خط خلايا HT22
HT22 هو سلالة خلايا عصبية من الفئران تُستخدم عادةً في أبحاث علم الأعصاب. وهي ذات قيمة لدراسة الاضطرابات العصبية التنكسية واختبار العلاجات أو العلاجات العصبية المحتملة. إلى جانب ذلك، فإن خلايا HT22 حساسة للغلوتامات، وبالتالي تُستخدم لدراسة السمية أو التلف العصبي الناجم عن الغلوتامات.
تسلط هذه المقالة الضوء على الجوانب الضرورية لخلايا HT22 التي يمكن أن تساعدك في عملك البحثي. وسيناقش بشكل أساسي:
- السمات العامة وأصل خلايا HT22
- معلومات عن زراعة خط خلايا HT22
- مزايا وعيوب خط خلايا HT22 الخلوية
- التطبيقات البحثية لخط خلايا HT22
- المنشورات البحثية التي تضم خلايا HT22
- الموارد الخاصة بخلايا HT22: البروتوكولات ومقاطع الفيديو والمزيد
1. السمات العامة وأصل خلايا HT22
سيلقي هذا القسم من المقالة الضوء على الأصل والخصائص العامة لخلايا HT22. من الضروري معرفة هذه المعلومات عن خط الخلية قبل بدء العمل عليها. هنا، سوف تتعلم ما هي خلايا HT22؟ ما هي مورفولوجيا خلايا HT22 الحصينية؟ ما هو حجم خلية HT22؟
HT22 هو خط خلوي مستمر مشتق من منطقة الحصين في دماغ الفأر. وهو استنساخ فرعي لخط الخلايا الأبوية HT-4 الذي تم تطويره عن طريق تخليد الأنسجة العصبية للفئران عن طريق مستضد فيروس سيميان 40 (SV40) T الحساس لدرجة الحرارة.
وتختلف هذه الخلايا عن خلايا الحصين الناضجة لأنها تفتقر إلى مستقبلات الغلوتامات والمستقبلات الكولينية مثل الخلايا العصبية الناضجة من أصل الحصين. وبالتالي، فهي غير مناسبة للدراسات البحثية المتعلقة بالذاكرة [1].
تتميز خلايا HT22 بمظهر شبيه بالخلايا الظهارية.
2. معلومات عن زراعة خط الخلايا HT22
تُستخدم خلايا HT22 في مختبرات أبحاث علم الأعصاب. قبل زراعة هذه الخلايا، يبحث الباحثون عن المعلومات الأساسية لزراعة الخلايا التي تجعل عملهم سهلاً وفعالاً. يغطي هذا القسم جميع النقاط الأساسية لزراعة خلايا HT22. ستعرف ما هو زمن مضاعفة خلايا HT22؟ كيف تزرع خلايا HT22؟ ما هو بروتوكول زراعة خلايا HT22؟ ما هي وسائط خلية HT22؟
النقاط الرئيسية لزراعة خلايا HT22
|
وقت المضاعفة: |
يبلغ وقت مضاعفة خلايا HT22 حوالي 15 ساعة. |
|
ملتصقة أو معلقة: |
خلايا HT22 ملتصقة. |
|
نسبة الزراعة الفرعية: |
نسبة الزراعة الفرعية لخلايا HT22 الحصين HT22 هي 1:3 إلى 1:6. باختصار، تتم إزالة الوسائط، ويتم شطف الخلايا الملتصقة ب 1 × PBS. يُضاف محلول تفكك الأكوتاز إلى القارورة، ويتم تحضين الخلايا لمدة 8 إلى 10 دقائق في درجة حرارة محيطة. بعد ذلك، تُضاف وسائط مستنبت جديدة، وتُجمع الخلايا في قارورة للطرد المركزي. يتم إعادة تعليق كريات الخلايا التي تم الحصول عليها بعناية، ويتم توزيع الخلايا في قارورة مزرعة للنمو. |
|
وسط النمو: |
يُستخدم وسط DMEM لزراعة خلايا HT22. يتم استكماله بنسبة 10% من FBS، و4.5 جم/لتر جلوكوز، و4 ملي مولار جلوتامين، و1.5 جم/لتر NaHCO3، و1.0 ملي مولار بيروفات الصوديوم لنمو الخلايا على النحو الأمثل. |
|
ظروف النمو: |
يتم الاحتفاظ بمزارع خلايا HT22 في حاضنة مرطبة (درجة حرارة 37 درجة مئوية) معإمداد بنسبة 5% من ثاني أكسيد الكربون. |
|
التخزين: |
يمكن تخزين خلايا HT22 المجمدة في درجة حرارة أقل من -150 درجة مئوية إما في مرحلة بخار النيتروجين السائل أو في مجمد كهربائي بدرجة حرارة منخفضة للغاية على المدى الطويل. |
|
عملية التجميد والوسط: |
يمكن تجميد خلايا HT22 في وسط CM-1 أو CM-ACF باستخدام طريقة التجميد البطيء. تسمح هذه العملية بانخفاض درجة حرارة العينة بمقدار 1 درجة مئوية فقط في الدقيقة الواحدة، وتحمي الخلايا من الصدمة، وتساعد في الحفاظ على قابليتها للحياة. |
|
عملية الإذابة: |
يتم إذابة الخلايا في حمام مائي بدرجة حرارة 37 درجة مئوية لمدة 40 إلى 60 ثانية حتى يتبقى كتلة ثلج صغيرة. بعد ذلك، يتم إضافة وسائط الاستزراع إلى الخلايا، ويتم طردها مركزيًا للتخلص من مكونات وسائط التجميد. يُعاد تعليق كريات الخلايا وتُسكب الخلايا في القارورة الجديدة التي تحتوي على وسائط الاستزراع. بعد ذلك، يتم تحضين الخلايا عند درجة حرارة 37 درجة مئوية في حاضنة لمدة 24 ساعة على الأقل. |
|
مستوى السلامة البيولوجية: |
إعدادات مختبر مستوى السلامة البيولوجية 1 إلزامية لزراعة خلايا HT22. |
3. مزايا وعيوب خط خلايا HT22 الخلوية
ترتبط خلايا الحصين HT22 ببعض المزايا والعيوب التي تميزها عن خطوط الخلايا العصبية الأخرى. نذكر هنا بعض المزايا والعيوب البارزة لخط الخلايا.
المزايا
مزايا سلالة الخلايا العصبية للفئران HT22 هي
-
معدل النمو السريع
تتمتع خلايا HT22 بوقت مضاعفة يبلغ 15 ساعة، مما يتيح إجراء تجارب سريعة وفعالة ويساعد في تحقيق نتائج بحثية في الوقت المناسب.
-
الخلود
HT22 هو خط خلوي غير قابل للخلود، مما يضمن نمواً مستمراً لفترات طويلة. وهذا يوفر توافر الخلايا بشكل ثابت، ويقلل الوقت والتكلفة، ويسهل إجراء تجارب طويلة الأمد مع نتائج متسقة.
العيوب
عيوب خلايا HT22 هي:
-
أصل الفئران
تم اشتقاق سلالة خلايا HT22 من نسيج الحصين في دماغ الفأر، والتي قد لا تمثل بشكل كامل تعقيد فسيولوجيا الخلايا العصبية البشرية وسلوكها، مما يحد من أهميتها الانتقالية.
4- التطبيقات البحثية لخط خلايا HT22
تُستخدم خلايا HT22 على نطاق واسع في أبحاث البيولوجيا العصبية. تتم مناقشة بعض التطبيقات الواعدة لهذا الخط الخلوي في هذا القسم من المقالة:
- أبحاث علم الأعصاب: تستخدم خلايا HT22 على نطاق واسع في أبحاث الأمراض العصبية التنكسية، أي مرض الزهايمر ومرض باركنسون. وتُعتبر هذه الخلايا أداة بحثية قيّمة لدراسة السمية العصبية وآليات الإجهاد التأكسدي المتعلقة بهذه الأمراض. وجدت الأبحاث التي أُجريت في عام 2020 أن مسار PI3K/AKT/CREB متورط في السمية العصبية الناجمة عن ارتفاع السكر في الدم في خلايا HT22 [2]. وبالمثل، اقترحت دراسة حديثة أن مسار Nrf2/HO-1 ومحور الإشارات NF-κB يلعبان دورًا مهمًا في سمية بيتا النشواني أميلويد HT22 [3].
- فحص الأدوية: تُستخدم خلايا HT22 على نطاق واسع لأغراض اختبار الأدوية وفحصها. فهي تساعد الباحثين في تحديد العوامل العلاجية المحتملة التي تُظهر تأثيرات وقائية عصبية لمكافحة الأمراض العصبية التنكسية. استكشفت دراسة أُجريت في عام 2019 الإمكانات الوقائية العصبية لمركب الكركمين رباعي الهيدرو في خلايا الحصين HT22 المعالجة بالغلوتامات. في هذه الدراسة، يحفز الغلوتامات الإجهاد التأكسدي في خلايا HT22 ويسبب موت الخلايا عن طريق تنشيط كينازات البروتين المنشط بالميتوجين [4].
5. المنشورات البحثية التي تضم خلايا HT22
فيما يلي بعض الأوراق البحثية المثيرة للاهتمام التي تضم خط خلايا HT22:
اقترحت هذه الدراسة المنشورة في المجلة الدولية للطب الجزيئي (2019) إمكانية الحماية العصبية للكروسين، وهو مركب معزول من نبات الزعفران ساتيفوس ل. فيخلايا HT22التالفة بالغلوتاماتL-الغلوتامات.
مشتقات الأوكسيندول الجديدة تمنع موت الخلايا الناجم عن الإجهاد التأكسدي في خلايا الفأر HT22
أفاد هذا المنشور في مجلة Neuropharmacology (2018) أن مشتقات الأوكسيندول تحمي من موت خلايا HT22 الناجم عن الإجهاد التأكسدي.
يثبط الجينسينوسيد Rb2 الإجهاد التأكسدي بوساطة الغلوتامات وموت الخلايا العصبية في خلايا HT22
نُشرت هذه الورقة البحثية في مجلة أبحاث الجينسنغ في عام 2019. استكشفت هذه الدراسة التأثيرات الوقائية العصبية لمنتج طبيعي، الجينسنوسيد Rb2، باستخدام خط خلايا HT22. ووجدت الدراسة أن الجينسينوسيد Rb2 قلل بكفاءة من الإجهاد التأكسدي الناجم عن الغلوتامات وموت الخلايا في خلايا الفئران الحصين HT22.
قيمت هذه الدراسة في مجلة علم السموم البيئية والسلامة البيئية (2021) القدرة السامة للخلايا للجسيمات النانوية الفضية في خط خلايا HT22.
يحمي فيروستاتين-1 خلايا HT-22 من السمية التأكسدية
نُشرت هذه المقالة البحثية في عام 2020 في أبحاث التجديد العصبي. واقترحت أن فيروستاتين-1، وهو مثبط للفيروستاتين 1، يمنع السمية التأكسدية في خلايا الحصين HT22.
6. مصادر لخلايا HT22: البروتوكولات ومقاطع الفيديو والمزيد
تشرح بعض المصادر على الإنترنت عن خلايا HT22 بروتوكولات نقل الخلايا وتمايزها وزراعة الخلايا:
- نقل خلايا HT22: يحتوي هذا المستند على بروتوكول محسّن لنقل خلايا HT22 في ألواح مزرعة الخلايا ذات 24 و96 خلية.
- تمايز خلايا HT22: سترشدك هذه المقالة بشكل شامل حول بروتوكول تمايز HT22.
يحتوي الرابط التالي على بروتوكول زراعة خلايا HT22:
- الزراعة الفرعية لخلايا HT22: سيساعدك هذا الرابط في معرفة بروتوكول الزراعة الفرعية لخط خلايا HT22. علاوة على ذلك، سيساعدك في تعلم بروتوكول تحفيز السمية العصبية في الخلايا.
- خلايا الحصين HT22 يحتوي هذا الموقع الإلكتروني على الكثير من المعلومات المفيدة حول وقت مضاعفة خلية HT22، والوسائط، وبروتوكولات زراعة الخلايا.
المراجع
- هي، م. وآخرون، التمايز يجعل القابلية للتعرض للسمية المثيرة في الخلايا العصبية HT22. Neural Regen Res، 2013. 8(14): p. 1297-306.
- Zhang, S., et al., Fisetin يمنع خلايا HT22 من السمية العصبية الناجمة عن ارتفاع الجلوكوز عبر مسار إشارات PI3K/Akt/CREB. Frontiers in Neuroscience, 2020. 14: p. 241.
- Zhang, R.-l., et al., التأثيرات الوقائية للبربرين ضد السمية العصبية التي يسببها بيتا أميلويد في خلايا HT22 عبر مسار Nrf2/HO-1. الكيمياء العضوية الحيوية، 2023. 133: p. 106-210.
- Park, C.-H., et al., التأثيرات الوقائية العصبية لرباعي هيدروكوركومين ضد الإجهاد التأكسدي الناجم عن الغلوتامات في خلايا HT22 الحصين. الجزيئات، 2019. 25(1): p. 144.