خلايا AGS - استكشاف خلايا AGS لسرطان الغدة المعدية في دراسات السرطان
تشكل خلايا AGS خط خلايا سرطان الغدة المعدية البشري الذي يستخدم على نطاق واسع في الأبحاث الطبية الحيوية. وتستخدم بشكل خاص لدراسة بيولوجيا سرطان المعدة بما في ذلك نمو الورم وتطوره وتقدمه والتدخلات العلاجية. بالإضافة إلى ذلك، تُستخدم لدراسة التفاعلات بين المضيف والممرض.
- وسط النمو
- تُستخدم وسط DMEM الذي يحتوي على 10٪ FBS، و4 مليمول L-Glutamine، و4.5 جم/لتر جلوكوز، و1.5 جم/لتر NaHCO3، و1.0 مليمول بيروفات الصوديوم لزراعة خلايا AGS. يجب استبدال الوسط 2 إلى 3 مرات في الأسبوع.
- وقت التضاعف
- يتراوح وقت تضاعف خلايا AGS بين 24 و48 ساعة.
- نوع النمو
- خلايا AGS ملتصقة. تنمو في طبقات أحادية.
- مستوى السلامة الحيوية
- BSL-2
- متوفر من
- Cytion — طلب AGS
الخصائص العامة وأصل خلايا AGS
من الضروري معرفة أصل خط الخلايا وخصائصه العامة قبل البدء في العمل به. سيغطي هذا القسم ما يلي: ما هي خلايا AGS؟ ما هو أصل خلية AGS؟ ما هي مورفولوجيا خط الخلايا السرطانية AGS؟
- تم اشتقاق خط الخلايا AGS من أنسجة المعدة لامرأة قوقازية تبلغ من العمر 54 عامًا مصابة بسرطان الغدة المعدية. تم عزلها في عام 1979 [1].
- تتميز خلايا AGS بمورفولوجيا شبيهة بالأنسجة الظهارية.
- خلايا AGS الظهارية المعدية هي خلايا مفرطة الصبغيات. العدد النموذجي للكروموسومات لخلايا AGS هو 49، وهو ما يحدث في ما يقرب من 60٪ من الخلايا. كما تحدث تعدد الصبغيات في حوالي 3.6٪ من الخلايا.
معلومات حول زراعة خط الخلايا AGS
من أجل التعامل مع خط الخلايا وإدارته بشكل سليم، يجب أن تعرف المفاهيم الأساسية لزراعته. وعلى وجه الخصوص، يجب أن تتعلم: ما هو زمن تضاعف خلايا AGS؟ ما هي وسط زراعة خلايا AGS؟ كيف يتم إعادة زراعة خلايا AGS؟ ما هي أوساط التجميد المستخدمة لخلايا AGS الظهارية المعدية؟
النقاط الرئيسية لزراعة خلايا AGS
زمن التضاعف:
يتراوح وقت تضاعف خلايا AGS بين 24 و48 ساعة.
الالتصاق أو التعليق:
خلايا AGS ملتصقة. تنمو في طبقات أحادية.
كثافة البذر:
تُزرع خلايا AGS بكثافة خلوية تبلغ 1 × 104 خلية/سم². تشكل الخلايا طبقة أحادية متلاصقة عند هذه الكثافة في غضون 3 إلى 5 أيام. بعد إزالة الوسط القديم، تُشطف الخلايا بـ 1 × PBS وتُحضن بمحلول تفكيك Accutase. أعيد تعليق الخلايا المنفصلة في وسط الاستزراع وتم طردها مركزيًا. أعيد تعليق حبيبات الخلايا مرة أخرى، وبعد عد خلايا AGS، يتم توزيعها في قارورة جديدة للنمو.
وسط النمو:
يتم استخدام وسط DMEM الذي يحتوي على 10٪ FBS، و4 مليمولار L-Glutamine، و4.5 جم/لتر جلوكوز، و1.5 جم/لتر NaHCO3، و1.0 مليمولار بيروفات الصوديوم لزراعة خلايا AGS. يجب استبدال الوسط 2 إلى 3 مرات في الأسبوع.
ظروف النمو:
يتم حفظ خلايا AGS في حاضنة مرطبة (عند درجة حرارة 37 درجة مئوية) مع تزويدها بـ 5٪ من ثاني أكسيد الكربون.
التخزين:
يتم حفظ خلايا AGS المجمدة في مجمدات كهربائية عند درجة حرارة أقل من -150 درجة مئوية أو في المرحلة البخارية من النيتروجين السائل لفترة أطول.
عملية التجميد والوسط:
يُستخدم وسط CM-1 أو CM-ACF لتجميد خلايا AGS. يتم تجميد الخلايا من خلال عملية تجميد بطيئة تسمح بانخفاض درجة الحرارة بمقدار 1 درجة مئوية فقط في الدقيقة وتحمي من قابلية الخلايا للحياة.
عملية الذوبان:
يتم تقليب الخلايا الظهارية المعدية المجمدة بسرعة في حمام مائي بدرجة حرارة 37 درجة مئوية لمدة 40 إلى 60 ثانية. يتم إعادة تعليق الخلايا المذابة في وسط استزراع جديد وتصب في قوارير جديدة للنمو. بعد 24 ساعة من الحضانة، يتم تجديد الوسط لإزالة مكونات وسط التجميد. على عكس ذلك، يتم طرد الخلايا المذابة، وإزالة عناصر وسط التجميد. ثم يتم إعادة تعليق الخلايا المجمعة وتوزيعها في القارورة التي تحتوي على وسط الاستزراع.
مستوى السلامة الحيوية:
تعد بيئة المختبر ذات مستوى السلامة الحيوية 2 ضرورية لزراعة خلايا AGS.
سلسلة الخلايا AGS: المزايا والقيود
سيوضح هذا القسم من المقالة بعض المزايا والقيود الرئيسية المرتبطة بخلايا AGS.
المزايا
المزايا الرئيسية لخلايا AGS الظهارية المعدية هي:
سهولة الاستزراع
يمكن الحفاظ على خط الخلايا السرطانية المعدية AGS بسهولة في مختبرات زراعة الخلايا. ولا تتطلب أي متطلبات معقدة وصعبة لزراعة الخلايا. علاوة على ذلك، فإنها تتميز بخصائص نمو جيدة، مما يجعلها خيارًا مثاليًا لدراسة بيولوجيا سرطان المعدة.
صلة سرطان المعدة
تم اشتقاق خلايا AGS من سرطان الغدة المعدية البشري، مما يجعلها مستخدمة على نطاق واسع لدراسة بيولوجيا سرطان المعدة والتدخلات العلاجية.
القيود
القيود المرتبطة بسلسلة الخلايا AGS هي:
نموذج الخلايا المختبري
تُزرع خلايا AGS في مختبرات الأبحاث الطبية الحيوية في ظروف اصطناعية. لذلك، قد لا تعكس بشكل كامل البيئة الدقيقة لسرطان المعدة في الجسم الحي والتفاعلات الخلوية والجزيئية الأخرى.
تطبيقات خلايا AGS
تُستخدم خلايا AGS بشكل خاص لدراسة بيولوجيا سرطان المعدة. ولها العديد من التطبيقات الواعدة الأخرى في المجال الطبي الحيوي. ومن بين التطبيقات البحثية المثيرة للاهتمام لخلايا AGS ما يلي:
- دراسة سرطان المعدة: تعد خلايا AGS أداة بحثية ممتازة لدراسة الآليات الخلوية والجزيئية الكامنة وراء نمو سرطان المعدة وانتشاره وغزوه. يستخدم الباحثون أيضًا خلايا AGS الظهارية المعدية لدراسة العمليات الخلوية المختلفة والتحورات الجينية ومسارات الإشارات في تطور سرطان المعدة. وجدت دراسة نشرت في مجلة Oncology Reports (2019) أن microRNA-183-5p.1 يشجع تكاثر الخلايا السرطانية وهجرتها وغزوها عن طريق تثبيط سلسلة إشارات Bcl 2/P53. بالإضافة إلى ذلك، فإنه يقلل أيضًا من نشاط جين TPM1 لممارسة هذه التأثيرات. وبالتالي، يُقترح كل من microRNA و TPM1 كأهداف جزيئية فعالة لتطوير علاجات موجهة لسرطان المعدة [2].
- فحص الأدوية: تُستخدم خلايا AGS بشكل شائع لفحص أدوية جديدة وفعالة لمكافحة سرطان المعدة. ويقوم الباحثون بتقييم السمية الخلوية وفعالية الأدوية المحتملة باستخدام خط الخلايا AGS. كما أُجريت دراسات حول تحديد أهداف جزيئية جديدة وتطوير علاجات موجهة مبتكرة لمكافحة سرطانات المعدة. استخدمت الأبحاث التي أجريت في عام 2021 خلايا سرطان المعدة AGS ودرست التأثير العلاجي لعقار باكليتاكسيل. كشفت النتائج أن باكليتاكسيل يسبب كارثة انقسامية، وهي آلية أساسية لموت الخلايا المبرمج أو موت الخلايا في خلايا AGS. بالإضافة إلى ذلك، عزز أيضًا الالتهام الذاتي في خلايا سرطان المعدة [3].
- التفاعلات بين المضيف والممرض: يدرس خط الخلايا السرطانية AGS أيضًا التفاعلات بين المضيف والممرض. يساعد هذا الباحثين على فهم الآليات الخلوية والاستجابات المرتبطة بالعدوى. على سبيل المثال، لاحظت دراسة أجريت في عام 2020 أن الحمض النووي الريبي الصغير غير المشفر الموجود في حويصلات الغشاء الخارجي لبكتيريا هيليكوباكتر بيلوري يقلل من إفراز الإنترلوكين 8 في خلايا AGS البشرية [4].
5. المنشورات البحثية حول سلالة الخلايا AGS
سيتناول هذا القسم من المقالة بعض المنشورات البحثية المثيرة للاهتمام والأكثر استشهادًا بها والتي تتناول خلايا AGS.
اقترحت هذه الدراسة المنشورة في مجلة Biomedicine & Pharmacotherapy (2020) أن الساليدروسيد، وهو مركب طبيعي، يحفز الالتهام الذاتي الوقائي وموت الخلايا في خلايا AGS الظهارية المعدية عن طريق تعديل مسار إشارات PI3K/AKT/mTOR.
نُشرت هذه الدراسة في مجلة Biomedicine & Pharmacotherapy (2018). واستكشفت الآثار التآزرية المضادة للسرطان لعديد السكاريد المستخرج من نبات الأستراغالوس وعقار أباتينيب في خلايا AGS. كشفت نتائج الدراسة أن الأستراغالوس يعزز التأثيرات المضادة للأورام لعقار أباتينيب عن طريق تثبيط إشارات AKT.
اقترحت هذه الدراسة المنشورة في مجلة Journal of Ethnopharmacology (2018) أن الكركوزيدواليد، وهو مركب طبيعي مستخلص من نبات الكركم الزيدواري (Curcuma zedoaria Roscoe)، يساهم في قدرته على إحداث السمية الخلوية ضد خلايا AGS.
اقترح هذا المنشور في مجلة Gene (2018) أن زيادة تنظيم FOXA1 يثبط تكاثر خلايا سرطان المعدة الغدي AGS والتحول الظهاري إلى اللحمي (EMT) والغزو.
نُشرت هذه المقالة البحثية في مجلة International Journal of Medical Microbiology في عام 2020. في هذه الدراسة، استُخدمت خلايا AGS لدراسة التفاعلات بين المضيف والممرض. كشفت النتائج أن بكتيريا Helicobacter pylori تحتوي على بعض الحمض النووي الريبي غير المشفر في حويصلات غشائها الخارجي التي تؤثر على مستويات IL-8 في خلايا AGS.
موارد لخط خلايا AGS: بروتوكولات ومقاطع فيديو والمزيد
فيما يلي بعض الموارد التي تتناول خلايا AGS.
- بروتوكول نقل الخلايا AGS: هذا الفيديو هو دليل تفصيلي لتعلم بروتوكول نقل الخلايا الظهارية المعدية AGS.
يحتوي الرابط التالي على بروتوكول زراعة خلايا AGS.
- بروتوكول زراعة خلايا AGS: يحتوي هذا الموقع على معلومات مفيدة حول وسائط خلايا AGS وبروتوكولات زراعة الخلايا. باختصار، يوفر بروتوكولًا لزراعة خلايا AGS الظهارية المعدية والتعامل مع مزارع AGS المتكاثرة والمحفوظة بالتبريد.
- إعادة زراعة خلايا AGS: يشرح هذا الموقع إجراءات إعادة زراعة خلايا AGS بالتفصيل.
المراجع
- Phuc, B.H., et al., الجينوميات المقارنة لسلالتين فيتناميتين من بكتيريا Helicobacter pylori، CHC155 من مريض بسرطان المعدة غير القلبي و VN1291 من مريض بقرحة الاثني عشر. تقارير علمية، 2023. 13(1): ص. 8869.
- Lin, J., et al., miRNA‑183‑5p. 1 يعزز هجرة وغزو خلايا AGS لسرطان المعدة من خلال استهداف TPM1 تصويب في/10.3892/or. 2020.7902. تقارير الأورام، 2019. 42(6): ص. 2371-2381.
- Khing, T.M., et al., تأثير باكليتاكسيل على موت الخلايا المبرمج، والالتهام الذاتي، والكارثة الانقسامية في خلايا AGS. Scientific Reports, 2021. 11(1): ص. 23490.
- Zhang, H., et al., sncRNAs packaged by Helicobacter pylori outer membrane vesicles attenuate IL-8 secretion in human cells. International Journal of Medical Microbiology, 2020. 310(1): p. 151356.