خلايا NCI-H460 - استكشاف أبحاث سرطان الرئة من خلال رؤى NCI-H460
خلايا NCI-H460 هي خلايا سرطان الرئة ذات الخلايا غير الصغيرة المشتقة من الإنسان، وتستخدم بشكل شائع في أبحاث سرطان الرئة وعلم السموم. ويُعد هذا السلالة الخلوية أداة قيّمة لدراسة مختلف جوانب بيولوجيا السرطان التي تشمل تطور الورم ونموه ومقاومته للأدوية. علاوة على ذلك، تُعد خلايا NCI-H460 نموذجًا مناسبًا لتطوير الكواشف المضادة للسرطان.
- وسط النمو
- يُستخدم RPMI 1640 كوسط استزراع لخلايا NCI-H460. ويُضاف إليه 10% من مصل الأبقار الجنينية، و2.1 مليمول/مول من الجلوتامين المستقر، و2.0 غرام/لتر من NaHCO3. يجب استبدال الوسط 2 إلى 3 مرات أسبوعيًا.
- زمن التضاعف
- يبلغ وقت مضاعفة الخلايا NCI-H460 حوالي 33 ساعة.
- نوع النمو
- خلايا سرطان الرئة NCI-H460 هي خلايا ملتصقة.
- مستوى السلامة الحيوية
- BSL-4
- متوفر من
- Cytion — طلب NCI-H460
خلايا NCI-H460: الأصل والخصائص العامة
يساهم أصل وخصائص خط الخلايا بشكل كبير في تطبيقاته البحثية. سيساعدك هذا القسم من المقالة في التعرف على أصل وخصائص خلايا سرطان الرئة NCI-H460. ستتعرف على: ما هي خلايا NCI-H460؟ ما هو نوع خط الخلايا NCI-H460؟ ما هي الشكل المورفولوجي لخلايا NCI-H460؟
- نشأ خط الخلايا NCI-H460 من الانصباب الجنبي لرجل أوروبي مصاب بسرطان الرئة ذي الخلايا الكبيرة. وقد أنشأه A.F. Gazdar وزملاؤه في عام 1982.
- تتميز خلايا سرطان الرئة NCI-H460 بمورفولوجية ظهارية.
- NCI-H460 هو خط خلوي مسبب للأورام ذو نمط كروموسومي ثلاثي الصبغيات ناقص. العدد النموذجي للكروموسومات لهذه الخلايا هو 57. كما تمتلك خلايا NCI-H460 عددًا نموذجيًا من الكروموسومات يبلغ 58 بمعدلات مماثلة.
- تحتوي خلايا سرطان الرئة هذه على العديد من طفرات NCI-H460 المشابهة لتلك الموجودة في أورام الرئة ذات الخلايا غير الصغيرة، مثل طفرة KRAS في NCI-H460، والتي تلعب دورًا في تكاثر الخلايا ونموها وغزوها وانتشارها.
معلومات عن زراعة خلايا NCI-H460
يجب عليك معرفة النقاط الأساسية التالية للتعامل السليم مع خط خلايا NCI-H460 وصيانتها. ستُعلمك هذه المعلومات عن وقت مضاعفة خلايا NCI-H460، ووسط الزراعة NCI-H460، وإجراءات الزراعة الأساسية لخلايا سرطان الرئة NCI-H460.
النقاط الرئيسية لزراعة خلايا NCI-H460
|
وقت المضاعفة: |
يبلغ وقت مضاعفة خلايا NCI-H460 حوالي 33 ساعة. |
|
ملتصقة أو معلقة: |
تكون خلايا سرطان الرئة NCI-H460 ملتصقة. |
|
نسبة الزراعة الفرعية: |
نسبة التقسيم الموصى بها لخط خلايا NCI-H460 هي 1:2 و1:4. بعد إزالة الوسط القديم، يتم شطف الخلايا الملتصقة بمحلول ملحي فوسفاتي عازل 1 × 1. بعد ذلك، يتم تحضين الخلايا بمحلول تمرير أكوتاز لمدة 8 إلى 10 دقائق في درجة الحرارة المحيطة. يتم إعادة تعليق الخلايا المنفصلة في وسط مزرعة وطردها مركزيًا. يتم إعادة تعليق الخلايا المحصودة مرة أخرى وسكبها في قارورة جديدة للزراعة. |
|
وسط النمو: |
يُستخدم RPMI 1640 كوسيط زراعة NCI-H460. يتم استكماله بمصل بقري جنيني بنسبة 10%، و2.1 مللي مولار جلوتامين مستقر، و2.0 جم/لتر من NaHCO3. يجب استبدال الوسائط من 2 إلى 3 مرات في الأسبوع. |
|
ظروف النمو: |
يتم الحفاظ على مزارع NCI-H460 في درجة حرارة 37 درجة مئوية في حاضنة مرطبة مع إمداد مستمر بنسبة 5% من ثاني أكسيد الكربون. |
|
التخزين: |
يمكن تخزين خلايا سرطان الرئة NCI-H460 في المرحلة البخارية من النيتروجين السائل أو في درجة حرارة أقل من -150 درجة مئوية في مجمد كهربائي بدرجة حرارة منخفضة للغاية على المدى الطويل. |
|
عملية التجميد والوسيط: |
يُستخدم وسط CM-1 أو CM-ACF لتجميد خلايا NCI-H460 وتخزينها. يوصى باستخدام طريقة التجميد البطيء لحماية أقصى قدر من حيوية الخلايا. |
|
عملية الذوبان: |
يتم إذابة خلايا NCI-H460 المجمدة في حمام مائي مُدفأ مسبقاً (عند درجة حرارة 37 درجة مئوية) لمدة 40 إلى 60 ثانية حتى يتبقى تكتل جليدي صغير. تُضاف الخلايا المذابة مع وسائط جديدة وتُطرد مركزيًا لإزالة مكونات الوسائط المتجمدة. يتم إعادة تعليق كريات الخلايا المجمعة مرة أخرى، ويتم توزيع الخلايا في قوارير جديدة تحتوي على وسائط للنمو. قد تستغرق خلايا NCI-H460 ما يقرب من 24 ساعة لتلتصق بسطح القارورة. |
|
مستوى السلامة البيولوجية: |
يتم التعامل مع خلايا سرطان الرئة NCI-H460 وصيانتها في مختبرات مستوى السلامة البيولوجية 1. |
مزايا وعيوب خلايا NCI-H460
NCI-H460 هو خط خلوي يستخدم على نطاق واسع في أبحاث سرطان الرئة. سيغطي هذا القسم المزايا والعيوب العامة المتعلقة بخلايا سرطان الرئة NCI-H460.
المزايا
تتمثل مزايا خط خلايا سرطان الرئة غير صغيرة الخلايا NCI-H460 في ما يلي:
-
أصل الورم
تم اشتقاق سلالة خلايا NCI-H460 من مريض بسرطان الرئة كبير الخلايا، والتي تمثل هذا النوع الخاص من سرطان الرئة. يتم استخدامها كنموذج لدراسة بيولوجيا سرطان الرئة وتطوير علاجات جديدة وفعالة. وتتمتع خلايا NCI-H460 بإمكانية توليد الأورام ويمكن حقنها في الفئران التي تعاني من نقص المناعة لإنشاء نماذج أورام في الجسم الحي لدراسة نمو الورم وتطوره وفعالية الأدوية المحتملة.
-
معدلات انتشار عالية
يُظهر NCI-H460 معدلات نمو أعلى من سلالات خلايا سرطان الرئة غير صغيرة الخلايا الأخرى، مثل A549. وتزيد هذه الميزة من توافرها وتساعد الباحثين على إجراء تجارب قابلة للتكرار وحساسة للوقت.
العيوب
العيوب المرتبطة بخلايا سرطان الرئة NCI-H460 هي
-
التجانس
تتسم خلايا NCI-H460 بالتجانس حيث يتم الحصول عليها من ورم مريض واحد. ولذلك، فإنها تفتقر بشكل عام إلى التعقيد وعدم التجانس الذي لوحظ في أورام المرضى.
التطبيقات البحثية لخلايا NCI-H460
تُستخدم خلايا سرطان الرئة NCI-H460 على نطاق واسع في الدراسات المتعلقة بسرطان الرئة. فيما يلي بعض التطبيقات البحثية المهمة لخلايا NCI-H460:
- أبحاث سرطان الرئة: تعد خلايا NCI-H460 نموذجًا لا يقدر بثمن لدراسة الآليات الخلوية والجزيئية المشاركة في تطور الورم ونموه وانتشاره. علاوة على ذلك، تُستخدم لدراسة مسارات الإشارات الحتمية والأهداف الجزيئية والطفرات الجينية المختلفة المرتبطة بتطور سرطان الرئة. وقد أُجريت العديد من الدراسات على خلايا NCI-H460 لدراسة هذه العوامل بفعالية. اقترحت دراسة أُجريت في عام 2019 أن الكازين النووي في كل مكان والركيزة المعتمدة على الكينازات المعتمدة على السيكلين (NUCKS) التي تم الإفراط في التعبير عنها تشارك في نمو الخلايا السرطانية عبر تنظيم مسار إشارات PI3K/AKT [1]. وبالمثل، استخدمت دراسة أجريت في المختبر وفي الجسم الحي خلايا NCI-H460 لدراسة دور جين eIF4E. وكشفت النتائج أن الجين eIF4E متورط في نمو سرطان الرئة وتكوين الأوعية، ويمكن استهدافه لتطوير عقاقير واعدة مضادة لسرطان الرئة [2].
- اكتشاف الأدوية وتطويرها: يُستخدم خط خلايا سرطان الرئة البشري NCI-H460، وهو خط خلايا سرطان الرئة البشري، على نطاق واسع في دراسات اكتشاف الأدوية وتطويرها. ويستخدم الباحثون هذه الخلايا للتحقق من سمية وفعالية الأدوية الجديدة المرشحة والعلاجات المستهدفة والعلاجات التي تستهدف بشكل أساسي طفرات NCI-H460 KRAS. استخدمت دراسة أجراها هاويو هو وزملاؤه في عام 2023 خلايا NCI-H460 لدراسة التأثيرات المضادة للسرطان لعقار الأنلوتينيب. وأظهرت النتائج أن الأنلوتينيب أثّر جزئيًا على نمو خلايا سرطان الرئة الطافرة KRAS عن طريق تثبيط سلسلة إشارات MEK/ERK [3]. وبالمثل، تم فحص مركب فينولي، وهو حمض الكارنوسيك بحثًا عن الأنشطة المضادة للتكاثر والمحفزة للاستماتة باستخدام خلايا NCI-H460 [4].
- مقاومة الأدوية: يُعدّ خط خلايا NCI-H460 مثاليًا لدراسة آلية مقاومة سرطان الرئة للأدوية. يستخدم الباحثون هذه الخلايا لتطوير نماذج لمقاومة الأدوية لتحديد الجينات الكامنة والعوامل الجزيئية ومسارات الإشارات. على سبيل المثال، طوّرت دراسة طوّرت خلايا NCI-H460 المقاومة لعقار بيميتريكسيد، وهو عامل مضاد متعدد الأهداف، لدراسة الآليات الجزيئية الكامنة وراء مقاومة بيميتريكسيد في خلايا سرطان الرئة غير صغير الخلايا [5].
شراء خط خلايا NCI-H460: بوابتك لأبحاث سرطان الرئة
المنشورات البحثية التي تضم خلايا NCI-H460
في ما يلي بعض المنشورات البحثية المثيرة للاهتمام حول خط خلايا سرطان الرئة NCI-H460.
جلوكان طبيعي من الفاصوليا السوداء يثبط تكاثر الخلايا السرطانية عبر مسار PI3K-Akt وMAPK
اقترحت هذه الدراسة في مجلة الجزيئات (2023) أن الجلوكان الطبيعي α-1،6- 1،6- جلوكان، BBWPW، من الفاصوليا السوداء يثبط تكاثر خلايا NCI-H460 عبر تنظيم مسار PI3K/Akt/MAPK.
درست هذه المقالة في مجلة Phytomedicine (2019) أن ديوسكين-6′-أو-أسيتات، وهو مركب طبيعي جديد، يمارس تأثيرًا مضادًا للتكاثر على خلايا سرطان الرئة NCI-H460.
يعزز miRNA-425-5p نمو سرطان الرئة عبر محور إشارات PTEN/PI3K/AKT
ينص بحث BMC Pulmonary Medicine (2020) على أن الحمض النووي الريبوزي الميكروي-425-5p يعزز نمو سرطان الرئة السرطاني من خلال مسار PTEN/PI3K/AKT.
اقترحت هذه المقالة في تقارير الطب الجزيئي (2017) الإمكانات المضادة للأورام والآليات الكامنة وراء مركب الكيناليزارين في خلايا سرطان الرئة A549 وخلايا سرطان الرئة الأخرى.
يسلط هذا البحث في مجلة الغذاء والوظيفة (2019) الضوء على التأثير المحتمل المضاد للسرطان لمستخلص نبات الأوكالبتوس غلوبولوس لابيل باستخدام خلايا NCI-H460. أظهرت النتائج أن المستخلص النباتي أظهر هذه التأثيرات من خلال زيادة تعبير NCI-H460 p53 وتعديل ملف تعريف دورة الخلية.
مصادر خط خلايا NCI-H460: البروتوكولات ومقاطع الفيديو والمزيد
فيما يلي بعض الموارد عبر الإنترنت التي تعرض خلايا سرطان الرئة NCI-H460.
- نقل خلايا NCI-H460: هذا الفيديو التعليمي عبارة عن دليل تفصيلي خطوة بخطوة لنقل عدوى خلايا NCI-H460 بالحمض النووي البلازميدي.
تحتوي الروابط التالية على معلومات ضرورية لزراعة خلايا H460.
- خلايا NCI-H460: سيوفر هذا الموقع الإلكتروني معلومات مهمة حول وسائط خلايا NCI-H460، وإجراءات الزراعة الفرعية والتجميد والإذابة.
- تمرير خلايا NCI-H460: سيرشدك هذا المستند إلى كيفية تمرير خط خلايا NCI-H460 وزراعتها الفرعية. إلى جانب ذلك، سيساعدك أيضًا على تعلم بروتوكول نقل خلايا NCI-H460.
استكشاف خط خلايا NCI-H460: الأسئلة الشائعة والرؤى
المراجع
- Hu, C., et al., NUCKS يعزز تكاثر وهجرة وغزو خلايا سرطان الرئة من خلال مسار إشارات Pi3k/Akt. الطب السريري والتحقيقي، 2021. 44(2): ص. E55-61.
- Qi, X., et al., EGPI-1، مثبط جديد للتفاعل بين eIF4E/eIF4G، يثبط نمو خلايا سرطان الرئة وتولد الأوعية من خلال مسار إشارات Ras/MNK/ERK/eIF4E. التفاعلات الكيميائية البيولوجية، 2022. 352: p. 109773.
- Hu, H., et al., Anlotinib يمارس تأثيرات مضادة للسرطان على خلية سرطان الرئة المتحوّر KRAS من خلال قمع مسار MEK/ERK. إدارة وأبحاث السرطان، 2020: ص. 3579-3587.
- Corveloni, A.C., et al., يُظهر حمض الكارنوسيك تأثيرات مضادة للتكاثر ومضادة للاستماتة في خلايا الرئة الورمية NCI-H460 وخلايا الرئة غير الورمية IMR-90. مجلة علم السموم والصحة البيئية، الجزء أ، 2020. 83(10): p. 412-421.
- Xu, Y.-L., et al., إنشاء وتوصيف خلايا NCI-H460/PMT المقاومة للميتريكسيد. العوامل المضادة للسرطان في الكيمياء الطبية (الكيمياء الطبية الحالية - العوامل المضادة للسرطان سابقًا)، 2019. 19(6): p. 731-739.