خلايا B16-F10 - استكشاف سلالة خلايا سرطان الجلد B16-F10 في أبحاث الانتشار
تشكل خلايا B16-F10 خط خلايا سرطان الجلد المستمد من الفأر C57BL/6J. وهي تستخدم على نطاق واسع في أبحاث سرطان الجلد. يستخدم الباحثون هذه الخلايا لدراسة تطور الأورام وتقدمها والتدخلات العلاجية. ستغطي هذه المقالة الجوانب الأساسية لخلايا سرطان الجلد B16-F10. وستتضمن على وجه الخصوص:
- وسط النمو
- تُزرع خلايا B16-F10 في وسط DMEM. يُضاف إلى الوسط 10٪ من مصل الأجنة البقري (FBS)، و4 مليمولار من L-Glutamine، و1.5 غرام/لتر من NaHCO3، و4.5 غرام/لتر من الجلوكوز، و1.0 مليمولار من بيروفات الصوديوم من أجل نمو خلايا مثالي. يجب استبدال الوسط 2 إلى 3 مرات أسبوعيًا.
- وقت التضاعف
- يبلغ وقت مضاعفة خلايا B16-F10 حوالي 20.1 ساعة. وقد يتراوح بين 17 و21 ساعة، اعتمادًا على ظروف الاستزراع.
- نوع النمو
- B16-F10 هو خط خلوي ملتصق. تنمو الخلايا بسرعة وتشكل طبقات أحادية.
- مستوى السلامة الحيوية
- BSL-1
- متوفر من
- Cytion — طلب B16-F10
- أصل وخصائص عامة لسلسلة الخلايا B16-F10
- معلومات حول زراعة خلايا B16-F10
- خلايا B16-F10: المزايا والعيوب
- تطبيقات البحث لخلايا B16-F10
- المنشورات التي تتناول خط الخلايا B16-F10
- موارد خط الخلايا B16-F10: بروتوكولات، مقاطع فيديو، والمزيد
أصل وخصائص عامة لسلسلة الخلايا B16-F10
سيقدم لك هذا القسم نظرة ثاقبة حول أصل وخصائص خلايا ورم الميلانوما B16F10 المميزة. سيساعدك ذلك على استخدام خط الخلايا بكفاءة في عملك البحثي. ستتعلم بشكل أساسي: ما هي خلايا B16-F10؟ ما هو مصدر B16F10؟ ما هي الشكل المورفولوجي لسلسلة الخلايا B16F12؟ ما هو حجم خلية B16F10؟
- B16-F10 هو نسخة فرعية من خط الخلايا السرطانية B16 المستمدة من أنسجة جلد الفئران C57BL/6J. هنا، تم تطوير خلايا سرطان الجلد B16F10 بعد الحقن الوريدي لخط B16 في فئران ذات جهاز مناعي ضعيف أو متجانسة جينياً. تم اختيار هذه الخلايا لقدرتها على تكوين مستعمرات رئوية منتشرة في الجسم الحي، ثم تم تأسيسها بعد عشر دورات من تكوين المستعمرات الرئوية في المختبر [1]. تم تطويرها بواسطة Fidler وزملاؤه في عام 1976.
- تتميز سلالات الخلايا B16-F10 بمظهر شبيه بالأنسجة الظهارية ومغزلي الشكل.
- يبلغ الحجم التقريبي لخلايا B16-F10 15.4 ± 1.4 ميكرومتر [2].
خلايا B16-F1 و B16-F10
تم اشتقاق خلايا B16-F1 و B16-F10 من خط الخلايا الأم B16. نشأت كلاهما من نفس المصدر وتمتلكان خصائص متشابهة تقريبًا. ومع ذلك، فإن الاختلاف الرئيسي بينهما هو قدرتهما على الانتشار. تتمتع خلايا B16-F10 بإمكانية عالية للانتشار، في حين تتمتع خلايا B16-F1 بإمكانية منخفضة للانتشار [3].
معلومات حول زراعة خلايا B16-F10
قبل التعامل مع خط الخلايا وزراعته، يجب أن تعرف وقت تضاعف الخلايا، ووسائط النمو، والظروف، وبروتوكولات زراعة الخلايا. سيناقش هذا القسم: ما هو وقت تضاعف خلايا B16-F10؟ كيف تزرع خلايا B16-F10؟ ما هي وسائط خلايا B16-F10؟ ما هي ظروف الاستزراع الموصى بها لخلايا B16-F10؟
النقاط الرئيسية لزراعة خلايا B16-F10
زمن التضاعف:
يبلغ وقت تضاعف خلايا B16-F10 حوالي 20.1 ساعة. وقد يتراوح بين 17 و21 ساعة، اعتمادًا على ظروف الاستزراع.
الالتصاق أو التعليق:
B16-F10 هي سلالة خلوية ملتصقة. تنمو الخلايا بسرعة وتشكل طبقات أحادية.
نسبة الانقسام:
يتم إعادة استزراع خلايا B16-F10 بنسبة انقسام تتراوح من 1:2 إلى 1:4. تُغسل الخلايا بمحلول ملحي فوسفاتي (1x) ثم تُحضن مع محلول تمرير Accutase لمدة 8 إلى 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة. تُضاف الخلايا إلى وسط جديد وتُطرد مركزيًا. يتم إعادة تعليق حبيبات الخلايا المجمعة، وتوزع الخلايا في قارورة جديدة تحتوي على وسط استزراع جديد وفقًا لنسبة الانقسام.
وسط النمو:
تُزرع خلايا B16-F10 في وسط DMEM. يُضاف إلى الوسط 10% FBS، و4 مليمولار L-Glutamine، و1.5 جم/لتر NaHCO3، و4.5 جم/لتر جلوكوز، و1.0 مليمولار بيروفات الصوديوم من أجل نمو خلايا مثالي. يجب استبدال الوسط 2 إلى 3 مرات في الأسبوع.
ظروف النمو:
تُزرع خلايا B16-F10 في حاضنة مرطبة عند درجة حرارة 37 درجة مئوية مع تزويدها بـ 5% من ثاني أكسيد الكربون.
التخزين:
يتم تخزين الخلايا المجمدة عند درجة حرارة أقل من -150 درجة مئوية في مجمد كهربائي ذي درجة حرارة منخفضة للغاية أو في المرحلة البخارية من النيتروجين السائل للحفاظ على حيوية الخلايا.
عملية التجميد والوسط:
يتم تجميد خلايا B16-F10 في وسط CM-1 أو CM-ACF للتخزين. ولهذا الغرض، يوصى بعملية تجميد بطيئة لا تسمح بانخفاض درجة الحرارة إلا بمقدار 1 درجة مئوية في الدقيقة لمنع تعرض الخلايا لأي صدمة.
عملية الذوبان:
يتم إذابة الخلايا B16-F10 المجمدة في حمام مائي محدد مسبقًا بدرجة حرارة 37 درجة مئوية لمدة 40 إلى 60 ثانية. بعد ذلك، تضاف الخلايا إلى وسط جديد وتُطرح في جهاز الطرد المركزي لإزالة مكونات وسط التجميد. تُعاد تعليق الخلايا المجمعة في وسط نمو وتُصب في قوارير للزراعة.
مستوى السلامة الحيوية:
يلزم وجود مختبر بمستوى السلامة الحيوية 1 للتعامل مع خط الخلايا B16-F10 وصيانته.
خلايا B16-F10: المزايا والعيوب
مثل سلالات الخلايا الأخرى، تتميز خلايا B16-F10 أيضًا ببعض المزايا والعيوب. وتتم مناقشة بعض الإيجابيات والسلبيات المهمة لهذه السلالة من خلايا سرطان الجلد في هذا القسم.
المزايا
يستخدم خط الخلايا B16-F10 على نطاق واسع في أبحاث السرطان. تتمثل مزايا خلايا B16-F10 في:
إمكانية الانتشار
تتميز خلايا سرطان الجلد B16F10 بإمكانية عالية للانتشار، مما يجعلها ذات قيمة كبيرة لدراسة انتشار السرطان والآليات الكامنة وراءه.
نموذج الورم المختبري
تُستخدم خلايا B16-F10 كنموذج مختبري لدراسة تطور السرطان ونموه، مما يساعد الباحثين على فهم الآليات الخلوية والجزيئية التي تدفع السرطان.
العيوب
العيوب المرتبطة بسلالة الخلايا B16-F10 هي:
سلسلة خلايا مشتقة من الفئران
B16-F10 هو خط خلوي مشتق من الفئران، مما يحد من قابليته للتطبيق في الدراسات الخاصة بالبشر. قد لا تنطبق نتائج الأبحاث المستخلصة من هذه الخلايا دائمًا على بيولوجيا الإنسان.
التطبيقات البحثية لخلايا B16-F10
يستخدم خط الخلايا B16-F10 على نطاق واسع في أبحاث السرطان. نناقش هنا بعض التطبيقات الواعدة لهذا الخط الخلوي.
- أبحاث السرطان: يعد خط الخلايا B16-F10 نموذجًا قيمًا لدراسة عمليات الخلايا السرطانية، بما في ذلك التكاثر والغزو والهجرة وموت الخلايا أو الاستماتة الخلوية. إلى جانب ذلك، يساعد الباحثين على اكتساب رؤى حول الآليات والمسارات الجزيئية التي تحرك هذه العمليات الخلوية. استكشفت دراسة أجريت في عام 2018 دور CCR5 (مستقبل الكيموكين C-C من النوع الخامس) في انتقال الخلايا الظهارية إلى الخلايا الوسيطة وانتشار سرطان الجلد. كشفت النتائج أن نقص CCR5 يحد من نمو الورم وانتشاره، في حين أن التعبير العالي يؤدي إلى تعزيز نمو وانتشار خلايا B16-F10. وأفادت أبحاث أخرى أن CCR5 ينظم تعبير TGFβ1، الذي ينظم إشارات PI3K/AKT/GSK3β لتعزيز الانتقال من الخلايا الظهارية إلى الخلايا اللحمية وهجرة الخلايا [4].
- اختبار الأدوية وتطويرها: تتميز خلايا ورم الميلانوما B16F10 بكونها شديدة العدوانية، وبالتالي فهي مناسبة لاختبار الأدوية والعلاجات المضادة للأورام المحتملة. يستخدم الباحثون هذه الخلايا ويقيمون تأثير المركبات المختلفة على نمو الخلايا وتكاثرها وانتشارها، مما يساعد في تطوير الأدوية. أجرت فالنتينا ناني وزملاؤها دراسة في عام 2018 لتقييم الآثار العلاجية لمستخلص زهور Spartium junceum المائي الكحولي. اقترحت الدراسة أن مستخلص الزهرة كان فعالاً في تحفيز الشيخوخة في خلايا B16-F10، مما يؤدي إلى تثبيط نمو الخلايا وتكوين الميلانين، وبالتالي يمكن أن يمارس أنشطة محتملة مضادة للسرطان [5].
5. المنشورات التي تتناول خط الخلايا B16-F10
فيما يلي بعض المنشورات البحثية المهمة التي تتناول خط الخلايا B16-F10 لسرطان الجلد:
نُشرت هذه الدراسة في مجلة Nutrients (2020). واقترحت أن مستخلص الإيثانول من السورغوم ثنائي اللون له تأثير مضاد لتكوين الميلانين في خلايا سرطان الجلد B16F10.
الكالسيتريول يثبط التكاثر ويحفز موت الخلايا المبرمج في خلايا B16–F10
اقترحت الدراسة المنشورة في مجلة Medical Science Monitor Basic Research (2022) أن عقار الكالسيتريول له تأثيرات مضادة للأورام في خلايا سرطان الجلد B16-F10 من خلال تثبيط التكاثر وتحفيز موت الخلايا المبرمج.
يشارك التأثير المؤكسد للكاردول في نشاطه السام للخلايا ضد خلايا سرطان الجلد B16–F10 في الفئران
نُشرت هذه المقالة في مجلة Biochemical and Biophysical Research Communications (2022). كشفت النتائج أن الكاردول، وهو دهون ريسورسينولية، يمارس سمية خلوية شديدة على خط الخلايا B16-F10.
استكشفت الدراسة المنشورة في مجلة Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) الإمكانات المضادة للانتشار لمستخلص القشرة الخارجية لشجرة الجنكة باستخدام خلايا B16-F10.
اقترحت هذه الدراسة المنشورة في مجلة World Neurosurgery (2018) أن الثيموكينون يمكن أن يكون علاجًا فعالًا ضد الآفات النقيلية داخل الدماغ لأنه يثبط نمو خلايا B16-F10 ويحفز موت الخلايا المبرمج.
موارد لسلسلة الخلايا B16-F10: بروتوكولات، مقاطع فيديو، والمزيد
تُستخدم خلايا B16F10 البطانية على نطاق واسع في أبحاث سرطان الجلد. فيما يلي بعض الموارد عبر الإنترنت التي تشرح بروتوكولات زراعتها وإدخال الجينات إليها:
- تحويل الخلايا السرطانية B16F10: يمكن أن يساعدك هذا الفيديو التعليمي في تعلم بروتوكول التحويل للخلايا B16-F10.
- التحويل الجيني لخلايا B16-F10: يشرح هذا المستند بروتوكول التحويل الجيني للحمض النووي في المختبر لخلايا سرطان الجلد B16F10.
يحتوي الرابط التالي على بروتوكول زراعة الخلايا لخلايا B16-F10:
- إعادة استزراع B16-F10: يحتوي هذا الموقع على معلومات مفيدة عن خلايا ورم الميلانوما B16F10. ويشمل وسائط النمو، ووقت التضاعف، وظروف الاستزراع، وبروتوكول إعادة استزراع الخلايا، والتعامل مع المزارع المحفوظة بالتبريد والمزارع المتكاثرة.
المراجع
- Poste, G., et al., Comparison of the metastatic properties of B16 melanoma clones isolated from cultured cell lines, subcutaneous tumors, and individual lung metastases. Cancer Research, 1982. 42(7): p. 2770-2778.
- Nakamura, M., D. Ono, and S. Sugita, تحديد الخصائص الميكانيكية لمتغيرات خلايا سرطان الجلد B16 لتقييم فعالية العلاج بـ (-)-Epigallocatechin Gallate باستخدام جهاز ميكروفلويدي مدبب. Micromachines, 2019. 10(3): ص. 207.
- دانسيو، سي، وآخرون، سلوك أربعة سلالات فرعية مختلفة من خلايا سرطان الجلد الفئراني B16: جلد C57BL/6J. Int J Exp Pathol، 2015. 96(2): ص. 73-80.
- ليو، ج.، وآخرون، ارتفاع التعبير عن CCR5 في سرطان الجلد يعزز الانتقال الظهاري-الوسطي والانبثاث عبر TGFβ1. مجلة علم الأمراض، 2019. 247(4): ص. 481-493.
- Nanni, V., et al., المستخلص المائي الكحولي لزهور Spartium junceum L. يثبط النمو وتكوين الميلانين في خلايا B16-F10 عن طريق تحفيز الشيخوخة. Phytomedicine, 2018. 46: ص. 1-10.