخلايا وتصب الخلايا في قارورة جديدة تحتوي على وسائط الاستزراع. بعد ذلك، تُحضَّن الخلايا عند درجة حرارة 37 درجة مئوية في حاضنة لمدة 24 ساعة على الأقل.
مستوى السلامة البيولوجية:
يجب توفير بيئة مختبرية بمستوى السلامة الحيوية 1 لزراعة خلايا HT22.
مزايا وعيوب خط الخلايا HT22
ترتبط خلايا الحصين HT22 ببعض الإيجابيات والسلبيات التي تميزها عن سلالات الخلايا العصبية الأخرى. وفيما يلي بعض المزايا والعيوب البارزة لسلالة الخلايا هذه.
المزايا
مزايا خط الخلايا العصبية الفئرانية HT22 هي:
-
معدل نمو سريع
يبلغ وقت تضاعف خلايا HT22 15 ساعة، مما يتيح إجراء التجارب بسرعة وكفاءة ويساعد في الحصول على نتائج بحثية في الوقت المناسب.
-
الخلود
HT22 هو خط خلايا خالدة، مما يضمن نموًا مستمرًا لفترات طويلة. وهذا يوفر توافرًا مستمرًا للخلايا، ويقلل من الوقت والتكلفة، ويسهل إجراء التجارب طويلة الأمد مع نتائج متسقة.
العيوب
عيوب خلايا HT22 هي:
-
الأصل الفئراني
تم اشتقاق خط الخلايا HT22 من أنسجة الحصين في دماغ الفئران، والتي قد لا تمثل بشكل كامل تعقيد فسيولوجيا وسلوك الخلايا العصبية البشرية، مما يحد من أهميتها التطبيقية.
4. تطبيقات خط الخلايا HT22 في الأبحاث
تُستخدم خلايا HT22 على نطاق واسع في أبحاث علم الأعصاب. وتناقش هذه الفقرة من المقالة بعض التطبيقات الواعدة لسلسلة الخلايا هذه:
- أبحاث علم الأعصاب: تُستخدم خلايا HT22 على نطاق واسع في أبحاث الأمراض العصبية التنكسية، مثل مرض الزهايمر ومرض باركنسون. وتُعتبر أداة بحثية قيّمة لدراسة آليات السمية العصبية والإجهاد التأكسدي المرتبطة بهذه الأمراض. وجدت الأبحاث التي أجريت في عام 2020 أن مسار PI3K/AKT/CREB يشارك في السمية العصبية الناتجة عن فرط سكر الدم في خلايا HT22 [2]. وبالمثل، اقترحت دراسة حديثة أن مسار Nrf2/HO‐1 ومحور إشارات NF-κB يلعبان دورًا مهمًا في سمية بيتا أميلويد HT22 [3].
- فحص الأدوية: تُستخدم خلايا HT22 على نطاق واسع لأغراض اختبار الأدوية وفحصها. فهي تساعد الباحثين على تحديد العوامل العلاجية المحتملة التي تظهر تأثيرات وقائية عصبية لمكافحة الأمراض العصبية التنكسية. استكشفت دراسة أجريت في عام 2019 الإمكانات الوقائية العصبية لمركب الكركمين رباعي الهيدرو في خلايا الحصين HT22 المعالجة بالجلوتامات. وفي هذا السياق، يسبب الجلوتامات إجهادًا تأكسديًا في خلايا HT22 ويؤدي إلى موت الخلايا عن طريق تنشيط بروتينات كينازات المنشطة بالميتوجين [4].
5. المنشورات البحثية التي تتناول خلايا HT22
فيما يلي بعض الأوراق البحثية المثيرة للاهتمام التي تتناول خط الخلايا HT22:
اقترحت هذه الدراسة المنشورة في المجلة الدولية للطب الجزيئي (2019) إمكانية الحماية العصبية للكروسين، وهو مركب معزول من نبات Crocus sativus L. في خلايا HT22 المتضررة من L-glutamate.
أفادت هذه الدراسة المنشورة في مجلة Neuropharmacology (2018) أن مشتقات الأوكسيندول تحمي من موت خلايا HT22 الناجم عن الإجهاد التأكسدي.
يمنع الجينسينوسيد Rb2 الإجهاد التأكسدي الذي يتوسطه الجلوتامات وموت الخلايا العصبية في خلايا HT22
نُشرت هذه الورقة البحثية في مجلة Journal of Ginseng Research في عام 2019. استكشفت هذه الدراسة الآثار الوقائية العصبية لمنتج طبيعي، وهو الجينسينوسيد Rb2، باستخدام خط الخلايا HT22. ووجدت الدراسة أن الجينسينوسيد Rb2 يقلل بشكل فعال من الإجهاد التأكسدي الناجم عن الغلوتامات وموت الخلايا في خلايا الحصين الفئرانية HT22.
قيمت هذه الدراسة المنشورة في مجلة Ecotoxicology and Environmental Safety (2021) الإمكانات السمية لجزيئات الفضة النانوية في خط الخلايا HT22.
يحمي فيروستاتين-1 خلايا HT-22 من السمية التأكسدية
نُشرت هذه المقالة البحثية في عام 2020 في مجلة Neural regeneration research. واقترحت أن الفيروستاتين-1، وهو مثبط للفيروبتوسيس، يمنع السمية التأكسدية في خلايا الحصين HT22.
موارد لخلايا HT22: بروتوكولات ومقاطع فيديو والمزيد
تشرح بعض الموارد المتاحة عبر الإنترنت حول خلايا HT22 بروتوكولات نقل الجينات والتمايز وزراعة الخلايا:
- نقل الجينات في HT22: يحتوي هذا المستند على بروتوكول محسّن لنقل الجينات في HT22 في لوحات زراعة الخلايا ذات 24 و96 حفرة.
- تمايز خلايا HT22: ستوجهك هذه المقالة بشكل شامل حول بروتوكول تمايز HT22.
يحتوي الرابط التالي على بروتوكول زراعة خلايا HT22:
- إعادة زراعة خلايا HT22: سيساعدك هذا الرابط على تعلم بروتوكول إعادة زراعة خط خلايا HT22. علاوة على ذلك، سيساعدك في تعلم بروتوكول تحفيز السمية العصبية في الخلايا.
- خلايا الحصين HT22: يحتوي هذا الموقع على الكثير من المعلومات المفيدة حول وقت مضاعفة خلايا HT22، والوسائط، وبروتوكولات زراعة الخلايا.
المراجع
- He, M., et al., Differentiation renders susceptibility to excitotoxicity in HT22 neurons. Neural Regen Res, 2013. 8(14): p. 1297-306.
- Zhang, S., et al., Fisetin prevents HT22 cells from high glucose-induced neurotoxicity via PI3K/Akt/CREB signaling pathway. Frontiers in Neuroscience, 2020. 14: p. 241.
- Zhang, R.-l., et al., الآثار الوقائية للبربيرين ضد السمية العصبية التي يسببها بيتا أميلويد في خلايا HT22 عبر مسار Nrf2/HO‐1. Bioorganic Chemistry, 2023. 133: ص. 106-210.
- Park, C.-H., et al., الآثار الوقائية العصبية للتتراهيدروكوركومين ضد الإجهاد التأكسدي الناجم عن الغلوتامات في خلايا HT22 في الحصين. Molecules, 2019. 25(1): p. 144.