خلايا HL-60: أساسيات أبحاث سرطان الدم النخاعي الحاد
HL-60 هي سلالة خلايا سرطان الدم البشرية الخالدة. وهي تستخدم على نطاق واسع لدراسة بيولوجيا السرطان واستكشاف فعالية الأدوية المضادة للسرطان. علاوة على ذلك، يمكن استخدامها أيضًا لفهم الآليات الخلوية والجزيئية المختلفة المشاركة في تكاثر خلايا سرطان الدم وتمايزها.
- وسط النمو
- انظر صفحة المنتج
- وقت التضاعف
- انظر صفحة المنتج
- نوع النمو
- ملتصق
- مستوى السلامة الحيوية
- BSL-1
- متوفر من
- Cytion — طلب HL-60
- سلسلة الخلايا HL-60: الأصل والمعلومات العامة
- معلومات عن زراعة خلايا HL-60
- خلايا HL-60: المزايا والعيوب
- تطبيقات خط الخلايا HL-60 في الأبحاث: من السرطان إلى علم المناعة وما بعده
- سلسلة الخلايا HL-60 لأبحاثك
- خلايا HL-60: المنشورات البحثية
- موارد خط الخلايا HL-60: البروتوكولات ومقاطع الفيديو والمزيد
- سلسلة خلايا HL-60: الأسئلة الشائعة الأساسية للباحثين
- المراجع
- الأسئلة المتكررة
سلسلة خلايا HL-60: الأصل والمعلومات العامة
يُعد خط الخلايا HL-60 نموذجًا مهمًا في أبحاث أمراض الدم، حيث يوفر رؤى عميقة حول طبيعة وعلاج سرطان الدم النقوي الحاد. تتعمق هذه المدونة في أصول وخصائص خط الخلايا HL-60، وتسلط الضوء على دوره الحاسم في الأبحاث الطبية والتطورات العلاجية.
تم إنشاء خط الخلايا HL-60 لأول مرة من خلايا سرطانية لامرأة قوقازية تبلغ من العمر 36 عامًا تم تشخيصها بسرطان الدم النقوي الحاد. أجرى هذا العمل الرائد S.J. Collins وفريقه، مما شكل إنجازًا هامًا حيث كان HL-60 أول خط خلوي لسرطان الدم النخاعي يتم عزله وزراعته بنجاح في المعلق. وقد سهّل هذا الإنجاز العديد من فرص البحث في دراسة سرطان الدم والأمراض الأخرى ذات الصلة. من حيث الخصائص الفيزيائية، تُظهر خلايا HL-60 مورفولوجية ليمفاوية، ومن المعروف أنها تنمو في المعلق، وتظهر بشكل دائري. يختلف حجم هذه الخلايا، حيث يتراوح قطرها بين 9 و25 ميكرومتر، مما يعكس عدم تجانسها. على المستوى الجينومي، فإن خط الخلايا HL-60 هو في الغالب شبه ثنائي الصبغيات، مع عدد كروموسومات نموذجي يبلغ 43. ومن المثير للاهتمام أن نسبة صغيرة (6.2٪) من الخلايا تظهر مكون 2S، مما يضيف طبقة أخرى من التعقيد إلى تركيبتها الجينية [1].
إن فهم هذه الجوانب الأساسية لخلايا HL-60 لا يعزز معرفتنا باللوكيميا على المستوى الخلوي فحسب، بل يدعم أيضًا الجهود البحثية الجارية لاكتشاف طرق علاج جديدة. في الأقسام التالية، سوف نستكشف كيف ساهمت الخصائص الفريدة لسلسلة خلايا HL-60 في تحقيق تقدم كبير في مجال البحوث الطبية.
معلومات حول زراعة خلايا HL-60
زراعة خلايا HL-60 بسيطة وسهلة. سيطلعك هذا القسم على الأساسيات مثل: ما هو وقت مضاعفة خط الخلايا HL-60؟ هل زراعة خلايا HL-60 هي زراعة ملتصقة أم معلقة؟ ما هي كثافة بذر خط الخلايا HL-60؟ ما هي الوسط المستخدم لنمو HL-60؟
زمن التضاعف:
يبلغ وقت التضاعف لخلايا HL-60 حوالي 36 إلى 48 ساعة.
ملتصقة أم معلقة:
تنمو خلايا HL-60 في مزارع معلقة.
كثافة البذر:
تُزرع هذه الخلايا بكثافة 1 × 106 خلية/مل عند إعادة زراعتها، وبكثافة 2 × 105 خلية/مل عند بدء مزرعة جديدة.
وسط النمو:
يُستخدم وسط النمو RPMI 1640 المضاف إليه 10٪ FBS و 2.5 مليمول L-glutamine لزراعة خلايا HL-60. يجب تجديد الوسط 2 إلى 3 مرات في الأسبوع.
ظروف النمو:
تُزرع خلايا HL-60 في حاضنة مرطبة عند درجة حرارة 37 درجة مئوية وبتزويد بنسبة 5٪ من ثاني أكسيد الكربون.
التخزين:
يتم تخزين خلايا HL-60 عند درجة حرارة أقل من -150 درجة مئوية أو في المرحلة البخارية من النيتروجين السائل للحفاظ على أكبر عدد ممكن من الخلايا الحية.
وسط التجميد وعملية التجميد:
تُستخدم وسائط التجميد CM-1 أو CM-ACF لتجميد خلايا HL-60. يُفضل استخدام طريقة التجميد البطيء لتجميد خلايا HL-60.
عملية الذوبان:
يتم تقليب قارورة خلايا HL-60 المجمدة بسرعة في حمام مائي مضبوط على درجة حرارة 37 درجة مئوية. بعد ذلك، يتم طرد الخلايا لإزالة وسائط التجميد. تضاف وسائط استزراع جديدة، ويتم إعادة تعليق الخلايا لتوزيعها في قارورة للنمو.
مستوى السلامة الحيوية:
يوصى بمستوى السلامة البيولوجية 1 للتعامل مع مزارع HL-60.
خلايا HL-60: المزايا والعيوب
قبل العمل مع أي خط خلوي، قد ترغب في معرفة مزاياه وعيوبه. سيتناول هذا القسم من المقال بعض إيجابيات وسلبيات استخدام خلايا HL-60.
المزايا
فيما يلي بعض المزايا البارزة لسلسلة الخلايا HL-60:
- تعدد الاستخدامات: تتمتع خلايا HL-60 بالقدرة على التمايز إلى أنواع خلوية متعددة، بما في ذلك الخلايا الأحادية والضامة والحبيبية، في ظل ظروف نمو مناسبة. وهذا يجعلها مفيدة لدراسة التمايز الخلوي والعمليات الخلوية الأخرى.
- سهولة الاستزراع: من السهل زراعة خلايا HL-60 والحفاظ عليها في مزارع معلقة، مما يجعلها أداة ملائمة لدراسة العديد من العمليات الخلوية.
- نموذج مختبري لسرطان الدم: تم الحصول على هذه الخلايا من مريض مصاب بسرطان الدم النخاعي الحاد، وبالتالي فهي تتمتع بخصائص وراثية وجزيئية مشابهة للمرض.
العيوب
عيوب خط الخلايا HL-60 هي:
- قدرة تمايز محدودة: يمكن لخلايا HL-60 أن تتمايز إلى بعض السلالات النخاعية استجابة للمحفزات، لكن قدرتها على التمايز محدودة مقارنة بالخلايا الأولية.
تطبيقات خط الخلايا HL-60 في الأبحاث: من السرطان إلى علم المناعة وما بعده
أصبح خط الخلايا HL-60، المستمد من مريض مصاب بسرطان الدم النقوي الحاد، حجر الزاوية في الأبحاث الطبية نظرًا لتعدد استخداماته وسهولة زراعته. تعد هذه المزارع التي تتطلب صيانة قليلة محورية في عدد لا يحصى من تطبيقات البحث، ونهدف إلى استكشاف بعض أهمها، مع تضمين مجموعة واسعة من الكلمات المفتاحية البحثية لتقديم نظرة عامة شاملة.
أبحاث السرطان
في مجال علم الأورام، كان خط الخلايا HL-60 أساسيًا في كشف تعقيدات إشارات الخلايا السرطانية، وتعزيز فهمنا لتعبير الجينات المسرطنة، ودفع اكتشاف أهداف علاجية جديدة. يشكل خط الخلايا هذا جزءًا من مجموعة خطوط خلايا اللوكيميا المستخدمة لفحص عوامل العلاج الكيميائي الجديدة. ومن الأمثلة البارزة على ذلك استخدام خلايا HL-60 للتأكد من الخصائص المضادة للسرطان في المركبات المستخلصة من الكائنات البحرية، مما كشف عن تأثيرات مضادة للتكاثر ومحفزة للاستماتة [2]. علاوة على ذلك، سهّل خط الخلايا هذا فحص مسارات الإشارات المحورية مثل JAK/STAT وتأثيرها على تكاثر خلايا اللوكيميا، إلى جانب تقييم الإمكانات العلاجية للمركبات النشطة بيولوجيًا مثل الثيموكينون [3].
علم المناعة
تعد خلايا HL-60 نظامًا قويًا في المختبر لاستكشاف الاستجابات المناعية المختلفة، بما في ذلك العملية المعقدة للكيميائي والتحكم في التعبير عن الوسطاء المناعيين الرئيسيين. يمكن لهذه الخلايا أن تتمايز إلى خلايا نخاعية شبيهة بالبلاعم والعدلات، مما يجعلها نموذجًا متعدد الاستخدامات لدراسة مسارات الالتهاب. على سبيل المثال، تم استخدام خلايا شبيهة بالبلاعم مشتقة من HL-60 لاستكشاف الإمكانات المضادة للالتهابات للمركبات الكيميائية النباتية من جنس Brassica [4]. وفي دراسة أخرى، مكن تمايز خلايا HL-60 إلى خلايا شبيهة بالعدلات الباحثين من تحديد الجينات المحورية للتمايز الخلوي والوظائف المناعية ذات الصلة [5].
اكتشاف الأدوية
كما تم الاستفادة من قدرات التمايز النخاعي لـ HL-60 في اكتشاف الأدوية، لا سيما في تحديد المرشحين الذين يمكنهم تعديل مسار التمايز، وهو أمر بالغ الأهمية في علاج اللوكيميا. ويتجلى ذلك في الدراسات التي استخدمت خط الخلايا HL-60 لتقييم الإمكانات المضادة للسرطان للمنتجات الطبيعية [6].
بالإضافة إلى ذلك، تُستخدم سلالة الخلايا HL-60 لدراسة جوانب مختلفة من بيولوجيا سلالات الخلايا النخاعية، مثل فهم كيفية تأثير العلاج بعوامل مثل حمض الريتينويك في التمايز أحادي الخلايا، أو كيفية محاكاة هذه الخلايا للعدلات الأولية في تكوين مصائد خارج الخلية. وقد تم توسيع نطاق استخدام هذا النموذج في توضيح الأحداث الجزيئية للأورام الخبيثة الدموية من خلال تطبيقه في دراسات لوحة الخلايا المتحولة، لا سيما في سياق تحليل النقاط الساخنة لـ p53 في سرطان الدم.
بالنسبة لأولئك الذين يستكشفون آليات الخلايا، ووقت تضاعف HL-60، واستجابتها للكهرباء في القنوات الميكروفلويديكية، يوفر خط الخلايا منصة موثوقة للبحث.
سلسلة الخلايا HL-60 لأبحاثك
خلايا HL-60: المنشورات البحثية
تتوفر العديد من الدراسات البحثية حول خلايا HL-60. وفيما يلي قائمة ببعض الأمثلة البارزة:
اقترحت هذه الورقة البحثية التأثير المضاد للأورام لمركب Stigmast-5-en-3-ol على خلايا سرطان الدم HL-60 وخلايا سرطان الثدي MCF7.
تصف هذه الدراسة دور إشارات JAK/STAT في تكاثر خلايا HL-60. بالإضافة إلى ذلك، يبحث الباحثون في الإمكانات العلاجية لمركب الثيموكينون باستخدام خط الخلايا السرطانية هذا. يثبط المركب تكاثر الخلايا ويحفز موت الخلايا عن طريق إحياء التعبير عن المنظمات السلبية لسلسلة JAK/STAT.
استخدمت هذه الدراسة خلايا HL-60 لاشتقاق نموذج خلية شبيهة بالبلاعم من خلال دراسة النشاط المضاد للالتهابات لمركبات نبات البراسيكا.
طورت هذه الدراسة، التي نُشرت في مجلة International Immunopharmacology، خلايا تشبه الخلايا العدلات من سلالة خلايا HL-60 باستخدام ثنائي ميثيل سلفوكسيد. لاحظت الدراسة أن جين ERK يشارك في تمايز هذه الخلايا.
تبحث هذه الورقة البحثية في الإمكانات المضادة للسرطان لمركبات البوليفينول النباتية، أي حمض الغاليك وحمض الإيلاجيك، على خلايا سرطان الدم HL-60 الحساسة والمقاومة للأدوية.
سلسلة خلايا HL-60 الموارد: البروتوكولات والفيديوهات والمزيد
تتوفر العديد من الموارد التعليمية عبر الإنترنت حول خط الخلايا HL-60. سيغطي هذا القسم بعض الموارد التي تصف زراعة هذا الخط الخلوي وتحويله.
بروتوكولات زراعة الخلايا
الموارد التي تصف طرق زراعة خلايا HL-60 هي:
- تكاثر HL-60: سيوفر هذا المستند معلومات حول إعادة زراعة خلايا HL-60.
- سلسلة الخلايا HL-60: يحتوي هذا الموقع على المعلومات الأساسية عن خلايا HL-60 والبروتوكولات، بما في ذلك زراعة الخلايا وتجميدها وإذابتها.
بروتوكولات التحويل الجيني
فيما يلي بعض الموارد التي تصف طرق النقل الجيني المختارة لخلايا HL-60.
- نقل الجينات لخلايا HL-60: يحتوي هذا الرابط على إجراءات مفصلة لنقل الجينات لخلايا سرطان الدم HL-60.
- النقل المؤقت لخلايا HL-60: يحتوي هذا المستند على معلومات مفيدة حول خط الخلايا ويقدم بروتوكولًا مفصلاً للنقل المؤقت لخلايا HL-60.
مقاطع فيديو متعلقة بسلالة الخلايا HL-60
تتوفر موارد فيديو محدودة للغاية عن خلايا HL-60.
- تربية خلايا HL-60: يشرح هذا الفيديو بروتوكول إعادة تربية خلايا HL-60.
نتوقع أن يوفر لك هذا المقال معلومات أساسية حول زراعة خط الخلايا HL-60 والحفاظ عليه. بالإضافة إلى ذلك، يمكن أن يعزز معرفتك بمزايا استخدام خلايا اللوكيميا هذه في الأبحاث. إذا كنت تخطط لاستخدام خط الخلايا هذا، فاطلبه منا.
سلسلة الخلايا HL-60: أسئلة وأجوبة أساسية للباحثين
سلسلة الخلايا HL-60 هي سلسلة خلايا لسرطان الدم النخاعي الأولي مستمدة من مريض مصاب بسرطان الدم النخاعي الأولي الحاد. وتُستخدم هذه السلسلة على نطاق واسع في الأبحاث لدراسة تمايز الخلايا النخاعية وتعبير الجينات المسرطنة.
يحفز حمض الريتينويك عملية التمايز في خط الخلايا HL-60، مما يدفع الخلايا إلى النضوج لتصبح خلايا شبيهة بالخلايا الحبيبية. وتعد هذه العملية بالغة الأهمية لدراسة الآليات الكامنة وراء التمايز النخاعي.
يُعد المصل مكونًا أساسيًا في وسط زراعة الخلايا المكونة للدم، حيث يوفر عوامل النمو والمغذيات الأساسية اللازمة لتكاثر خلايا HL-60 والحفاظ عليها في المزرعة.
نعم، يمكن لسلسلة الخلايا HL-60 أن تخضع لعملية الكيميائي التوجه، وهي حركة الخلايا استجابةً لمحفزات كيميائية. وهذا يجعلها مفيدة في اختبارات الكيميائي التوجه وفهم هجرة الخلايا.
يُعد خط الخلايا HL60، الذي يُظهر تعبيرًا جينيًا للأونكوجينات الخلوية، نظامًا نموذجيًا لاستكشاف آليات تنظيم تعبير الأونكوجينات ودورها في تكوّن اللوكيميا.
يُعد خط الخلايا HL-60 أداة لا غنى عنها في دراسات بيولوجيا الخلية، لا سيما في دراسة دورة الخلية وعمليات التمايز الخلوي والأحداث الجزيئية التي تؤدي إلى الإصابة باللوكيميا.
تتيح مجموعات سلالات الخلايا اللوكيمية إجراء دراسات مقارنة بين مختلف سلالات الخلايا اللوكيمية، بما في ذلك تركيبها الجيني، وخصائص الطفرات، واستجابتها للأدوية، والمسارات الجزيئية المرتبطة بتكوين اللوكيميا، مثل مسار MAPK.
يمكن عادةً تنزيل شهادات التحليل وشهادات المنشأ أو طلبها من المورد أو المستودع الذي يوفر خط الخلايا HL-60، مما يضمن حصول الباحثين على خلايا موثقة وخالية من الملوثات لاستخدامها في أبحاثهم.
يمكن تحفيز خط الخلايا HL-60 ليتخذ خصائص مشابهة لخصائص العدلات الأولية، بما في ذلك القدرة على تكوين مصائد خارج الخلية، مما يتيح للباحثين استخدامها كنموذج بديل لدراسة سلوك العدلات ووظائفها.
تُستخدم خلايا HL-60 كنموذج مختبري لدراسة سرطان الدم النقوي الحاد، وبيولوجيا سلالات الخلايا النقوية، وتأثيرات المركبات المختلفة على التمايز والتكاثر. كما تُستخدم في التجارب التي تبحث في الاستجابات الخلوية مثل الكيميائي التوجه، وتعبير الجينات المسرطنة، وتأثير الطفرات على العمليات الخلوية.
يشير الاختصار "HL-60" إلى "سرطان الدم البشري 60". وهو يشير إلى السلالة الخلوية رقم 60 التي تم إنشاؤها من مرضى سرطان الدم وقت تطويرها. ويشير الحرفان "HL" إلى التركيز على خلايا سرطان الدم البشري.
يبلغ زمن التضاعف لخلايا HL-60 ما بين 36 و48 ساعة تقريبًا في ظل ظروف النمو المثلى. ومع ذلك، قد يختلف هذا الزمن تبعًا لظروف الاستزراع وعدد مرات تمرير الخلايا.
عندما تُعالج خلايا HL-60 بـ«فوربول 12-ميريستات 13-أسيتات» (PMA)، فإنها عادةً ما تتمايز إلى نوع من الخلايا يشبه البلاعم أو الخلايا الأحادية. ويُعد هذا التمايز جزءًا من دراسة مسارات تمايز الخلايا الأحادية وفهم آليات تمايز الخلايا النخاعية.
المراجع
- Fleck, R., S. Romero-Steiner, and M. Nahm, Use of HL-60 cell line to measure opsonic capacity of pneumococcal antibodies. Clinical and Vaccine Immunology, 2005. 12(1): p. 19-27.
- Fernando, I.S., et al., الآثار المسببة للاستماتة والمضادة للتكاثر لـ Stigmast-5-en-3-ol من Dendronephthya gigantea على خلايا سرطان الدم البشري HL-60 وخلايا سرطان الثدي البشري MCF-7. علم السموم في المختبر، 2018. 52: ص. 297-305.
- Almajali, B., et al., يثبط الثيموكينون تكاثر الخلايا ويعزز موت الخلايا المبرمج لخلايا سرطان الدم HL60 من خلال إعادة التعبير عن المنظمات السلبية لـ JAK/STAT. مجلة آسيا والمحيط الهادئ للوقاية من السرطان: APJCP, 2021. 22(3): ص. 879.
- Ruiz-Alcaraz, A.J., et al., تحليل الإمكانات المضادة للالتهابات للمركبات النشطة بيولوجيًا في نبات البراسيكا في نموذج خلايا شبيهة بالبلاعم البشرية مشتقة من خلايا HL-60. الطب الحيوي والعلاج الدوائي، 2022. 149: ص. 112804.
- Wang, D., et al., يشارك ERK في تمايز ووظيفة الخلايا الشبيهة بالعدلات HL-60 المستحثة بثنائي ميثيل سلفوكسيد، والتي تحاكي العدلات الالتهابية. International Immunopharmacology, 2020. 84: p. 106510.
- Núñez-Sánchez, M.Á., et al., النشاط المضاد للسرطان في المركبات النشطة بيولوجيًا المشتقة من نبات البراسيكا في خلايا سرطان الدم النخاعي HL-60. International Journal of Molecular Sciences, 2022. 23(21): p. 13400.