خلايا DLD-1: تطبيقات ورؤى حول خلايا DLD-1 في أبحاث سرطان القولون والمستقيم
DLD-1 هي سلالة خلايا سرطانية بشرية في القولون والمستقيم تُستخدم بشكل شائع في أبحاث السرطان. وهي أداة قيّمة لدراسة جوانب مختلفة من سرطان القولون، بما في ذلك تطور الورم وتقدمه والآليات الجزيئية الكامنة وراءه واستجابته للعوامل العلاجية. وبالتالي، فإن DLD-1 لها دور بارز في فهم المرض وتطوير استراتيجيات علاجية محتملة.
- وسط النمو
- يُستخدم RPMI 1640 مع مكملات الوسط، بما في ذلك 10٪ من مصل الأبقار الجنينية (FBS)، و2.1 مليمول/لتر من الجلوتامين المستقر، و2.0 غرام/لتر من NaHCO3 لزراعة خلايا DLD-1. يجب استبدال الوسط 2-3 مرات في الأسبوع.
- وقت التضاعف
- يبلغ وقت مضاعفة DLD-1 حوالي 15 ساعة.
- نوع النمو
- DLD-1 هو خط خلايا سرطان القولون البشري الملتصق. تنمو الخلايا في طبقات أحادية.
- مستوى السلامة الحيوية
- BSL-1
- متوفر من
- Cytion — طلب DLD-1
الخصائص العامة وأصل خلايا DLD-1
قبل العمل على خط خلوي، فإن أول ما يراعيه الباحث هو أصله وخصائصه العامة. هذا القسم من المقالة هو مقدمة مفصلة عن خط الخلايا DLD-1. وسيغطي الأسئلة المتكررة التالية: ما هي خلايا DLD-1؟ ما هو خط الخلايا السرطانية DLD-1؟ ما هي طفرات خط الخلايا DLD-1؟ ما هو حجم خلية DLD-1؟ ما هي مورفولوجيا خلايا DLD-1؟
- DLD-1، خط خلايا سرطان القولون، نشأ من الأمعاء الغليظة لمريض يبلغ من العمر 67 عامًا مصاب بسرطان الغدة الدرقية. تم عزله بواسطة D.L. Dexter وزملاؤه خلال الفترة 1977-1979. تشترك هذه السلالة الخلوية في نفس الأصل مع سلالات HCT-8 و HCT-15 و HRT-18 الخلوية.
- مثل سرطانات القولون والمستقيم، تمتلك خلايا DLD-1 نمطًا ظاهريًا لعدم استقرار الميكروساتلايت [1].
- تشمل طفرات DLD-1 KRAS و P53 و BRAF و BRCA1 و BRCA2. نظرًا لحالة DLD-1 P53 وطفرات DLD-1 BRCA و DLD-1 BRCA2 و DLD-1 KRAS، تعتبر هذه الخلايا مثالية لدراسات السرطان.
- تتمتع هذه الخلايا بمورفولوجيا شبيهة بالخلايا الظهارية.
- يبلغ حجم خط الخلايا DLD-1 حوالي 15 ميكرومتر.
- يمتلك خط الخلايا السرطانية القولونية المستقيمية البشرية DLD-1 نمط كروموسومي شبه ثنائي الصيغة الصبغية. يمتلك حوالي 86% من الخلايا عدد كروموسومات نموذجي يبلغ 46. ومع ذلك، قد توجد أيضًا تعددية الصيغة الصبغية في 17.1% من مجموعة الخلايا.
معلومات حول زراعة خط الخلايا DLD-1
قبل زراعة أي خط خلوي، يجب أن تعرف متطلبات زراعة الخلايا الأساسية. سيبرز هذا القسم النقاط المهمة التي يجب أن تتعلمها قبل البدء في العمل على خط الخلايا DLD-1. ويشمل ذلك: ما هو وقت مضاعفة DLD-1؟ ما هو وسط استزراع DLD-1؟ ما هي كثافة بذر خلايا DLD-1؟ كيف يتم استزراع خلايا DLD-1؟
النقاط الرئيسية لزراعة خلايا DLD-1
زمن التضاعف:
يبلغ وقت مضاعفة DLD-1 حوالي 15 ساعة.
ملتصقة أم معلقة:
DLD-1 هي سلالة خلايا سرطان القولون البشري الملتصقة. تنمو الخلايا في طبقات أحادية.
كثافة البذر:
تُزرع خلايا DLD-1 بكثافة تتراوح من 1 إلى 2 × 104 خلية/سم². تُغسل الخلايا الملتصقة بمحلول ملحي فوسفاتي (PBS) 1x وتُحضن مع محلول التمرير (Accutase) في درجة حرارة الغرفة. بعد الحضانة لمدة 8 إلى 10 دقائق، تضاف الخلايا المنفصلة إلى وسط الاستزراع وتُطرح في جهاز الطرد المركزي. ثم يُعاد تعليق حبيبات الخلايا بعناية، وتُسكب الخلايا في أوعية استزراع جديدة تحتوي على وسط نمو.
وسط النمو:
يُستخدم RPMI 1640 مع مكملات الوسط، بما في ذلك 10٪ من مصل الأبقار الجنينية (FBS)، و2.1 مليمول/لتر من الجلوتامين المستقر، و2.0 غرام/لتر من NaHCO3 لزراعة خلايا DLD-1. يجب استبدال الوسط 2-3 مرات في الأسبوع.
ظروف النمو:
يتم الحفاظ على مزارع DLD-1 في حاضنة مرطبة بدرجة حرارة 37 درجة مئوية مع إمداد بنسبة 5٪ من ثاني أكسيد الكربون.
التخزين:
يتم تخزين خلايا DLD-1 في المرحلة البخارية من النيتروجين السائل أو في مجمد كهربائي بدرجة حرارة منخفضة للغاية (أقل من -150 درجة مئوية).
عملية التجميد والوسط:
يمكن استخدام وسط التجميد CM-1 أو CM-ACF لتجميد خلايا DLD-1. يوصى دائمًا باتباع عملية تجميد بطيئة، تسمح بانخفاض تدريجي في درجة الحرارة بمقدار 1 درجة مئوية، مما يمنع تعرض الخلايا للصدمة ويحمي قابليتها للحياة.
عملية الذوبان:
تُذاب الخلايا المجمدة في حمام مائي مُعد مسبقًا على درجة حرارة 37 درجة مئوية لمدة 40 إلى 60 ثانية حتى يتبقى كتلة صغيرة من الجليد. بعد ذلك، تضاف الخلايا إلى وسط جديد وتُطرح في جهاز الطرد المركزي. هذه الخطوة ضرورية لإزالة مكونات وسط التجميد من الخلايا. تُعاد تعليق الخلايا المجمعة في وسط نمو وتُوزع في القارورة للنمو.
مستوى السلامة الحيوية:
يتم الحفاظ على خط الخلايا DLD-1 في مختبرات مستوى السلامة الحيوية 1.
سلسلة الخلايا DLD-1: المزايا والقيود
في هذا القسم من المقالة، سنستعرض مزايا وقيود خط الخلايا DLD-1 لسرطان القولون.
المزايا
المزايا الرئيسية لسلسلة الخلايا DLD-1 هي:
نموذج سرطان القولون والمستقيم
تحتوي خلايا DLD-1 على طفرات شائعة لدى مرضى سرطان القولون والمستقيم، مثل طفرة DLD-1 KRAS و DLD-1 BRCA و DLD-1 BRCA2. هذه الصلة تجعلها نموذجًا خلويًا مناسبًا سريريًا لدراسة هذا المرض.
سلسلة الخلايا المسببة للأورام
خلايا DLD-1 مسببة للأورام. يمكن أن تسبب أورامًا عند حقنها في الفئران العارية. لذلك، يستخدم الباحثون هذه الخلايا لتطوير نماذج أورام زرع الأعضاء التي تساعد في دراسة تكوين الأورام وتطورها وتقدمها في الجسم الحي.
القيود
القيود المرتبطة بخلايا DLD-1 هي:
التباين
تُظهر مجموعات خلايا سرطان القولون DLD-1 تباينًا جينيًا وظهاريًا. وقد يؤثر ذلك على قابلية تعميم نتائج الأبحاث.
التطبيقات البحثية لسلسلة خلايا DLD-1
يوفر خط الخلايا DLD-1 مجموعة من التطبيقات في أبحاث السرطان. وتتم مناقشة بعض التطبيقات البارزة في هذا القسم.
- دراسة السرطان: تُعد خلايا DLD-1 نموذجًا مختبريًا قيمًا لفهم الآليات الجزيئية الكامنة وراء نمو سرطان القولون والمستقيم وتطوره وتقدمه. علاوة على ذلك، تُستخدم هذه الخلايا لدراسة التعبير الجيني ومسارات الإشارات وتأثير طفرات جينية محددة على سلوك الخلايا السرطانية. لاحظت الأبحاث التي أجريت في عام 2022 أن سلسلة إشارات PI3K/Akt/YAP تنظم هجرة وغزو خط الخلايا السرطانية DLD-1 في القولون والمستقيم [2].
- تطوير الأدوية: يستخدم الباحثون خط الخلايا DLD-1 لاختبار فعالية الأدوية المضادة للسرطان وتقييم إمكاناتها في علاج سرطان القولون. وهذا يساعد في تطوير الأدوية ومكافحة المرض بكفاءة. استخدمت دراسة أجريت في عام 2022 خط الخلايا السرطانية DLD-1 واستكشفت النشاط المضاد للسرطان لفيثالوسيانينات السيليكون، وهي مركبات مُصنعة كيميائيًا. أشارت نتائج الدراسة إلى أن هذه المركبات تعتبر عوامل قوية مضادة للسرطان [3]. ومن المثير للاهتمام أن بحثًا آخر اكتشف الإمكانات المضادة للسرطان لبروتين P8 المشتق من البروبيوتيك باستخدام خلايا DLD-1 [4].
5. المنشورات البحثية حول خلايا DLD-1
سيسلط هذا القسم الضوء على بعض المنشورات المثيرة للاهتمام والمتكرر الاستشهاد بها والتي تتناول خط خلايا سرطان القولون DLD-1.
نُشرت هذه الدراسة في مجلة Journal of Biologically Active Products from Nature (2022). ووجدت الدراسة أن الديوسمين، وهو مركب فلافونويد، يحفز موت الخلايا في خلايا DLD-1 ويؤدي أيضًا إلى توقف دورة الخلية؛ وبالتالي، يمكن أن يكون عاملًا محتملًا لمكافحة السرطان.
يمنع البروميلين بشكل فعال سرطان القولون والمستقيم المتحور جينياً Kras عن طريق تحفيز الفيروبتوسيس
اقترحت هذه الدراسة المنشورة في مجلة "الخلايا والأنظمة الحيوانية" (2018) أن البروميلين، وهو إنزيم، يثبط طفرة DLD-1 KRAS ويؤدي تأثيرات سامة قوية للخلايا.
نُشرت هذه المقالة البحثية في عام 2019 في مجلة "Environmental Toxicology". استكشفت الدراسة التأثيرات المضادة للأورام لمركب طبيعي، وهو البيرغابتين، باستخدام خط خلايا القولون والمستقيم DLD-1.
وجدت هذه الدراسة المنشورة في مجلة "Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials" (2023) أن المركبات النانوية من الكركمين وأكسيد الحديد فعالة للغاية ضد خلايا سرطان القولون والمستقيم DLD-1.
نُشرت هذه المقالة البحثية في عام 2020 في المجلة التركية للبيولوجيا. اقترحت الدراسة أن منتجًا طبيعيًا، وهو تنشيط AKT بوساطة إيببراسينوليد في خلايا DLD-1، يحفز الالتهام الذاتي المرتبط بالبوليامينات.
موارد لسلسلة خلايا DLD-1: بروتوكولات ومقاطع فيديو والمزيد
فيما يلي بعض الموارد المتعلقة بخلايا DLD-1:
- التحويل الجيني لـ DLD-1: هذا الفيديو التعليمي هو دليل شامل حول بروتوكول التحويل الجيني لـ DLD-1 في المختبر.
- خلايا DLD-1: تصف هذه الورقة البحثية بإيجاز متطلبات زراعة خلايا DLD-1، بما في ذلك الوسائط وظروف الزراعة. إلى جانب ذلك، قد تساعدك على تعلم بروتوكول التحويل الجيني المستخدم لخلايا DLD-1.
تحتوي الروابط التالية على بروتوكول زراعة DLD-1، وهي خلايا سرطان القولون المشتقة من الإنسان.
- سلسلة خلايا DLD-1: يوفر هذا الموقع معلومات أساسية حول سلسلة خلايا DLD-1. سيساعدك على تعلم بروتوكولات زراعة خلايا DLD-1 المختلفة، بما في ذلك إعادة الزراعة والتعامل مع المزارع المحفوظة بالتبريد والمتكاثرة.
المراجع
- Gavrilas, L.I., et al., الجينات المؤيدة للاستماتة كأهداف جديدة للعلاجات الفردية والمركبة باستخدام الريسفيراترول والكركمين في سرطان القولون والمستقيم. Food & function, 2019. 10(6): ص. 3717-3726.
- Takeda, T., et al., تعزز إشارات PI3K/Akt/YAP هجرة وغزو خلايا سرطان القولون والمستقيم DLD‑1. Oncology Letters, 2022. 23(4): p. 1-9.
- Farajzadeh, N., et al., النشاط المضاد للسرطان لفتالوسيانينات السيليكون الجديدة ضد خط خلايا سرطان القولون والمستقيم الغدي (DLD-1). New Journal of Chemistry، 2022. 46(41): ص. 19863-19873.
- An, B.C., et al., الأدوار المضادة للسرطان لبروتين P8 المشتق من البروبيوتيك في خط خلايا سرطان القولون والمستقيم DLD-1. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(12): p. 9857.