خلايا B16-F10 - استكشاف خط خلايا الورم الميلانيني B16-F10 في أبحاث الورم الخبيث

تشكل خلاياB16-F10 خط خلايا الورم الميلانيني المأخوذة من الفأر C57BL/6J. وتُستخدم على نطاق واسع في أبحاث سرطان الجلد. يستخدم الباحثون هذه الخلايا لدراسة تطور الورم وتطوره والتدخلات العلاجية. ستغطي هذه المقالة الجوانب الأساسية لخلايا الورم الميلانيني B16-F10. وستشمل على وجه الخصوص

  1. المنشأ والخصائص العامة لخط خلايا B16-F10
  2. معلومات زراعة خلايا B16-F10
  3. خلايا B16-F10: المزايا والعيوب
  4. التطبيقات البحثية لخلايا B16-F10
  5. المنشورات التي تحتوي على خط خلايا B16-F10
  6. مصادر خط خلايا B16-F10: البروتوكولات ومقاطع الفيديو والمزيد

1. المنشأ والخصائص العامة لخط الخلايا B16-F10

سيمنحك هذا القسم نظرة ثاقبة حول أصل خلايا الورم الميلانيني B16F10 وخصائصها المميزة. وسيساعدك على استخدام خط الخلايا بكفاءة في عملك البحثي. ستتعلم بشكل أساسي ما هي خلايا B16-F10؟ ما هو مشتق B16F10؟ ما هو شكل خط الخلايا B16F12؟ ما هو حجم خلية B16F10؟

  • B16-F10 هو استنساخ فرعي من خط الخلايا الورمية B16 المشتق من نسيج جلد الفئران C57BL/6J. وهنا تم تطوير خلايا الورم الميلانيني B16F10 بعد حقن سلالة B16 في الوريد في فئران ناقصة المناعة أو فئران متجانسة. وقد تم اختيار هذه الخلايا لقدرتها على تكوين مستعمرات رئوية منتشرة في الجسم الحي ثم تم تأسيسها بعد عشر دورات من تكوين مستعمرات الرئة في المختبر [1]. طورها فيدلر وزملاؤه في عام 1976.
  • تتميز خطوط الخلايا B16-F10 بمظهر شبيه بالظهارة وشكل مغزلي.
  • يبلغ الحجم التقريبي لخلايا B16-F10 15.4 ± 1.4 ميكرومتر [2].

خلايا B16-F1 و B16-F10

تم اشتقاق خلايا B16-F1 و B16-F10 من خط الخلايا الأم B16. وكلاهما نشأتا في نفس الخصائص وتمتلكان خصائص متشابهة تقريباً. ومع ذلك، فإن الاختلاف الرئيسي بينهما هو قدرتهما على الانتقال. تتمتع خلايا B16-F10 بقدرة عالية على الانتقال، في حين أن خلايا B16-F1 لديها قدرة منخفضة على الانتقال [3].

مقطع عرضي مكبّر للغاية لورم ميلانوما خبيث تحت المجهر.

2.معلومات زراعة خلايا B16-F10

قبل التعامل مع سلالة خلوية وزراعتها، يجب عليك معرفة وقت المضاعفة ووسائط النمو وظروفها وبروتوكولات زراعة الخلايا. سيناقش هذا القسم: ما هو زمن تضاعف خلايا B16-F10؟ كيف تزرع خلايا B16F10؟ ما هي وسائط خلايا B16-F10؟ ما هي ظروف الاستزراع الموصى بها لخلايا B16-F10؟

النقاط الرئيسية لزراعة خلايا B16-F10

وقت المضاعفة:

يبلغ زمن تضاعف خلايا B16-F10 حوالي 20.1 ساعة. قد يتراوح من 17 إلى 21 ساعة، حسب ظروف الاستزراع.

ملتصقة أو معلقة:

B16-F10 هو خط خلايا ملتصقة. تنمو الخلايا بسرعة وتكوّن طبقات أحادية.

نسبة الانقسام:

تتم زراعة خلايا B16-F10 بنسبة انقسام من 1:2 إلى 1:4. تُغسل الخلايا بمحلول ملحي فوسفاتي عازل (1x) ثم تُحضّن بمحلول تمرير أكوتاز لمدة 8 إلى 10 دقائق في درجة الحرارة المحيطة. تُضاف الخلايا بوسط جديد وتُطرد مركزيًا. يتم إعادة تعليق كريات الخلايا المحصودة مرة أخرى، ويتم توزيع الخلايا في القارورة الجديدة التي تحتوي على وسط مستنبت جديد وفقًا لنسبة التقسيم.

وسط النمو:

تُزرع خلايا B16-F10 في وسط DMEM. يُستكمل الوسط بنسبة 10% من FBS، و4 مللي مولار جلوتامين، و1.5 جم/لتر NaHCO3، و4.5 جم/لتر جلوكوز، و1.0 مللي مولار بيروفات الصوديوم لنمو مثالي للخلايا. يجب استبدال الوسائط من 2 إلى 3 مرات في الأسبوع.

حالة النمو:

تُزرع خلايا B16-F10 في حاضنة مرطبة عند درجة حرارة 37 درجة مئوية مع إمداد بنسبة 5% من ثاني أكسيد الكربون.

التخزين:

يتم تخزين الخلايا المجمدة تحت درجة حرارة أقل من -150 درجة مئوية في مجمد كهربائي بدرجة حرارة منخفضة للغاية أو في مرحلة بخار النيتروجين السائل للحفاظ على حيوية الخلية.

عملية التجميد والوسط:

يتم تجميد خلايا B16-F10 في وسائط CM-1 أو CM-ACF للتخزين. لهذا الغرض، يوصى بإجراء عملية تجميد بطيئة تسمح بانخفاض درجة الحرارة بمقدار 1 درجة مئوية فقط في الدقيقة الواحدة لمنع الخلايا من التعرض لأي صدمة.

عملية الإذابة:

يتم إذابة خلايا B16-F10 المجمدة في حمام مائي مضبوط مسبقاً على درجة حرارة 37 درجة مئوية لمدة 40 إلى 60 ثانية. بعد ذلك، تُضاف الخلايا إلى وسط جديد وتُطرد مركزيًا لإزالة مكونات وسط التجميد. يُعاد تعليق الخلايا المجمعة في وسط نمو وتُسكب في قوارير للزراعة.

مستوى السلامة البيولوجية:

يلزم وجود مختبر من مستوى السلامة البيولوجية 1 للتعامل مع خط الخلايا B16-F10 والحفاظ عليه.

خلايا B16-F10 شبه مملوءة بتكبير 20x و10x.

3.خلايا B16-F10: المزايا والعيوب

مثل خطوط الخلايا الأخرى، يُظهر B16-F10 أيضاً بعض المزايا والعيوب. نناقش في هذا القسم بعض المزايا والعيوب الهامة لهذا الخط الخلوي لسرطان الجلد الميلانيني.

المزايا

يستخدم خط الخلايا B16-F10 على نطاق واسع في أبحاث السرطان. مزايا خلايا B16-F10 هي:

إمكانية الانتشار

تُظهر خلايا الورم الميلانيني الجلدي B16F10 قدرة عالية على الانتقال، مما يجعلها ذات قيمة لدراسة انتشار السرطان والآليات الكامنة وراءه.

نموذج الورم في المختبر

تُستخدم خلايا B16-F10 كنموذج مخبري لدراسة تطور السرطان ونموه، مما يساعد الباحثين على فهم الآليات الخلوية والجزيئية التي تقود السرطان.

العيوب

المساوئ المرتبطة بخط الخلايا B16-F10 هي:

خط خلوي مشتق من الفأر

B16-F10 هو خط خلوي مشتق من الفأر، مما يحد من إمكانية تطبيقه على الدراسات الخاصة بالبشر. قد لا تُترجم نتائج الأبحاث المستخلصة من هذه الخلايا دائماً بشكل حقيقي إلى بيولوجيا الإنسان.

4.التطبيقات البحثية لخلايا B16-F10

يُستخدم خط الخلايا B16-F10 على نطاق واسع في أبحاث السرطان. نناقش هنا بعض التطبيقات الواعدة لهذا الخط الخلوي.

  • أبحاث السرطان: يُعتبر خط الخلايا B16-F10 نموذجاً قيماً لدراسة عمليات الخلايا السرطانية، بما في ذلك التكاثر والغزو والهجرة وموت الخلايا أو موت الخلايا المبرمج. إلى جانب ذلك، يساعد الباحثين على اكتساب رؤى حول الآليات والمسارات الجزيئية التي تقود هذه العمليات الخلوية. استكشفت دراسة أُجريت في عام 2018 دور مستقبلات CCR5 (مستقبلات سي سي الكيميائية من النوع الخامس) في انتقال الخلايا الظهارية إلى الخلايا الوسيطة والورم الخبيث. وكشفت النتائج أن نقص CCR5 يحد من نمو الورم وانتشاره، في حين أن التعبير العالي يؤدي إلى تعزيز نمو خلايا B16-F10 وانتشارها. وذكرت أبحاث أخرى أن CCR5 ينظم تعبير TGFβ1، الذي ينظم إشارات PI3K/AKT/GSK3β لتعزيز الانتقال من الظهارة إلى الوسيطة اللُّحمية وهجرة الخلايا [4].
  • اختبار الدواء وتطويره: تُعد خلايا الورم الميلانيني B16F10 خلايا سرطانية سرطانية شديدة العدوانية وبالتالي فهي مناسبة لاختبار الأدوية والعلاجات المحتملة المضادة للأورام. يستخدم الباحثون هذه الخلايا ويقيّمون تأثير المركبات المختلفة على نمو الخلايا وتكاثرها وانتشارها وانتشارها، مما يساعد في تطوير الأدوية. بحثت دراسة أجريت في عام 2018 من قبل فالنتينا ناني وزملائها في التأثيرات العلاجية لمستخلص أزهار سبارتيوم جونسوم المائي الكحولي. اقترحت الدراسة أن مستخلص الزهور كان فعالاً في تحفيز الشيخوخة في خلايا B16-F10، مما يؤدي إلى نمو الخلايا وقمع تكوّن الميلانين، وبالتالي يمكن أن يمارس أنشطة محتملة مضادة للسرطان [5].

5.المنشورات التي تضم خط الخلايا B16-F10

فيما يلي بعض المنشورات البحثية الهامة التي تضم خط خلايا الورم الميلانيني B16-F10:

التأثير المضاد للميلانينية لمستخلص الإيثانوليك من مستخلص الذرة الرفيعة ثنائي اللون من الذرة الرفيعة على تكوين الميلانينية المستحث بـ IBMX في خلايا الورم الميلانيني B16/F10

نُشرت هذه الدراسة في مجلة Nutrients (2020). وقد اقترحت أن المستخلص الإيثانولي للذرة الرفيعة ثنائي اللون للذرة الرفيعة له تأثير مضاد لتكوين الميلانين في خلايا الورم الميلانيني الجلدي B16F10.

الكالسيتريول يثبط التكاثر ويحفز موت الخلايا المبرمج في خلايا B16-F10

اقترح البحث المنشور في مجلة Medical Science Monitor Basic Research (2022) أن دواء الكالسيتريول يمارس تأثيرات مضادة للورم في خلايا الورم الميلانيني B16-F10 عن طريق تثبيط الانتشار وتحفيز موت الخلايا المبرمج.

يشارك التأثير البروتوكسي للكارديول في نشاطه السام للخلايا ضد خلايا الورم الميلانيني B16-F10 لدى الفئران

نُشرت هذه المقالة في مجلة اتصالات البحوث الكيميائية الحيوية والفيزيائية الحيوية (2022). كشفت النتائج أن الكاردولات، وهي دهون ريزورسينولية، تمارس سمية خلوية شديدة على خط الخلايا B16-F10.

يثبط مستخلص الجنكة بيلوبا إكسوكارب مستخلص الجنكة بيلوبا من ورم الميلانوما B16-F10 الذي يتضمن مسار إشارات PI3K/akt/NF-κB/MP-9

استكشفت الدراسة التي نشرت في مجلة الطب التكميلي والبديل القائم على الأدلة (2018) الإمكانات المضادة للورم الخبيث لمستخلص إكسوكارب الجنكو بيلوبا باستخدام خلايا B16-F10.

يحفز الثيموكينون موت الخلايا المبرمج في خلايا الورم الميلانيني B16-F10 من خلال تثبيط p-STAT3 ويثبط نمو الورم في الورم الميلانيني داخل المخ لدى الفئران ..

اقترح هذا البحث في مجلة جراحة الأعصاب العالمية (2018) أن الثيموكينون يمكن أن يكون علاجًا فعالًا ضد الآفات النقيلية داخل المخ لأنه يثبط نمو خلايا B16-F10 ويؤدي إلى موت الخلايا المبرمج.

6.مصادر خط خلايا B16-F10: البروتوكولات ومقاطع الفيديو والمزيد

تُستخدم الخلايا البطانية B16F10 على نطاق واسع في أبحاث سرطان الجلد. فيما يلي بعض المصادر عبر الإنترنت التي تشرح بروتوكولات زراعتها ونقلها:

  • نقل خلايا الورم الميلانيني B16F10: يمكن أن يساعدك هذا الفيديو التعليمي في تعلم بروتوكول نقل العدوى لخلايا B16-F10.
  • نقل B16-F10: سيشرح هذا المستند بروتوكول نقل الحمض النووي في المختبر لخلايا الورم الميلانيني الجلدي B16F10.

يحتوي الرابط التالي على بروتوكول زراعة الخلايا لخلايا B16-F10:

  • الزراعة الفرعية لخلايا B16-F10: يحتوي هذا الموقع الإلكتروني على معلومات مفيدة عن خلايا الورم الميلانيني B16F10. ويتضمن وسائط النمو، ووقت المضاعفة، وظروف الاستزراع وبروتوكول الزراعة الفرعية للخلايا، والتعامل مع المزارع المحفوظة بالتبريد والمزارع التكاثري.

المراجع

  1. Poste, G., وآخرون، مقارنة الخصائص النقيلية لنسائل الورم الميلانيني B16 المعزولة من سلالات الخلايا المستزرعة، والأورام تحت الجلد، والنقائل الرئوية الفردية. أبحاث السرطان، 1982. 42(7): p. 2770-2778.
  2. Nakamura, M., D. Ono, and S. Sugita, Mechanophenotyping of B16 Melanoma Cell Variants لتقييم فعالية علاج (-) -Epigallocatechin Gallatechin Gallate باستخدام جهاز ميكروفلويديك مدبب. الآلات الدقيقة، 2019. 10(3): p. 207.
  3. Danciu, C., et al.، سلوك أربعة سلالات فرعية مختلفة من خلايا سرطان الجلد الفئران B16: جلد C57BL/6J. Int J Exp Pathol, 2015. 96(2): p. 73-80.
  4. Liu, J., et al.، التعبير العالي لـ CCR5 في الورم الميلانيني يعزز الانتقال الظهاري-المتوسط والورم الخبيث عبر TGFβ1. مجلة علم الأمراض، 2019. 247(4): p. 481-493.
  5. Nanni, V., et al.، المستخلص المائي الكحولي لزهور سبارتيوم جونسوم L. يمنع النمو وتكوين الميلانينية في خلايا B16-F10 عن طريق إحداث الشيخوخة. Phytomedicine, 2018. 46: p. 1-10.

لقد اكتشفنا أنك في بلد مختلف أو أنك تستخدم لغة متصفح مختلفة عن اللغة المحددة حاليًا. هل ترغب في قبول الإعدادات المقترحة؟

إغلاق