خلايا NCI-H460 - استكشاف أبحاث سرطان الرئة من خلال رؤى NCI-H460

معلومات حول زراعة خلايا NCI-H460

يجب أن تعرف النقاط الرئيسية التالية من أجل التعامل مع خط الخلايا NCI-H460 وصيانته بشكل سليم. ستزودك هذه المعلومات ببيانات حول زمن مضاعفة NCI-H460، ووسط استزراع NCI-H460، والإجراءات الأساسية لاستزراع خلايا سرطان الرئة NCI-H460.

النقاط الأساسية لاستزراع خلايا NCI-H460

زمن التضاعف:

يبلغ وقت التضاعف لخلايا NCI-H460 حوالي 33 ساعة.

ملتصقة أم معلقة:

خلايا سرطان الرئة NCI-H460 ملتصقة.

نسبة التقسيم:

نسبة التقسيم الموصى بها لسلالة الخلايا NCI-H460 هي 1:2 و1:4. بعد إزالة الوسط القديم، تُشطف الخلايا الملتصقة بمحلول ملحي فوسفاتي 1x. بعد ذلك، تُحضن الخلايا بمحلول Accutase لمدة 8 إلى 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة. تُعاد تعليق الخلايا المنفصلة في وسط استزراع وتُطرد مركزيًا. تُعاد تعليق الخلايا المجمعة مرة أخرى وتُسكب في قارورة جديدة للاستزراع.

وسط النمو:

يُستخدم RPMI 1640 كوسط استزراع لخلايا NCI-H460. ويُضاف إليه 10% من مصل الأبقار الجنينية، و2.1 مليمول/لتر من الجلوتامين المستقر، و2.0 غ/لتر من NaHCO3. يجب استبدال الوسط 2 إلى 3 مرات أسبوعيًا.

ظروف النمو:

تُحفظ مزارع NCI-H460 عند درجة حرارة 37 درجة مئوية في حاضنة مرطبة مع إمداد مستمر بنسبة 5% من ثاني أكسيد الكربون.

التخزين:

يمكن تخزين خلايا سرطان الرئة NCI-H460 في المرحلة البخارية من النيتروجين السائل أو عند درجة حرارة أقل من -150 درجة مئوية في مجمد كهربائي ذي درجة حرارة منخفضة للغاية على المدى الطويل.

عملية التجميد والوسط:

يُستخدم وسط CM-1 أو CM-ACF لتجميد وتخزين خلايا NCI-H460. يُوصى باستخدام طريقة التجميد البطيء للحفاظ على أقصى قدر من حيوية الخلايا.

عملية الذوبان:

تُذوب خلايا NCI-H460 المجمدة في حمام مائي مُسخّن مسبقًا (عند درجة حرارة 37 درجة مئوية) لمدة 40 إلى 60 ثانية حتى يتبقى كتلة جليدية صغيرة. تُضاف إلى الخلايا المذابة وسائط جديدة وتُطرد مركزيًا لإزالة مكونات وسائط التجميد. يُعاد تعليق حبيبات الخلايا المجمعة، وتُوزع الخلايا في قوارير جديدة تحتوي على وسائط للنمو. قد تستغرق خلايا NCI-H460 ما يقرب من 24 ساعة لتلتصق بسطح القارورة.

مستوى السلامة الحيوية:

تتم معالجة خلايا سرطان الرئة NCI-H460 وحفظها في مختبرات ذات مستوى السلامة الحيوية 1.

تاريخ النشر: 2023 | تاريخ آخر مراجعة: مايو 2026

مزايا وعيوب خلايا NCI-H460

يُعد NCI-H460 خط خلايا مستخدمًا على نطاق واسع في أبحاث سرطان الرئة. سيتناول هذا القسم المزايا والعيوب العامة المتعلقة بخلايا سرطان الرئة NCI-H460.

المزايا

تتمثل مزايا خط الخلايا NCI-H460 لسرطان الرئة ذي الخلايا غير الصغيرة في ما يلي:

• أصل الورم

  تم اشتقاق خط الخلايا NCI-H460 من مريض مصاب بسرطان الرئة ذي الخلايا الكبيرة، وهو ما يمثل هذا النوع المحدد من سرطان الرئة. وتُستخدم هذه الخلايا كنموذج لدراسة بيولوجيا سرطان الرئة وتطوير علاجات جديدة وفعالة. تتمتع خلايا NCI-H460 بقدرة على تكوين الأورام ويمكن حقنها في الفئران التي تعاني من نقص المناعة لإنشاء نماذج أورام داخل الجسم الحي لدراسة نمو الورم وتطوره وفعالية الأدوية المحتملة.

• معدلات تكاثر عالية

  يُظهر خط الخلايا NCI-H460 معدلات نمو أعلى من خطوط الخلايا الأخرى لسرطان الرئة ذي الخلايا غير الصغيرة، مثل A549. تزيد هذه الميزة من توافرها وتساعد الباحثين على إجراء تجارب قابلة للتكرار وحساسة للوقت.

العيوب

العيوب المرتبطة بخلايا سرطان الرئة NCI-H460 هي:

• التجانس

  تتميز خلايا NCI-H460 بالتجانس، حيث تم الحصول عليها من ورم مريض واحد. ولذلك، فهي تفتقر عمومًا إلى التعقيد والتباين الملحوظين في أورام المرضى.

التطبيقات البحثية لخلايا NCI-H460

تُستخدم خلايا سرطان الرئة NCI-H460 على نطاق واسع في الدراسات المتعلقة بسرطان الرئة. وفيما يلي بعض التطبيقات البحثية المهمة لخلايا NCI-H460:

• أبحاث سرطان الرئة: تُعد خلايا NCI-H460 نموذجًا لا يُقدر بثمن لدراسة الآليات الخلوية والجزيئية المرتبطة بتطور الورم ونموه وانتشاره. علاوة على ذلك، تُستخدم هذه الخلايا لدراسة مسارات الإشارات الحيوية والأهداف الجزيئية والتحورات الجينية المختلفة المرتبطة بتطور سرطان الرئة. وقد أُجريت عدة دراسات على خلايا NCI-H460 لدراسة هذه العوامل بفعالية. اقترحت دراسة أُجريت في عام 2019 أن بروتين الكازين النووي المنتشر (NUCKS) الذي يُفرز بكميات زائدة، وركيزة الكينازات المعتمدة على السيكلين، يساهمان في نمو الخلايا السرطانية من خلال تنظيم مسار الإشارة PI3K/AKT [1]. وبالمثل، استخدمت دراسة أجريت في المختبر وعلى الكائنات الحية خلايا NCI-H460 لدراسة دور جين eIF4E. وكشفت النتائج أن جين eIF4E يساهم في نمو سرطان الرئة وتكوين الأوعية الدموية، ويمكن استهدافه لتطوير عقاقير واعدة لمكافحة سرطان الرئة [2].
• اكتشاف الأدوية وتطويرها: تُستخدم NCI-H460، وهي سلالة خلوية لسرطان الرئة البشري، على نطاق واسع في دراسات اكتشاف الأدوية وتطويرها. يستخدم الباحثون هذه الخلايا لدراسة سمية وفعالية العقاقير المرشحة الجديدة، والعلاجات الموجهة، والعلاجات التي تستهدف بشكل أساسي طفرات KRAS في NCI-H460. استخدمت دراسة أجراها Haoyue Hu وزملاؤه في عام 2023 خلايا NCI-H460 لدراسة التأثيرات المضادة للسرطان لعقار أنلوتينيب. أظهرت النتائج أن أنلوتينيب أثر جزئيًا على نمو خلايا سرطان الرئة الحاملة لمتلازمة KRAS عن طريق تثبيط سلسلة إشارات MEK/ERK [3]. وبالمثل، تم فحص مركب فينولي، وهو حمض الكارنوسيك، للكشف عن أنشطته المضادة للتكاثر والمحفزة لموت الخلايا المبرمج باستخدام خلايا NCI-H460 [4].
• مقاومة الأدوية: يُعد خط الخلايا NCI-H460 مثاليًّا لدراسة آلية مقاومة سرطان الرئة للأدوية. يستخدم الباحثون هذه الخلايا لتطوير نماذج لمقاومة الأدوية من أجل تحديد الجينات والعوامل الجزيئية ومسارات الإشارة الكامنة وراءها. على سبيل المثال، طورت إحدى الدراسات خلايا NCI-H460 المقاومة لعقار بيميتريكسيد، وهو عامل مضاد للفولات متعدد الأهداف، لدراسة الآليات الجزيئية الكامنة وراء مقاومة بيميتريكسيد في خلايا سرطان الرئة ذات الخلايا غير الصغيرة [5].

المنشورات البحثية التي تتناول خلايا NCI-H460

فيما يلي بعض المنشورات البحثية المثيرة للاهتمام حول سلالة خلايا سرطان الرئة NCI-H460.

جلوكان طبيعي مستخلص من الفاصوليا السوداء يثبط تكاثر الخلايا السرطانية عبر مسار PI3K-Akt و MAPK

اقترحت هذه الدراسة المنشورة في مجلة Molecules (2023) أن الجلوكان الطبيعي α-1,6-glucan، BBWPW، المستخلص من الفاصوليا السوداء يثبط تكاثر خلايا NCI-H460 عن طريق تنظيم مسار PI3K/AKT/MAPK.

يُثبط ديوسين-6′-أو-أسيتات تكاثر خلايا سرطان الرئة عن طريق تحفيز توقف دورة الخلية وموت الخلايا المبرمج المعتمد على الكاسباز

بحثت هذه المقالة المنشورة في مجلة «Phytomedicine» (2019) في أن مركب ديوسكين-6′-أو-أسيتات، وهو مركب طبيعي جديد، يمارس تأثيرًا مضادًا للتكاثر على خلايا سرطان الرئة NCI-H460.

يعزز miRNA-425-5p نمو سرطان الرئة عبر محور الإشارة PTEN/PI3K/AKT

تشير دراسة نشرت في مجلة BMC Pulmonary Medicine (2020) إلى أن الميكرو آر إن إيه-425-5p يعزز تكوين أورام سرطان الرئة عبر مسار PTEN/PI3K/AKT.

يُحدث الكيناليزارين تأثيرًا مضادًا للأورام على خلايا سرطان الرئة A549 من خلال تعديل مسارات الإشارة Akt وMAPK وSTAT3 وp53

اقترح هذا المقال المنشور في مجلة «Molecular Medicine Reports» (2017) الإمكانات المضادة للأورام والآليات الكامنة وراء مركب الكيناليزارين في خلايا NCI-H460 وخلايا سرطان الرئة الأخرى.

يُثبط مستخلص مغلي نبات Eucalyptus globulus Labill. نمو خلايا NCI-H460 عن طريق زيادة مستويات p53 وتغيير نمط دورة الخلية

يُسلط هذا البحث المنشور في مجلة «Food and Function» (2019) الضوء على التأثير المضاد للسرطان المحتمل لمستخلص Eucalyptus globulus labill. باستخدام خلايا NCI-H460. وأظهرت النتائج أن المستخلص النباتي أظهر هذه التأثيرات من خلال زيادة التعبير الجيني لـ p53 في خلايا NCI-H460 وتعديل نمط دورة الخلية.

موارد حول خط الخلايا NCI-H460: بروتوكولات ومقاطع فيديو والمزيد

فيما يلي بعض الموارد المتاحة عبر الإنترنت التي تتناول خلايا سرطان الرئة NCI-H460.

• إدخال الجينات في خلايا NCI-H460: هذا الفيديو التعليمي هو دليل تفصيلي خطوة بخطوة لإدخال الجينات في خلايا NCI-H460 باستخدام الحمض النووي البلازميدي.

تحتوي الروابط التالية على معلومات أساسية حول زراعة الخلايا H460. 

• خلايا NCI-H460: سيوفر هذا الموقع معلومات مهمة حول وسائط الخلايا NCI-H460 وإجراءات إعادة الاستنبات والتجميد والذوبان.
• إعادة زراعة خلايا NCI-H460: سيرشدك هذا المستند إلى كيفية إعادة زراعة خط الخلايا NCI-H460 وإجراء الزراعة الفرعية. بالإضافة إلى ذلك، سيساعدك أيضًا على تعلم بروتوكول التحويل الجيني لخلايا NCI-H460.

المراجع

1. Hu, C.، وآخرون، NUCKS يعزز تكاثر خلايا سرطان الرئة وهجرتها وغزوها عبر مسار إشارات Pi3k/Akt. Clinical and Investigative Medicine، 2021. 44(2): ص. E55-61.
2. Qi, X.، وآخرون، EGPI-1، وهو مثبط جديد للتفاعل بين eIF4E وeIF4G، يثبط نمو خلايا سرطان الرئة وتكوين الأوعية الدموية عبر مسار إشارات Ras/MNK/ERK/eIF4E. التفاعلات الكيميائية-البيولوجية، 2022. 352: ص. 109773.
3. Hu, H.، وآخرون، يُحدث Anlotinib تأثيرات مضادة للسرطان على خلايا سرطان الرئة التي تحمل طفرة KRAS من خلال تثبيط مسار MEK/ERK. إدارة السرطان والبحوث، 2020: ص. 3579-3587.
4. Corveloni, A.C.، وآخرون، يُظهر حمض الكارنوزيك تأثيرات مضادة للتكاثر ومحفزة للاستماتة في خلايا الرئة الورمية NCI-H460 والخلايا غير الورمية IMR-90. مجلة علم السموم والصحة البيئية، الجزء أ، 2020. 83(10): ص. 412-421.
5. Xu, Y.-L.، وآخرون، إنشاء وتوصيف خلايا NCI-H460/PMT المقاومة للبيميتريكسيد. العوامل المضادة للسرطان في الكيمياء الطبية (المعروفة سابقًا باسم الكيمياء الطبية الحالية - العوامل المضادة للسرطان)، 2019. 19(6): ص. 731-739.