خلايا P19 - أبحاث سرطان الأجنة باستخدام خلايا P19
P19 هي سلالة خلوية من السرطان الجنيني الفئراني. وتستخدم على نطاق واسع في الأبحاث الطبية الحيوية، ولا سيما لدراسة بيولوجيا النمو، وبيولوجيا الخلايا الجذعية، وتمايز الخلايا، وفحص الأدوية. ونظرًا لأن خلايا P19 تتمتع بقدرة على التمايز، فإنها يمكن أن تكون مفيدة في دراسة العمليات البيولوجية المعقدة مثل تكوين الأنسجة والتطور الجنيني المبكر. في هذه المقالة، سنناقش الأساسيات المتعلقة بخلايا P19 المستمدة من الفئران.
- وسط النمو
- وسط DMEM/Ham's F12 يحتوي على 5% من مصل الأبقار الجنينية، 3.1 غ/لتر من الجلوكوز، و1.6 مليمولار من L-جلوتامين، و1.0 مليمولار من بيروفات الصوديوم، و15 مليمولار من HEPES، و1.2 غ/لتر من NaHCO3 تُستخدم لزراعة خلايا P19.
- زمن التضاعف
- يبلغ وقت التضاعف المبلغ عنه لسلالة الخلايا P19 حوالي 2 إلى 3 أيام.
- نوع النمو
- سلسلة الخلايا السرطانية الجنينية P19 هي خلايا ملتصقة.
- مستوى السلامة الحيوية
- BSL-1
- متوفر من
- Cytion — طلب P19
- الخصائص العامة وأصل خلايا P19
- معلومات حول زراعة خلايا P19
- سلالة الخلايا P19: المزايا والعيوب
- التطبيقات البحثية لخلايا P19
- اشترِ سلالة الخلايا P19 اليوم
- خلايا P19: المنشورات البحثية
- موارد خط الخلايا P19: البروتوكولات ومقاطع الفيديو والمزيد
- استكشاف خط الخلايا P19: الأسئلة الشائعة
- المراجع
- الأسئلة الشائعة
الخصائص العامة وأصل خلايا P19
من الضروري معرفة الخصائص العامة لخط الخلايا وأصله قبل البدء في العمل به. سيغطي هذا القسم ما يلي: ما هو خط الخلايا P19؟ ما هو حجم خلية P19؟ ما هو أصل خلايا P19؟
- P19 هو نوع من الخلايا السرطانية الجنينية متعددة القدرات التي تم الحصول عليها في الأصل من ورم مسخي تطور في فأر من سلالة C3H/He. تم تأسيس خط الخلايا لأول مرة في عام 1982 على يد ماكبرني وروجرز.
- يمكن لخلايا P19 أن تنمو باستمرار في وسط استزراع مُضاف إليه مصل. ويمكن تمييزها إلى أنواع خلوية أخرى عند تعرضها لعقاقير غير سامة مثل حمض الريتينويك وثنائي ميثيل سلفوكسيد (DMSO) [1].
- تتميز خلايا السرطان هذه المأخوذة من الفئران بشكلها الشبيه بالخلايا الظهارية.
- يتميز خط الخلايا P19 بنمط كروموسومي ذكري صحي (n=40؛ XY).
معلومات حول زراعة خلايا P19
يتم استزراع خط الخلايا P19 على نطاق واسع في مختبرات الأبحاث نظرًا لخصائصه الفريدة. ويُعد استزراعه سهلًا وقابلًا للإدارة. وقد تضمن هذا القسم جميع المعلومات الأساسية التي تحتاجها للحفاظ على مزرعة خلايا P19 وتنميتها. سنتعرف على: ما هو زمن مضاعفة خلايا P19؟ كيف يتم استزراع خط الخلايا P19؟ هل P19 خط خلايا ملتصق؟
النقاط الرئيسية لاستزراع خلايا P19
زمن التضاعف:
يبلغ وقت التضاعف المبلغ عنه لسلالة الخلايا P19 ما يقارب 2 إلى 3 أيام.
ملتصقة أم معلقة:
سلسلة الخلايا السرطانية الجنينية P19 هي خلايا ملتصقة.
نسبة إعادة الاستزراع:
يجب إعادة زراعة خلايا P19 كل 48 ساعة، ويجب الحفاظ على نسبة تقسيم تبلغ 1:10 لهذه الخلايا. تُغسل الخلايا الملتصقة بمحلول ملحي فوسفاتي 1X وتُحضن مع Accutase حتى تتفكك الخلايا. تُضاف الخلايا إلى وسط الاستزراع ويتم حصادها عن طريق الطرد المركزي. تُعاد تعليق الخلايا المجمعة بعناية وتُوزع في قوارير جديدة.
وسط النمو:
وسط DMEM/Ham's F12 الذي يحتوي على 5% من مصل الأبقار الجنينية، 3.1 غ/لتر من الجلوكوز، و1.6 مليمولار من L-جلوتامين، و1.0 مليمولار من بيروفات الصوديوم، و15 مليمولار من HEPES، و1.2 غ/لتر من NaHCO3 تُستخدم لزراعة خلايا P19.
ظروف النمو:
يُعد الحاضن المرطب المضبوط على درجة حرارة 37 درجة مئوية مع تزويده بنسبة 5% من ثاني أكسيد الكربون ضروريًا لنمو واستزراع خط الخلايا السرطانية الجنينية P19.
التخزين:
يجب تخزين قوارير خلايا P19 المجمدة عند درجة حرارة أقل من -150 درجة مئوية في مجمد أو في المرحلة البخارية للنيتروجين السائل للحفاظ على حيوية الخلايا على المدى الطويل.
عملية التجميد والوسط:
يمكن استخدام وسط CM-1 أو CM-ACF لتجميد خلايا P19 باستخدام طريقة التجميد البطيء التي تحمي الخلايا من أي صدمة وتحافظ على قابليتها للحياة.
عملية الذوبان:
يمكن إذابة خلايا P19 المجمدة في حمام مائي بدرجة حرارة 37 درجة مئوية عن طريق هز القارورة بسرعة لمدة 40 إلى 60 ثانية. تُضاف الخلايا إلى وسط جديد وتُطرد مركزيًا لإزالة عناصر وسط التجميد. يُعاد تعليق الخلايا مرة أخرى، ثم تُسكب الخلايا في قارورة جديدة للنمو.
مستوى السلامة الحيوية:
يلزم توفير بيئة مختبرية بمستوى السلامة البيولوجية 1 لخط الخلايا P19.
سلسلة الخلايا P19: المزايا والعيوب
سيناقش هذا القسم مزايا وعيوب خط الخلايا P19.
المزايا
- قدرة التمايز: يمكن لخلايا P19 أن تتمايز إلى أنواع مختلفة من الخلايا، بما في ذلك خلايا عضلة القلب، والخلايا العصبية، وخلايا الميكروغليا. وهي تتطلب عقاقير غير سامة للتمايز، مثل حمض الريتينويك وثنائي ميثيل سلفوكسيد (DMSO). يحفز حمض الريتينويك نمو الخلايا العصبية والخلايا الدبقية الصغيرة والخلايا النجمية، بينما يبدأ ثنائي ميثيل سلفوكسيد (DMSO) في تحفيز نمو خلايا عضلة القلب النابضة وخلايا العضلات الملساء. وبالتالي، فإن خلايا P19 مفيدة في دراسة التمايز الخلوي وعمليات النمو.
- نظام نموذجي: يُعد خط الخلايا السرطانية الجنينية متعددة القدرات P19 نموذجًا قيمًا لدراسة التطور الجنيني المبكر. يستخدم الباحثون خلايا P19 لتوضيح مسارات الإشارات الخلوية والآليات الخلوية والجزيئية المشاركة في هذه العمليات.
العيوب
- الأصل الفئراني: P19 هو خط خلايا سرطانية جنينية فئرانية. وبالتالي، قد لا تنطبق النتائج المستخلصة من الدراسات التي تستخدم هذه الخلايا بشكل كامل على بيولوجيا الإنسان وعملياته.
التطبيقات البحثية لخلايا P19
تتمتع خلايا P19 بالعديد من التطبيقات البحثية بفضل قدرتها على التمايز وأهميتها في بيولوجيا النمو وأبحاث الخلايا الجذعية. ومن بين التطبيقات البحثية المهمة لخلايا السرطان الجنيني P19 ما يلي:
- دراسات تمايز الخلايا: كما نعلم، يمكن لخلايا P19 أن تتمايز إلى خلايا عصبية، وخلايا دبقية صغيرة، وخلايا عضلية ملساء، وخلايا عضلة القلب؛ وبالتالي فهي تُستخدم على نطاق واسع لدراسة عمليات تمايز الخلايا. بالإضافة إلى ذلك، تساعد هذه الخلايا في البحث في تطور الجهاز العصبي والقلب والآليات الكامنة وراءهما. وقد وجدت دراسة أُجريت في عام 2018 أن أنواع الأكسجين التفاعلية (ROS) توجه تمايز خلايا P19 إلى أنواع خلوية محددة وتمنع تحفيز أنواع أخرى [3]. استكشفت دراسة أخرى عملية التمايز العصبي التي يتوسطها حمض الريتينويك، ووجدت تورط مسار الإشارة PI3K/Akt/GSK3β [4].
- بيولوجيا النمو: تُعد خلايا P19 نموذجًا لا يُقدَّر بثمن لدراسة النمو الجنيني المبكر. فهي تساعد الباحثين على فهم العمليات البيولوجية المعقدة، مثل تكوين الأنسجة أثناء نمو الجنين. استخدمت الدراسة خلايا P19 ودرست العوامل الجزيئية المساهمة في تكوين عيب الحاجز البطيني (VSD). وكشفت النتائج أن الحمض النووي الريبي غير المشفر الطويل SNHG6 يساهم في حدوث عيب الحاجز البطيني (VSD) من خلال التنظيم السلبي لـ miRNA-101 وتفعيل مسار Wnt/β-catenin [5].
- اختبار الأدوية: تُستخدم سلالة خلايا السرطان الجنينية P19 للفأر أيضًا لفحص الأدوية المرشحة المحتملة. استخدمت إحدى الدراسات خلايا عصبية متمايزة من خط الخلايا P19 وبحثت في التأثيرات الوقائية العصبية المثبطة لإنزيم الأسيتيل كولينستراز، التي يوفرها كل من L-Dopa الاصطناعي والمستخلص المائي لبذور نبات Mucuna pruriens. وأظهرت النتائج أن المستخلص النباتي حقق نتائج واعدة مقارنةً بـ L-Dopa [6].
اشترِ خط الخلايا P19 اليوم
خلايا P19: المنشورات البحثية
سيتناول هذا القسم من المقالة بعض المنشورات البحثية المثيرة للاهتمام التي تتناول خلايا P19.
نُشرت هذه المقالة في مجلة Oncology Reports عام 2017. اقترحت الدراسة أن الهرمونات الجنسية النخامية تحفز الالتصاق والتكاثر والهجرة لخطوط خلايا الورم المسخي، بما في ذلك خلايا P19.
يؤثر الحمض النووي الريبي غير المشفر الطويل uc.4 على تمايز الخلايا من خلال مسار إشارات TGF-beta
استخدمت هذه الدراسة المنشورة في مجلة «Experimental & Molecular Medicine» (2018) خلايا P19 ودرست وظيفة الحمض النووي الريبي الطويل غير المشفر uc.4. وكشفت النتائج أن uc.4 يؤثر على تمايز الخلايا من خلال تعديل مسار إشارات TGF-بيتا.
نُشرت هذه المقالة البحثية في عام 2018 في مجلة هندسة الأنسجة والطب التجديدي. ووجدت الدراسة أن مستخلص الأنسجة الدماغية الطبيعية وزراعة الخلايا ثلاثية الأبعاد يمكن أن تسرع من تمايز خلايا السرطان الجنيني P19 إلى خلايا عصبية.
نُشرت هذه الدراسة في مجلة «علم الأدوية الشعبي» (Journal of Ethnopharmacology) في عام 2020. وأشارت الدراسة إلى أن مستخلص أوراق نبات Cichorium intybus L. يمكنه تحفيز تمايز خلايا السرطان الجنيني P19 لتتحول إلى خلايا بيتا في البنكرياس المنتجة للأنسولين.
نُشرت هذه الدراسة في مجلة «Molecules» (2022). استكشفت هذه الدراسة التأثيرات الوقائية العصبية وتأثيرات تثبيط إنزيم الأسيتيل كولينستراز لمستخلص بذور Mucuna pruriens على الخلايا العصبية من سلالة P19.
موارد حول خط الخلايا P19: بروتوكولات، مقاطع فيديو، والمزيد
فيما يلي بعض الموارد المتعلقة بخلايا P19.
- بروتوكول التمايز العصبي لخلايا P19: تحتوي هذه المقالة على بروتوكول التمايز العصبي لخلايا P19 ومعلومات مفيدة أخرى حول تمايز خلايا P19.
- إدخال الجينات في خلايا P19: سيساعدك هذا الرابط على التعرف على بروتوكول إدخال الجينات في خلايا P19.
يحتوي الرابط التالي على بروتوكول زراعة خلايا P19.
- خلايا P19: يحتوي هذا الموقع على جميع المعلومات المفيدة حول خط الخلايا P19، بما في ذلك ظروف زراعتها، ووسائط خلايا P19، وتقسيم الخلايا، وغير ذلك الكثير.
استكشاف خط الخلايا P19: الأسئلة المتداولة
المراجع
- McBurney, M.W., خلايا السرطان الجنيني P19. Int J Dev Biol, 1993. 37(1): ص. 135-40.
- بريسلر، ج.، وآخرون، سلالة خلايا السرطان الجنيني P19: نموذج لدراسة التفاعلات بين الجينات والبيئة. تقنيات زراعة الخلايا، 2011: ص. 223-240.
- Pashkovskaia, N., U. Gey, and G. Rödel, الجذور الحرة الميتوكوندريالية (ROS) توجه تمايز الخلايا P19 الجذعية المتعددة القدرات في الفئران. أبحاث الخلايا الجذعية، 2018. 30: ص. 180-191.
- فو، ف.، وآخرون، يحفز حمض الريتينويد المتحول بالكامل (All-trans-retinoid acid) تمايز خلايا P19 إلى خلايا عصبية تشارك في مسار إشارات PI3K/Akt/GSK3β. مجلة الكيمياء الحيوية الخلوية، 2020. 121(11): ص. 4386-4396.
- Jiang, Y.، وآخرون، يساهم الحمض النووي الريبي غير المشفر الطويل SNHG6 في تكوين عيب الحاجز البطيني عن طريق التنظيم السلبي لـ miR-101 وتفعيل مسار Wnt/β-catenin. Die Pharmazie - مجلة دولية للعلوم الصيدلانية، 2019. 74(1): ص. 23-28.
- كامكاين، ن.، وآخرون، «المستخلص المائي لبذور Mucuna pruriens يحسّن التأثيرات الوقائية العصبية وتثبيط إنزيم أستيل كولين استيراز مقارنةً بـ L-dopa الاصطناعي». Molecules، 2022. 27(10): ص. 3131.