خلايا RBL-2H3 - أهمية سلالة RBL-2H3 في الاستجابة التحسسية والدراسات المناعية
إن خط خلايا RBL-2H3 هو خط خلايا سرطان الدم القاعدية المشتقة من الفئران والمستخدمة في أبحاث علم المناعة. وهو بمثابة نظام نموذجي لدراسة فسيولوجيا الخلايا البدينة وسلوكها ووظائفها. تُستخدم هذه الخلايا أيضًا لدراسة تفاعلات الحساسية والعمليات المناعية واختبار الأدوية وتطويرها.
ستقدم هذه المقالة نظرة ثاقبة على أصل RBL-2H3، والسمات العامة، ومتطلبات الاستزراع، والتطبيقات البحثية.
خلايا RBL-2H3: المنشأ والخصائص العامة
قبل استخدام خط الخلايا القاعدية في أبحاثك، يجب أن تعرف أصلها وسماتها العامة. سيطلعك هذا القسم من المقالة على أساسيات خلايا RBL-2H3. مثل، ما هي الخلايا البدينة RBL-2H3؟ لماذا تستخدم خلايا RBL-2H3؟ ما هي خلايا RBL-2H3 في ابيضاض الدم القاعدي للفئران؟ ما هي مورفولوجيا RBL-2H3؟ هل خلايا RBL-2H3 خالدة؟
- RBL-2H3 هي خلايا ابيضاض الدم القاعدية في سرطان الدم القاعدية المشتقة من خلايا الفئران القاعدية في ويستار عام 1978 في مختبر المعهد القومي لأبحاث الأسنان في علم المناعة.
- تمتلك خلايا RBL-2H3 مستقبلات تيروزين كيناز مستقبلات c-kit ومستقبلات بروتياز الخلايا البدينة II (RMCP-II)، مما يجعلها نموذجاً محتملاً للخلايا البدينة. لذلك، يطلق عليها عادةً الخلايا البدينة على الرغم من أن أصلها من الخلايا القاعدية للفئران [1].
- وهي تطلق الهيستامين وغيره من الوسطاء عند تنشيطها وتعبر عن مستقبلات IgE عالية التقارب.
- تُظهر خلايا RBL-2H3 مورفولوجيا تشبه الخلايا الليفية.
خلايا RBL-2H3 معلومات الاستزراع
سيساعدك هذا القسم على معرفة بعض الجوانب الأساسية لزراعة خط الخلايا RBL-2H3. ستعرف ما هو زمن مضاعفة خلايا RBL-2H3؟ ما هي كثافة بذر خلايا RBL-2H3؟ ما هو بروتوكول زراعة خلايا RBL-2H3؟ ما هي وسائط تجميد خط خلايا RBL-2H3؟
النقاط الأساسية لزراعة خلايا RBL-2H3
|
وقت مضاعفة عدد الخلايا: |
يتراوح وقت مضاعفة الخلايا البدينة RBL-2H3 حوالي 50-60 ساعة. |
|
ملتصقة أو معلقة: |
RBL-2H3 هو خط خلايا ملتصقة. |
|
نسبة الزراعة الفرعية: |
بالنسبة لخلايا RBL-2H3، يتم الاحتفاظ بنسبة التقسيم بين 1:2 إلى 1:4. تُغسل الخلايا الملتصقة بمحلول PBS خالٍ من المغنيسيوم والكالسيوم 1 × محلول PBS. يُضاف محلول التمرير Accutase، وتُحفظ الخلايا في درجة حرارة محيطة لمدة 10 دقائق حتى تنفصل عن قاع وعاء المزرعة. تتم إضافة وسائط جديدة، ويتم طرد الخلايا مركزيًا. يُعاد خلط الخلايا المحصودة بعناية في وسط جديد وتُسكب في قوارير جديدة تحتوي على وسط نمو جديد. |
|
وسط النمو: |
يتم استخدام وسط EMEM الذي يحتوي على 10% من البوتاسيوم المنشط للجسم و2 ملي مولار مليغرام من الجلوتامين و2.2 جم/لتر من NaHCO3 وملح EBSS لزراعة خلايا RBL-2H3. يجب استبدال الوسائط من 2 إلى 3 مرات في الأسبوع. |
|
ظروف النمو: |
تُزرع خلايا RBL-2H3 في حاضنة مرطبة مضبوطة على درجة حرارة 37 درجة مئوية ومتصلة بمصدر ثاني أكسيد الكربون بنسبة 5%. |
|
التخزين: |
يتم تخزين الخلايا في المرحلة البخارية من النيتروجين السائل أو في درجة حرارة أقل من -150 درجة مئوية في مجمد كهربائي لحماية حيوية الخلية على المدى الطويل. |
|
عملية التجميد والوسط: |
تُستخدم وسائط التجميد CM-1 أو CM-ACF لتجميد خلايا RBL-2H3 باستخدام عملية تجميد بطيئة. بإيجاز، تسمح هذه الطريقة بانخفاض درجة الحرارة بمقدار 1 درجة مئوية في الدقيقة وتحمي الخلايا من الصدمة. |
|
عملية الإذابة: |
يتم إذابة خلايا RBL-2H3 في حمام مائي محدد مسبقًا (37 درجة مئوية) لمدة 60 ثانية تقريبًا. بعد ذلك، تُضاف الخلايا إلى وسط مستنبت جديد ويتم طردها مركزيًا. هذه الخطوة ضرورية لإزالة مكونات وسط التجميد. بعد ذلك، يتم إعادة تعليق كريات الخلايا في وسط النمو، ويتم توزيع الخلايا في قارورة للزراعة. |
|
مستوى السلامة البيولوجية: |
يجب الحفاظ على خلايا RBL-2H3 في مختبرات السلامة البيولوجية 1. |
مزايا وقيود سلالة خلايا RBL-2H3 Basophil Cell Line
يشيع استخدام خلايا RBL-2H3 في الأبحاث المناعية. يوضح هذا القسم مزاياها وقيودها الأساسية.
المزايا
- سهولة الاستزراع: يمكن استزراع خلايا RBL-2H3 بسهولة والحفاظ عليها في بيئة المختبر. وهذا يسهل إجراء تجارب فعالة من حيث التكلفة وقابلة للتكرار، مما يجعلها خيارًا شائعًا للدراسات الأولية في علم المناعة.
القيود
- أصلها غير بشري: قد لا تحاكي خلايا RBL-2H3، التي تنشأ من الخلايا القاعدية للفئران، العمليات البيولوجية البشرية بدقة، مما قد يحد من إمكانية تطبيقها في الدراسات البحثية الخاصة بالإنسان. يستلزم ذلك تفسير البيانات بحذر عند استقراء النتائج على الأنظمة البشرية.
- نموذج الخلايا البدينة المبسطة: في حين أن هذه الخلايا توفر نموذجًا أساسيًا لدراسة وظائف الخلايا البدينة، إلا أنها لا تمثل بشكل كامل الطبيعة المعقدة لتفاعلات الخلايا البدينة داخل الجهاز المناعي البشري. وبالتالي، قد لا تمثل بشكل كافٍ الأدوار المتعددة الأوجه للخلايا البدينة في الاستجابات المناعية أو الحالات المرضية في الجسم الحي.
خط خلايا RBL-2H3: حجر الزاوية في الأبحاث المناعية
بحوث الخلايا القاعدية والخلايا البدينة باستخدام خط الخلايا RBL-2H3
يُستخدم خط الخلايا RBL-2H3 المشتق من الفئران راتوس نورفيجكس كنموذج رئيسي لدراسة بيولوجيا الخلايا القاعدية والخلايا البدينة. توفر هذه الخلايا البدينة للفئران رؤى أساسية حول إطلاق وسيط الخلايا البدينة، وهو أمر بالغ الأهمية لفهم حالات الحساسية مثل التهاب الأنف التحسسي. من خلال هذه الخلايا، يستكشف الباحثون ديناميكيات مستقبلات الخلايا وإنشاء المشابك المناعية، والتي تعتبر أساسية لاستجابة الجهاز المناعي لمسببات الحساسية.وقد استخدمت دراسة مثيرة للاهتمام نُشرت في عام 2019 خط خلايا RBL-2H3 وبحثت في الآليات الكامنة وراء التفاعلات التحسسية الزائفة الناتجة عن حقن الكينجكيلينج. ووجدت الدراسة أن شلال إشارات PI3K-RAC1 يستثير جزئيًا هذه الاستجابة التحسسية في الخلايا [2]
ديناميات المشبك المناعي في أبحاث الحساسية
تُستخدم خلايا RBL-2H3 على نطاق واسع في أبحاث علم المناعة، وهي فعالة بشكل خاص في دراسة ديناميكيات المشبك المناعي. ويساعد ذلك في توضيح عمليات التواصل في الجهاز المناعي، مع تطبيقات في دراسة كل من الدم المحيطي والخلايا البدينة البريتونية. وتُعد هذه الأبحاث حيوية لفهم شامل للاستجابة المناعية في كل من السياقات الجهازية والموضعية
فحص الأدوية واختبار السمية
في فحص الأدوية واختبارها، يتم استغلال استجابة الخلايا البدينة في الدم المحيطي واختبارها لمختلف المحفزات، بما في ذلك دراسة كيفية تثبيط H2O2 للاستجابات بوساطة IgE. وتلعب هذه الخلايا دورًا أساسيًا في تطوير علاجات لأمراض مثل عدوى المكورات العقدية، حيث تثبط مجموعة المكورات العقدية الملتهبة تنشيط الخلايا البدينة. إلى جانب ذلك، يقوم الباحثون بتقييم الآثار السامة لمختلف المواد، بما في ذلك المواد الكيميائية والأدوية والجسيمات النانوية، باستخدام هذا النموذج RBL 2H3 mc. مثل دراسة حديثة (2022) قيّمت السمية الخلوية للبلاستيكيات الدقيقة المصنوعة من البوليسترين على خلايا RBL 2H3. ووجدوا أن الجسيمات البلاستيكية الدقيقة تتلف عضيات خلايا RBL-2H3 وتعزز موت الخلايا [3]. قيمت دراسة أخرى أجريت في عام 2021 الإمكانات المضادة للحساسية والمضادة للالتهابات لمنتج طبيعي، وهو النيفرين، باستخدام نموذج RBL 2H3 mc. كشفت الدراسة عن خصائص المركب الجيدة المضادة للحساسية والمضادة للالتهابات [4]
المنهجيات المتقدمة في القياس المناعي
إن إطلاق الوسيط المتناسق والقابل للقياس من خلايا RBL-2H3 يجعلها مثالية للقياس الفلوري المريح، مما يسهل إجراء قياسات دقيقة ودقيقة ضرورية لدراسة الأمراض وتقييم العوامل العلاجية.
يعتبر خط الخلايا RBL-2H3، الذي تعود أصوله إلى فصيلة Rattus norvegicus، أحد الأصول التي لا تقدر بثمن في كل من البحوث الأساسية والتطبيقية في مجال علم المناعة. وهو يوفر فرصاً عميقة لتطوير معرفتنا وعلاجنا للأمراض المناعية
سلالة الخلايا RBL-2H3 للأبحاث المناعية المتقدمة
خلايا RBL-2H3 المنشورات البحثية
فيما يلي بعض المنشورات البحثية المثيرة للاهتمام التي تضم الخلايا البدينة RBL-2H3:
النشاط المثبط للناريروتين على تحلل الخلايا البدينة RBL-2H3
نُشرت هذه الورقة البحثية في علم الأدوية المناعي والسموم المناعية (2021). اقترحت الدراسة أن الناريروتين، وهو مركب طبيعي، يمارس تأثيرات مثبطة على تحلل خلايا RBL 2H3 عن طريق تنظيم مسار إشارات NF-κB وMAPK ومسار إشارات التيروزين كيناز.
اقترح هذا البحث في المجلة الدولية للعلوم الجزيئية (2020) أن مركب الأبيجينين يثبط بشكل كبير الاستجابات التحسسية والالتهابية لخلايا RBL-2H3 وخلايا RAW264.7. لذلك، قد يكون بمثابة عامل محتمل لمكافحة الأمراض المرتبطة بالمناعة.
قيّمت هذه الورقة البحثية المنشورة في المجلة الدولية للعلوم الجزيئية (2021) التأثيرات المضادة للحساسية والمضادة للالتهابات لمنتج طبيعي، السابونارين، باستخدام خطوط خلوية مختلفة، بما في ذلك RBL-2H3.
وجدت هذه الدراسة المستندة إلى الأدلة في الطب التكميلي والطب البديل (2014) أن مستخلصات بينشالوكاويتشيان وبعض المكونات النشطة تمارس تأثيرات مثبطة محتملة على إطلاق إنزيم هكسوسامينيداز RBL 2H3.
نُشرت هذه الورقة البحثية في عام 2018 في المجلة الدولية للجزيئات البيولوجية الكبيرة. وقد ذكرت الدراسة أن سبيرولينا ماكسيما، وهو منتج طبيعي، يثبط تحلل خلايا RBL 2H3 عن طريق منع فسفرة MAPKs وفسفرة AKT.
مصادر خط الخلايا RBL-2H3: البروتوكولات ومقاطع الفيديو والمزيد
RBL-2H3 هو خط الخلايا البدينة المستخدم على نطاق واسع. تم ذكر الموارد المتاحة التي تغطي بروتوكولات زراعة RBL-2H3 ونقلها هنا:
- نموذج RBL 2H3 MC: تشتمل هذه المقالة البحثية على بروتوكولات للحفاظ على مزارع RBL-2H3 ونقل RBL-2H3.
فيما يلي بعض المصادر التي تشرح بروتوكول زراعة خلايا RBL-2H3:
- خلايا RBL-2H3: هذا الموقع مفيد لك لتتعلم بروتوكولات زراعة الخلايا لخط خلايا RBL-2H3. إلى جانب ذلك، فهو يتضمن معلومات حول وسائط خلايا RBL 2H3 وظروف الاستزراع.
خط الخلايا RBL-2H3: أسئلة وأجوبة أساسية للباحثين
المراجع
- Passante, E. and N. Frankish, خط الخلية RBL-2H3: مصدره وملاءمته كنموذج للخلية البدينة. Inflamm Res, 2009. 58(11): p. 737-45.
- لي، كيو، وآخرون، رد الفعل التحسسي الزائف الناجم عن حقن كينغكايلينغ جزئيًا عبر مسار إشارات PI3K-Rac1 في خلايا RBL-2H3. أبحاث السموم، 2019. 8(3): p. 353-360.
- Liu, L., et al., تتلف المواد البلاستيكية الدقيقة (النانوية) المصنوعة من البوليسترين (النانو) عضيات خلايا RBL-2H3 وتعزز MOAP-1 للحث على موت الخلايا المبرمج. مجلة المواد الخطرة، 2022. 438: p. 129550.
- Chiu, K.-M., وآخرون، التأثيرات المضادة للحساسية والمضادة للالتهابات للنيفيرين على خلايا RBL-2H3. المجلة الدولية للعلوم الجزيئية، 2021. 22(20): p. 10994.
