انتقل إلى الصفحة الرئيسية

خلايا B16 - دليل أساسي لخلايا سرطان الجلد B16 في أبحاث الأورام

B16 هي سلالة خلايا سرطان الجلد (الورم الميلانيني) ذات الأصل الفئراني. وتعد هذه السلالة نموذجًا فعالًا في المختبر لدراسة سرطانات الجلد البشرية. وتستخدم بشكل متكرر لدراسة تكوين الأورام الصلبة وانتشار الخلايا السرطانية.

📋 سلالة الخلايا B16 — حقائق سريعة
وسط النمو
تُزرع خلايا B16 في وسط EMEM (وسط إيجل الأساسي الأدنى) الذي يحتوي على 10٪ من مصل الأبقار الجنينية (FBS). يجب تجديد وسط النمو 2-3 مرات في الأسبوع.
وقت التضاعف
يُقدر متوسط وقت مضاعفة عدد خلايا B16 بـ 24 ساعة.
نوع النمو
خلايا B16 ملتصقة وتنمو في طبقات أحادية.
مستوى السلامة الحيوية
BSL-1
متوفر من
Cytion — طلب B16

ستساعدك هذه المقالة على فهم أساسيات خط الخلايا B16 لسرطان الجلد. وعلى وجه التحديد، ستتناول المقالة ما يلي:

الخصائص العامة وأصل خط الخلايا B16

سيتناول هذا القسم من المقالة السمات المميزة لسلسلة خلايا سرطان الجلد B16. ستتعرف على إجابات الأسئلة المتكررة التالية. مثل: ما هي سلسلة خلايا سرطان B16؟ من أين تستمد خلايا B16؟ ما هو حجم خلايا B16؟

  • تم إنشاء خط الخلايا B16 في عام 1954. وقد تم اشتقاق هذه الخلايا من فئران C57BL/6J التي أصيبت بورم جلدي تلقائيًا في مختبرات جاكسون في ولاية مين.
  • وهي خلايا ظهارية منتجة للميلانين ولديها القدرة على الانتشار في الطحال والكبد والرئتين.
  • تنمو خلايا سرطان الجلد B16 كطبقات أحادية وتظهر مورفولوجيا خلوية شبيهة بالخلايا الظهارية ومغزلية الشكل.
  • يبلغ حجم خط الخلايا B16 حوالي 15.4 ميكرومتر.
  • هناك سلالات فرعية مميزة لخلايا B16، بما في ذلك B16GMCSF وB164A5 وB16FLT3 وB16F10. تختلف هذه السلالات الفرعية عن الخلايا الأم B16 وتحتفظ ببعض السمات المحددة. مثل أنها تمتلك اختلافًا في الشكل وحجم الخلية وخصائص أخرى. تتمتع B16F10 بقدرة عالية على الانتشار في الرئة، وتعد B164A5 أكثر سلالات خلايا سرطان الجلد عدوانية مقارنةً بـ B16F10 و B16-GMCSF و B16FLT3 [1].

رسوم متحركة ثلاثية الأبعاد تُظهر لقطة مقربة لسرطان الجلد في مرحلة النمو، مثل الورم الميلانيني الخبيث، الذي يتسبب في التهاب الأنسجة المحيطة.

معلومات حول زراعة خط الخلايا B16

قبل الحفاظ على خط خلوي أو زراعته، قد تبحث عن معلومات أساسية حول وقت التضاعف، ونوع الخلية، ووسائط النمو، وظروف الزراعة، وما إلى ذلك. يحتوي هذا القسم على جميع المعلومات الضرورية لزراعة خلايا B16.

النقاط الرئيسية لزراعة خلايا B16

وقت تضاعف السكان:

يُقدر متوسط وقت تضاعف عدد الخلايا B16 بـ 24 ساعة.

الالتصاق أو التعليق:

خلايا B16 ملتصقة وتنمو في طبقات أحادية.

كثافة البذر:

يوصى بزراعة خلايا B16 بكثافة تتراوح بين 1 و 2 × 104 خلية/سم2. تُشطف خلايا B16 الملتصقة بمحلول PBS 1 × وتُفصل عن السطح باستخدام محلول Accutase. تُطرد الخلايا، ثم يُعاد تعليق حبيبات الخلايا في وسط النمو. بعد ذلك، يتم نقل هذه الخلايا إلى قارورة جديدة للنمو.

وسط النمو:

تُزرع خلايا B16 في وسط EMEM (وسط إيجل الأساسي الأدنى) الذي يحتوي على 10٪ من مصل الأبقار الجنينية (FBS). يجب تجديد وسط النمو 2-3 مرات في الأسبوع.

ظروف النمو:

يُستخدم حاضن مرطب مع إمداد بنسبة 5٪ من ثاني أكسيد الكربون ودرجة حرارة 37 درجة مئوية لزراعة خط الخلايا B16.

التخزين:

يتم تخزين هذه الخلايا عند درجة حرارة أقل من -150 درجة مئوية أو في المرحلة البخارية للنيتروجين السائل لحماية قابلية الخلايا للحياة.

عملية التجميد والوسط:

يتم استخدام وسط التجميد CM-1 أو CM-ACF لتجميد خلايا B16 باستخدام عملية تجميد بطيئة.

عملية الذوبان:

يتم إذابة خلايا B16 المجمدة عند درجة حرارة 37 درجة مئوية في حمام مائي يحتوي على عامل مضاد للميكروبات. يمكن زراعة الخلايا المذابة مباشرة عن طريق وضعها في قوارير تحتوي على وسط نمو. إلى جانب ذلك، يمكن طرد هذه الخلايا لإزالة مكونات وسط التجميد ثم زراعتها في وسط جديد.

مستوى السلامة الحيوية:

يجب التعامل مع خط الخلايا B16 أو صيانته في مختبر من مستوى السلامة الحيوية الأول.

B16 cells

طبقة شبه متراصة من خلايا سرطان الجلد من نوع B16 تحت التكبير 10x و20x.

سلسلة الخلايا B16: المزايا والعيوب

مثل سلالات الخلايا الأخرى، تتمتع B16 بمزيج فريد من المزايا والعيوب. يتم سرد بعض الإيجابيات والسلبيات المهمة لهذه السلالة الخلوية لسرطان الجلد في هذا القسم.

المزايا

يعد B16 أول أداة فعالة في الفئران تستخدم على نطاق واسع في أبحاث النقائل بسبب المزايا التي يقدمها. فيما يلي بعض مزايا خط الخلايا هذا لسرطان الجلد:

سهولة النمو

يسهل زراعة خط الخلايا B16 في مختبرات الأبحاث. ويستخدم على نطاق واسع لدراسة بيولوجيا الخلايا السرطانية ومسارات الإشارات وغيرها.

نمو سريع

يتميز خط الخلايا B16 لسرطان الجلد بمعدل تكاثر مرتفع، مما يجعله مناسبًا لدراسة عمليات انقسام الخلايا ونموها.

القدرة على تكوين الأورام

B16 هو خط خلوي مسبب للأورام له خصائص شبيهة بالأورام مثل الغزو والهجرة والتكاثر. وهو مفيد لدراسة تكوين الأورام وتطورها وانتشارها.

 

العيوب

العيوب المرتبطة بسلسلة الخلايا B16 هي:

عدم صلته بالإنسان

نظرًا لأن B16 هو خط خلوي لسرطان الجلد لدى الفئران، فقد لا يمثل بدقة بيولوجيا سرطان الجلد البشري، مما يحد من قابلية تطبيق نتائج الأبحاث.

التغاير

تتميز خلايا B16 بالتغاير، حيث تظهر خصائص وراثية وظهورية متنوعة داخل نفس المزرعة. وقد يؤثر ذلك على موثوقية النتائج وقابليتها للتكرار.

 

تطبيقات خلايا B16

يستخدم خط الخلايا B16 على نطاق واسع في الدراسات البحثية. وفيما يلي بعض التطبيقات الواعدة لهذا الخط الخلوي:

  • بيولوجيا الأورام: خط الخلايا هذا لسرطان الجلد في الفئران مسبب للأورام ويستخدم على نطاق واسع لفهم بيولوجيا الأورام. أجريت عدة دراسات لاستكشاف الآليات الخلوية الكامنة وراء نمو الخلايا السرطانية وتكاثرها وانتشارها باستخدام خلايا B16. استخدمت دراسة بحثية أجريت في عام 2020 خلايا B16 للتحقيق في دور الحمض النووي الريبي غير المشفر الطويل، LncRNA MEG3، في تكوين سرطان الجلد ونموه وانتشاره. وقد وجدت هذه الدراسة أن الحمض النووي الريبي غير المشفر ينظم محور miRNA-21/E-Cadherin لتحفيز هذه الأحداث الخلوية [2]. وبالمثل، أُجريت أبحاث لدراسة الدور المحتمل لإشارات Notch1 في تثبيط المناعة الناجم عن الأورام باستخدام خلايا B16 [3].
  • اكتشاف الأدوية: تُستخدم خلايا B16 للتحقق من الآثار العلاجية المحتملة للأدوية المرشحة واختبارها. قيمت دراسة التأثير المضاد للأورام لحمض النيوغامبوجيك، وهو مركب طبيعي، باستخدام خط خلايا B16. كشفت نتائج الدراسة أن هذا المركب ينظم مسار إشارات PI3K/Akt/mTOR لتسبب موت الخلايا السرطانية [4]. بحثت دراسة أخرى في التأثير المضاد للورم الميلانيني لـ Ginsenoside Rg3، وهو مركب من مركبات الصابونين، باستخدام خط الخلايا B16. اقترحت الدراسة أن هذا المركب الطبيعي تسبب في نشاط مضاد للأورام عن طريق تثبيط مسارات ERK وAkt [5].

 

5. المنشورات البحثية التي تتناول خلايا B16

فيما يلي بعض المنشورات البحثية المهمة التي تتناول خط خلايا سرطان الجلد B16.

LncRNA MEG3 يعزز نمو سرطان الجلد وانتشاره وتكوينه من خلال تعديل محور miR-21/E-cadherin

اقترح هذا المنشور في مجلة Cancer Cell International (2020) أن الحمض النووي الريبي الطويل غير المشفر MEG3 يعزز تكوين ونمو وانتشار خلايا سرطان الجلد B16 عن طريق تعديل محور miRNA-21/E-Cadherin.

مشتق جديد من البسورالين - MPFC يعزز تكوين الميلانين عبر تنشيط مسارات إشارات p38 MAPK و PKA في خلايا B16

نُشرت هذه الورقة البحثية في مجلة International Journal of Molecular Medicine في عام 2018. بحثت هذه الدراسة التأثير الميلانيني وآليات مشتق البسورالين 4-methyl-6-phenyl-2H-furo[3,2-g] chromen-2-one (MPFC) في خلايا B16. اقترحت الدراسة أن هذا المشتق يعزز تكوين الميلانين عن طريق تحفيز إشارات الخلايا PKA و p38 MAPK.

عززت إشارات Notch1 في خلايا سرطان الجلد كبت المناعة الناجم عن الورم عن طريق زيادة تنظيم TGF-β1

نُشرت هذه الدراسة في عام 2018 في مجلة Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. تشير نتائج الدراسة إلى أن تنشيط إشارات Notch1 في خلايا B16 قد يمنع المناعة المضادة للأورام عن طريق زيادة تعبير جين TGF-β1.

يحفز حمض النيوغامبوجيك موت الخلايا المبرمج لخلايا سرطان الجلد B16 عبر مسار إشارات PI3K/Akt/mTOR

أجرى هذه الدراسة تشونلان وو وزملاؤه في عام 2020 ونُشرت في مجلة Acta Biochimica Polonica. تشير هذه الدراسة إلى أن حمض النيوغامبوجيك، وهو مركب طبيعي، يمكن أن يتسبب في موت خلايا سرطان الجلد B16 عن طريق تعديل سلسلة إشارات PI3K/Akt/mTOR.

مركب الإيريديوم (III) كعامل قوي مضاد للسرطان يحفز موت الخلايا المبرمج والالتهام الذاتي في خلايا B16 من خلال تثبيط مسار AKT/mTOR

نُشرت هذه الورقة البحثية في مجلة European Journal of Medicinal Chemistry في عام 2018. في هذه الدراسة، بحث الباحثون في النشاط المضاد للسرطان لمركب مركب الإيريديوم (III) باستخدام خلايا سرطان الجلد B16.

يحفز الأيلانثون توقف دورة الخلية وموت الخلايا المبرمج في خلايا سرطان الجلد B16 و A375

اقترحت هذه الدراسة أن مادة أيلانثون النباتية النشطة بيولوجيًا تمتلك إمكانات مضادة للسرطان، حيث يمكنها تحفيز موت الخلايا المبرمج وتوقف دورة الخلية في خلايا سرطان الجلد B16 و A375. نُشرت هذه الورقة البحثية في مجلة Biomolecules في عام 2019.

موارد لسلسلة الخلايا B16: بروتوكولات ومقاطع فيديو والمزيد

تتوفر موارد محدودة حول خط الخلايا B16 تشرح بروتوكولات زراعتها وتحويلها.

فيما يلي بعض بروتوكولات زراعة الخلايا لخلايا B16. 

  • زراعة خلايا B16: يحتوي هذا الموقع على جميع المعلومات اللازمة لزراعة خلايا B16، بما في ذلك وسائط النمو، وإعادة الاستنبات، وإذابة الخلايا، وتجميدها.

المراجع

  1. Danciu, C., et al., سلوك أربعة سلالات فرعية مختلفة من خلايا سرطان الجلد الفئراني B 16: جلد C57 BL/6J. المجلة الدولية لعلم الأمراض التجريبي، 2015. 96(2): ص. 73-80.
  2. Wu, L., et al., LncRNA MEG3 promotes melanoma growth, metastasis and formation through modulating miR-21/E-cadherin axis. Cancer cell international, 2020. 20: p. 1-14.
  3. Yang, Z., et al., إشارات Notch1 في خلايا سرطان الجلد تعزز تثبيط المناعة الناجم عن الورم عن طريق زيادة تنظيم TGF-β1. مجلة أبحاث السرطان التجريبية والسريرية، 2018. 37(1): ص. 1-13.
  4. Wu, C., et al., يحفز حمض Neogambogic موت الخلايا المبرمج لخلايا سرطان الجلد B16 عبر مسار إشارات PI3K/Akt/mTOR. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2): ص. 197-202.
  5. Meng, L., et al., النشاط المضاد للأورام لجينسينوسيد Rg3 في سرطان الجلد من خلال تثبيط مسارات ERK و Akt. المجلة الدولية لعلم الأورام، 2019. 54(6): ص. 2069-2079.

 

لقد اكتشفنا أنك في بلد مختلف أو أنك تستخدم لغة متصفح مختلفة عن اللغة المحددة حاليًا. هل ترغب في قبول الإعدادات المقترحة؟

إغلاق