خلايا B16 - الدليل الأساسي لخلايا الورم الميلانيني B16 في أبحاث الأورام

B16 هو خط خلايا سرطان الجلد (الورم الميلانيني) من أصل فأر. يُعد هذا الخط الخلوي نموذجاً فعالاً في المختبر لدراسة سرطانات الجلد البشرية. ويُستخدم بشكل متكرر لدراسة تكوّن الأورام الصلبة وانتشار الخلايا السرطانية.

ستساعدك هذه المقالة في فهم أساسيات خط خلايا الورم الميلانيني B16. وعلى وجه التحديد، ستستعرض ما يلي:

1.الخصائص العامة وأصل خط الخلايا B16 وأصله

سيغطي هذا القسم من المقالة الخصائص المميزة لخط خلايا الورم الميلانيني B16. ستتعرف على إجابات الأسئلة المتداولة التالية. مثل ما هو خط الخلايا السرطانية B16؟ من أين يتم اشتقاق خلايا B16؟ ما هو حجم خلايا B16؟

تأسس خط الخلايا B16 في عام 1954. تم اشتقاق هذه الخلايا من فئران C57BL/6J التي أصيبت تلقائياً بورم في الجلد في مختبرات جاكسون في ولاية ماين.
هذه الخلايا هي خلايا طلائية منتجة للميلانين ولديها القدرة على الانتشار في الطحال والكبد والرئتين.
تنمو خلايا الورم الميلانيني B16 كطبقات أحادية وتُظهر مورفولوجيا الخلايا الشبيهة بالظهارة والشكل المغزلي.
يبلغ حجم خط خلايا B16 حوالي 15.4 ميكرومتر.
هناك سلالات فرعية متميزة من خلايا B16، بما في ذلك B16GMCSF وB164A5 وB16FLT3 وB16F10. تختلف هذه السلالات الفرعية عن خلايا B16 الأم وتحتفظ ببعض السمات المحددة. مثل، أنها تمتلك اختلافًا في التشكل وحجم الخلية وخصائص أخرى. وتتمتع B16F10 بقدرة عالية على الانتقال في الرئة، كما أن B164A5 هي أكثر خطوط خلايا سرطان الجلد عدوانية مقارنةً بخلايا B16F10 و B16-GMCSF و B16FLT3 [1].

رسم متحرك ثلاثي الأبعاد لقطة مقربة لسرطان الجلد المتنامي مثل الورم الميلانيني الخبيث الذي يسبب التهاب الأنسجة المحيطة به.

2.معلومات زراعة خط الخلايا B16

قبل صيانة أو زراعة خط خلوي ما، قد تبحث عن معلومات أساسية حول وقت المضاعفة، ونوع الخلية، ووسائط النمو، وظروف الزراعة، وما إلى ذلك. يحتوي هذا القسم هنا على جميع المعلومات الضرورية لزراعة خلايا B16.

النقاط الرئيسية لزراعة خلايا B16

وقت مضاعفة عدد الخلايا:	يقدر متوسط زمن تضاعف عدد الخلايا B16 ب 24 ساعة.
ملتصقة أو معلقة:	خلايا B16 ملتصقة وتنمو في طبقات أحادية.
كثافة البذر:	يوصى بزرع خلايا B16 بكثافة خلايا من 1 إلى 2 ×¹⁰⁴ ^{خلايا/سم2}. تُشطف خلايا B16 الملتصقة ب 1 × PBS وتنفصل عن السطح باستخدام محلول أكوتاز. تُطرد الخلايا بالطرد المركزي، ويُعاد تعليق كريات الخلايا في وسط النمو. يتم لاحقاً توزيع هذه الخلايا في دورق جديد للنمو.
وسط النمو:	تُزرع خلايا B16 في وسط EMEM (وسط إيجل الأساسي الأدنى) الذي يحتوي على 10 % من مصل البقر الجنيني (FBS). يجب تجديد وسط النمو من 2-3 مرات في الأسبوع.
ظروف النمو:	تُستخدم حاضنة مرطبة مع إمداد بنسبة 5% من _ثاني أكسيد الكربون ودرجة حرارة 37 درجة مئوية لزراعة خط خلايا B16.
التخزين:	تُخزّن هذه الخلايا في درجة حرارة أقل من -150 درجة مئوية أو في مرحلة بخار النيتروجين السائل لحماية حيوية الخلايا.
عملية التجميد والوسط:	يُستخدم وسط التجميد CM-1 أو CM-ACF لتجميد خلايا B16 باستخدام عملية تجميد بطيئة.
عملية الإذابة:	تُذاب خلايا B16 المجمدة عند درجة حرارة 37 درجة مئوية في حمام مائي يحتوي على عامل مضاد للميكروبات. يمكن زراعة الخلايا المذابة مباشرةً عن طريق توزيعها في قوارير تحتوي على وسط نمو. بالإضافة إلى ذلك، يمكن طرد هذه الخلايا بالطرد المركزي لإزالة مكونات وسط التجميد ثم زراعتها في وسط جديد.
مستوى السلامة البيولوجية:	يجب التعامل مع خط الخلايا B16 أو الحفاظ عليه في مختبر من مستوى السلامة البيولوجية الأول.

طبقة شبه مغمورة من خلايا الورم الميلانيني B16 تحت تكبير 10x و20x.

3. خط الخلايا B16: المزايا والعيوب

مثل خطوط الخلايا الأخرى، يمتلك خط الخلايا B16 مزيجاً فريداً من المزايا والعيوب. يتم سرد بعض المزايا والعيوب الهامة لهذا الخط الخلوي للورم الميلانيني في هذا القسم.

المزايا

B16 هو أول أداة فعالة من الفئران تُستخدم على نطاق واسع في أبحاث الورم الخبيث بسبب المزايا التي يقدمها. فيما يلي بعض مزايا هذا الخط الخلوي لسرطان الجلد:

سهولة النمو	من السهل زراعة خط الخلايا B16 في المختبرات البحثية. ويُستخدم على نطاق واسع لدراسة بيولوجيا الخلايا السرطانية ومسارات الإشارات وغيرها.
سريع النمو	يُظهر خط خلايا الورم الميلانيني B16 معدل تكاثر مرتفع، مما يجعله مناسباً لدراسة انقسام الخلايا وعمليات النمو.
التولّد الورمي	B16 هو خط خلوي سرطاني ورمي ذو خصائص شبيهة بالورم مثل الغزو والهجرة والتكاثر. وهو مفيد لدراسة تكوّن الورم وتطوره وانتشاره.

العيوب

العيوب المرتبطة بخط الخلايا B16 هي:

عدم وجود صلة بشرية	نظراً لكون B16 خط خلايا سرطان الجلد على الفئران قد لا يمثل بدقة بيولوجيا سرطان الجلد البشري، مما يحد من قابلية ترجمة نتائج الأبحاث.
عدم التجانس	تتسم خلايا B16 بعدم التجانس، حيث تُظهر خصائص وراثية ومظهرية متنوعة داخل نفس المزرعة. يمكن أن يؤثر ذلك على موثوقية النتائج وقابليتها للتكرار.

4. تطبيقات خلايا B16

يُستخدم خط الخلايا B16 على نطاق واسع في الدراسات البحثية. وفيما يلي بعض التطبيقات الواعدة لهذا الخط الخلوي:

بيولوجيا الأورام: يعتبر هذا الخط الخلوي لسرطان الجلد لدى الفئران من الخلايا السرطانية الورمية ويستخدم على نطاق واسع لفهم بيولوجيا الورم. وقد أُجريت العديد من الدراسات لاستكشاف الآليات الخلوية الكامنة وراء نمو الخلايا السرطانية وتكاثرها وانتشارها وانتشارها باستخدام خلايا B16. استخدمت دراسة بحثية أُجريت في عام 2020 خلايا B16 للتحقق من دور الحمض النووي الريبي غير المشفر الطويل غير المشفر، LncRNA MEG3، في تكوين الورم الميلانيني ونموه وانتشاره. وجد هذا البحث أن الحمض النووي الريبوزي غير المشفر يعدل محور miRNA-21/E-Cadherin لتحفيز هذه الأحداث الخلوية [2]. وعلى غرار ذلك، أُجري بحث مماثل للتحقق من الدور المحتمل لإشارات Notch1 في تثبيط المناعة الناجم عن الورم باستخدام خلايا B16 [3].
اكتشاف الأدوية: تُستخدم خلايا B16 للتحقق من صحة الآثار العلاجية المحتملة للأدوية المرشحة واختبارها. قيّمت إحدى الدراسات التأثير المضاد للأورام لحمض النيوغامبوجيك، وهو مركب طبيعي، باستخدام خط خلايا B16. وكشفت نتائج الدراسة أن هذا المركب يعدل مسار إشارات PI3K/Akt/mTOR للتسبب في موت الخلايا السرطانية [4]. بحثت دراسة أخرى في التأثير المضاد للورم الميلانيني للجينسينوسيد Rg3، وهو مركب صابونين، باستخدام خط الخلايا B16. واقترح البحث أن هذا المركب الطبيعي يسبب نشاطًا مضادًا للأورام عن طريق تقليل تنظيم مساري ERK وAkt [5].

‏٤٣٠٫٠٠ €*

المحتوى: 1.5 milliliter

الأسعار لا تشمل الضرائب بالإضافة إلى تكاليف الشحن

cryovial

رقم المنتج: 305154

5.المنشورات البحثية التي تضم خلايا B16

فيما يلي بعض المنشورات البحثية المهمة التي تضم خط خلايا الورم الميلانيني B16.

يعزز LncRNA MEG3 نمو الورم الميلانيني والورم الخبيث وتكوينه من خلال تعديل محور miR-21/E-الكادرين

اقترح هذا المنشور في مجلة Cancer Cell International (2020)، أن الحمض النووي الريبي الطويل غير المشفر MEG3 يعزز تكوين ونمو وانتشار خلايا الورم الميلانيني B16 عن طريق تعديل محور miRNA-21/E-Cadherin.

يعزز أحد مشتقات السورالين-مشتق جديد من السورالين-مفيسيل متعدد البروتينات تكوين الميلانين عبر تنشيط مسارات إشارات p38 MAPK وPKA في خلايا B16

نُشرت هذه الورقة البحثية في المجلة الدولية للطب الجزيئي في عام 2018. بحثت هذه الدراسة في التأثير الميلاني وآليات أحد مشتقات السورالين - 4-ميثيل-6-فينيل-2H-فورو[3،2-ز] كرومين-2-واحد (MPFC) في خلايا B16. اقترحت الدراسة أن هذا المشتق يعزز تكوين الميلانينية عن طريق تحفيز إشارات الخلايا PKA و p38 MAPK.

عززت إشارات Notch1 في خلايا الورم الميلانيني مناعة الورم عن طريق زيادة تنظيم TGF-β1

نُشر هذا البحث في عام 2018 في مجلة أبحاث السرطان التجريبية والسريرية. تشير نتائج الدراسة إلى أن تنشيط إشارات Notch1 في خلايا B16 قد يمنع المناعة المضادة للورم عن طريق زيادة التعبير عن جين TGF-β1.

يحفز حمض النيوجامبوجيك موت الخلايا المبرمج لخلايا الورم الميلانيني B16 عبر مسار إشارات PI3K/Akt/mTOR

أجرى هذه الدراسة تشونلان وو وزملاؤه في عام 2020 ونُشرت في مجلة Acta Biochimica Polonica. ينص هذا البحث على أن حمض النيوجامبوجيك، وهو مركب طبيعي، يمكن أن يتسبب في موت خلايا الورم الميلانيني B16 عن طريق تعديل سلسلة إشارات PI3K/Akt/mTOR.

يحفز مركب الإيريديوم (III) كعامل قوي مضاد للسرطان موت الخلايا المبرمج والالتهام الذاتي في خلايا B16 من خلال تثبيط مسار AKT/mTOR

نُشرت هذه الورقة البحثية في المجلة الأوروبية للكيمياء الطبية عام 2018. في هذه الدراسة، درس الباحثون النشاط المضاد للسرطان لمركب مركب الإيريديوم (III) باستخدام خلايا الورم الميلانيني B16.

يستحث الإيلانتون توقف دورة الخلية وموت الخلايا المبرمج في خلايا الورم الميلانيني B16 وA375

اقترحت هذه الدراسة أن مركب أيلانتون النباتي النشط بيولوجيًا يمتلك إمكانات مضادة للسرطان حيث يمكنه تحفيز موت الخلايا المبرمج وتوقف دورة الخلية في خلايا الورم الميلانيني B16 و A375. نُشرت هذه الورقة البحثية في مجلة Biomolecules في عام 2019.

6. مصادر خط الخلايا B16: البروتوكولات ومقاطع الفيديو والمزيد

هناك موارد محدودة عن خط الخلايا B16 تشرح بروتوكولات الاستزراع ونقل الخلايا.

زراعة خلايا الورم الميلانيني: يقدم هذا الفيديو نصائح قيمة لزراعة سلالات خلايا الورم الميلانيني.
الزراعة الفرعية لخط الخلايا: يشرح هذا الفيديو بروتوكول زراعة فرعية عام لخط خلوي.
نقل عدوى خط خلايا B16F10: يشرح هذا الفيديو بروتوكول نقل العدوى لخط فرعي من خلايا الورم الميلانيني B16. يمكن أن يساعدك في تحسين بروتوكول نقل العدوى لخلايا B16.

فيما يلي بعض بروتوكولات زراعة الخلايا لخلايا B16.

زراعة خلايا B16: يحتوي هذا الموقع الإلكتروني على جميع المعلومات اللازمة لزراعة خلايا B16، بما في ذلك وسائط النمو، والزراعة الفرعية، وإذابة الخلايا وتجميدها.

المراجع

Danciu, C., et al.، سلوك أربعة سلالات فرعية مختلفة من خلايا سرطان الجلد الفيروسي B 16: جلد C57 BL/6J. المجلة الدولية لعلم الأمراض التجريبي، 2015. 96(2): p. 73-80.
Wu, L., et al., LncRNA MEG3 يعزز نمو الورم الميلانيني والورم الخبيث وتكوينه من خلال تعديل محور miR-21/E-cadherin. الخلية السرطانية الدولية، 2020. 20: p. 1-14.
Yang, Z., وآخرون، إشارات Notch1 في خلايا الورم الميلانيني تعزز الكبت المناعي الناجم عن الورم عن طريق زيادة تنظيم TGF-β1. مجلة أبحاث السرطان التجريبية والسريرية، 2018. 37(1): p. 1-13.
وو، سي، وآخرون، حمض النيوجامبوجيك يحفز موت الخلايا المبرمج لخلايا الورم الميلانيني B16 عبر مسار إشارات PI3K/Akt/mTOR. Acta Biochimica Polonica، 2020. 67(2): p. 197-202.
Meng, L., et al.، النشاط المضاد للأورام للجينسينوسيد Rg3 في الورم الميلانيني من خلال تقليل تنظيم مساري ERK وAkt. المجلة الدولية لعلم الأورام، 2019. 54(6): p. 2069-2079.