خلايا NCI-H1299: الأبحاث والآثار السريرية لخلايا سرطان الرئة NCI-H1299
NCI-H1299 هو خط خلوي بشري مُخلَّد لسرطان الرئة ذي الخلايا غير الصغيرة، ويُستخدم على نطاق واسع في أبحاث علم الأورام المناعي، وأبحاث السرطان، واكتشاف الأدوية. علاوة على ذلك، استخدم الباحثون هذه الخلايا لدراسة حساسية الأدوية ومسارات الإشارات الكامنة والآليات الجزيئية المرتبطة بسرطان الرئة. كما تُستخدم هذه الخلايا لدراسة العدوى الفيروسية مثل فيروس SARS-CoV-2.
- وسط النمو
- يُعد RPM1 1640 وسطًا مثاليًّا لخط الخلايا NCI-H1299. يتم استكماله بـ 10٪ من مصل الأبقار الجنينية، و4500 مجم/لتر من الجلوكوز، و2.0 مليمولار من L-الجلوتامين، و1 مليمولار من بيروفات الصوديوم، و1500 مجم/لتر من NaHCO3، و10 مليمولار من HEPES. يجب تجديد الوسط كل 2 إلى 3 مرات في الأسبوع.
- زمن التضاعف
- يتراوح وقت تضاعف خلايا NCI-H1299 بين 22 و30 ساعة.
- نوع النمو
- NCI-H1299 هو خط خلوي ملتصق.
- مستوى السلامة البيولوجية
- BSL-1
- متوفر من
- Cytion — طلب NCI-H1299
- الخصائص العامة وأصل خلايا NCI-H1299
- معلومات حول الاستزراع
- شراء خط الخلايا NCI-H1299: أدوات بحثية عالية الجودة لدراسة بيولوجيا سرطان الرئة
- مزايا وعيوب خلايا NCI-H1299
- التطبيقات البحثية لخلايا NCI-H1299
- المنشورات البحثية التي تتناول خلايا NCI-H1299
- موارد خط الخلايا NCI-H1299: البروتوكولات ومقاطع الفيديو والمزيد
- الأسئلة الشائعة حول خط الخلايا NCI-H1299
- المراجع
- الأسئلة المتكررة
الخصائص العامة وأصل خلايا NCI-H1299
أول ما يجب معرفته عن أي سلالة خلوية هو أصلها وخصائصها العامة، حيث تساعدك هذه المعلومات في تحديد كيفية استخدامها في أبحاثك. سيساعدك هذا القسم من المقالة في التعرف على بعض المعلومات المهمة حول أصل وخصائص NCI-H1299. مثل: ما هي خلايا سرطان الرئة NCI-H1299؟ ما نوع الخلايا NCI-H1299؟ ما حجم خلايا NCI-H1299؟ ما الفرق بين A549 و NCI-H1299؟
- نشأ خط الخلايا NCI-H1299 من ورم خبيث في العقدة الليمفاوية في الرئة لمريض أبيض البشرة يبلغ من العمر 43 عامًا مصاب بالسرطان.
- تتميز هذه الخلايا بحذف جزئي متماثل في جين p53؛ وبالتالي، فإنها لا تعبر عن بروتين p53. ويساهم عدم التعبير عن بروتين p53 في خلايا NCI-H1299 في الميل التكاثري لخلايا سرطان الرئة H1299.
- بالإضافة إلى p53، يُذكر أن هذه الخلايا المُخلَّدة تحمل طفرة KRAS في NCI-H1299، وهي المسؤولة عن خصائص النمو والتكاثر والهجرة والغزو التي تتميز بها.
- النمط الكروموسومي لخلايا NCI-H1299 قريب من النمط ثنائي الصبغيات.
- تتميز خلايا NCI-H1299 بمورفولوجيا تشبه الخلايا الظهارية.
- هذه الخلايا مسطحة ويبلغ سمكها أقل من 5 ميكرومتر.
NCI-H1299 و A549
NCI-H1299 و A549 هما سلالتان خلويتان لسرطان الرئة غير صغير الخلايا. تتميز خلايا NCI-H1299 بأنها أكثر عدوانية وحساسية مقارنة بخلايا A549. وكلاهما يحمل طفرات متشابهة نسبيًا، مثل KRAS. ومع ذلك، وعلى عكس خلايا NCI-H1299، فإن خلايا A549 تعبر عن جين P53.
معلومات حول زراعة الخلايا
ليس من السهل الحفاظ على استزراع خط خلوي ما لم تكن على دراية بجميع المعلومات الأساسية المتعلقة به، بما في ذلك: ما هو زمن التضاعف لـ NCI-H1299؟ ما هي كثافة البذر لـ NCI-H1299؟ ما هي وسط استزراع خلايا NCI-H1299؟ كيف يتم استزراع سلالات خلايا NCI-H1299؟ سيساعدك هذا القسم في معرفة إجابات جميع هذه الأسئلة المتعلقة باستزراع خلايا NCI-H1299.
النقاط الرئيسية لزراعة خلايا NCI-H1299
زمن التضاعف:
يتراوح زمن التضاعف لخلايا NCI-H1299 بين 22 و30 ساعة.
الخلايا الملتصقة أم المعلقة:
NCI-H1299 هي سلالة خلوية ملتصقة.
نسبة إعادة الاستزراع:
تُزرع خلايا NCI-H1299 بنسبة موصى بها تتراوح بين 1:3 و1:6. للزراعة، تُغسل الخلايا الملتصقة بمحلول PBS 1x وتُحضن مع محلول Accutase لمدة 8 إلى 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة. تُضاف الخلايا المنفصلة إلى وسط استزراع طازج وتُطرد مركزيًا. ثم يُعاد تعليق حبيبات الخلايا، وتُسكب الخلايا في قوارير جديدة تحتوي على وسط نمو.
وسط النمو:
يُعد RPM1 1640 وسطًا مثاليًّا لخلايا NCI-H1299. يتم إضافته إلى 10% من مصل الأبقار الجنينية، و4500 مجم/لتر من الجلوكوز، و2.0 مليمول/لتر من L-الجلوتامين، و1 مليمول/لتر من بيروفات الصوديوم، و1500 مجم/لتر من NaHCO3، و10 مليمول/لتر من HEPES. يجب تجديد الوسط كل 2 إلى 3 مرات في الأسبوع.
ظروف النمو:
تُحفظ مزارع خلايا سرطان الرئة NCI-H1299 في حاضنة مرطبة عند درجة حرارة 37 درجة مئوية مع تزويدها بنسبة 5% من ثاني أكسيد الكربون.
التخزين:
يمكن تخزين خط الخلايا NCI-H1299 في المرحلة البخارية من النيتروجين السائل أو في مجمدات ذات درجة حرارة منخفضة جدًا تقل عن -150 درجة مئوية على المدى الطويل.
عملية التجميد والوسط:
CM-1 أو CM-ACF هما وسطا تجميد خلايا NCI-H1299. تُجمَّد الخلايا باستخدام عملية تجميد بطيئة لا تسمح بانخفاض درجة الحرارة إلا بمقدار درجة واحدة في الدقيقة لحماية قابلية الخلايا للحياة.
عملية الذوبان:
تُقلب الخلايا المجمدة من سلالة NCI-H1299 بسرعة في حمام مائي مُسخّن مسبقًا عند درجة حرارة 37 درجة مئوية لمدة تتراوح بين 40 و60 ثانية حتى يتبقى قطعة صغيرة من الجليد. تُضاف الخلايا المذابة إلى وسط جديد ويمكن زراعتها مباشرةً في قوارير جديدة أو طردها مركزيًا. في الحالة الأولى، يجب استبدال الوسط بعد 24 ساعة من الحضانة. يساعد الطرد المركزي على إزالة عناصر وسط التجميد. بعد ذلك، تُعاد تعليق الخلايا المجمعة في وسط جديد وتُوزَّع في القارورة الجديدة للزراعة.
مستوى السلامة الحيوية:
يلزم وجود مختبر من مستوى السلامة البيولوجية 1 للتعامل مع مزرعة الخلايا NCI-H1299.
شراء خط الخلايا NCI-H1299: أدوات بحثية عالية الجودة لدراسة بيولوجيا سرطان الرئة
مزايا وعيوب خلايا NCI-H1299
مثل سلالات الخلايا السرطانية البشرية الأخرى، تتمتع خلايا NCI-H1299 أيضًا ببعض الخصائص المميزة المرتبطة بمزايا وعيوب محددة. وفيما يلي، قمنا بتلخيص بعض أهمها.
المزايا
المزايا الرئيسية لسلالة خلايا سرطان الرئة غير الصغيرة NCI-H1299 هي:
-
نموذج سرطان الرئة في المختبر
تم تطوير سلالات الخلايا NCI-H1299 من ورم خبيث في العقد الليمفاوية ناجم عن سرطان الرئة، وبالتالي فهي تتمتع بخصائص متشابهة نسبيًا. ولذلك، يمكن استخدام هذه الخلايا كنموذج مختبري لدراسة بيولوجيا سرطان الرئة والآليات الخلوية والجزيئية، وكذلك لفحص واختبار العلاجات المحتملة.
-
سهولة الاستزراع
تتميز خلايا NCI-H1299 بسهولة زراعتها وصيانتها في مختبر الأبحاث. ولا توجد متطلبات أو إجراءات معقدة لزراعة الخلايا.
-
طفرات P53 وKRAS في خلايا NCI-H1299
تفتقر خلايا NCI-H1299 إلى التعبير الجيني لـ p53، مما يسمح للخلايا بالتكاثر بقوة. علاوة على ذلك، فإنها تحمل طفرة KRAS التي تساهم في نمو الخلايا وتكاثرها وغزوها وهجرتها. وبالنظر إلى ذلك، يستخدم الباحثون خلايا H1299 لدراسة الآليات الجزيئية ذات الصلة بطفرات KRAS وP53.
العيوب
عيوب خلايا NCI-H1299 هي:
-
خصوصية النسيج
نشأت خلايا NCI-H1299 من نسيج الرئة. ولذلك، فإن قابليتها للتطبيق تقتصر في الغالب على أبحاث سرطان الرئة. وقد لا تمثل بشكل كامل التباين والخصائص العامة لأنواع السرطان الأخرى.
التطبيقات البحثية لخلايا NCI-H1299
يُستخدم خط الخلايا NCI-H1299 على نطاق واسع في أبحاث سرطان الرئة. وفيما يلي بعض التطبيقات الواعدة لهذا الخط الخلوي.
- بيولوجيا السرطان: تُعد خلايا NCI-H1299 أداة بحثية رائعة لدراسة تطور السرطان وتقدمه والآليات الخلوية والجزيئية المرتبطة به. تتميز هذه الخلايا بوجود طفرات معينة، مما يتيح للباحثين استكشاف سلوكيات الخلايا السرطانية ذات الصلة ومسارات الإشارات وملامح التعبير الجيني. وقد استخدمت عدة دراسات خط الخلايا NCI-H1299 لسرطان الرئة ذي الخلايا غير الصغيرة لدراسة بيولوجيا سرطان الرئة. على سبيل المثال، بحثت دراسة أُجريت في عام 2018 في مسار الإشارة المتورط في موت الخلايا المبرمج لخلايا سرطان الرئة باستخدام خلايا NCI-H1299. ووجد الباحثون أن مسار PI3K/AKT يساهم في تكاثر الخلايا، وأن تثبيطه يمكن أن يؤدي إلى موت الخلايا السرطانية [1]. وبالمثل، بحثت دراسة أخرى في الآليات المرتبطة بالانتقال الظهاري إلى اللحمي (EMT) في خط الخلايا NCI-H1299. اقترحت هذه الدراسة أن البروتين خارج الخلية SPARC (بروتين مفرز حمضي وغني بالسيستين) يساهم في الانتقال الظهاري إلى اللحمي (EMT) لخلايا NCI-H1299 وهجرتها، وبالتالي يعزز تكوين الأورام في الخلايا — حيث يعمل بروتين SPARC كوسيط لإشارات TGF-β1 [2].
- اكتشاف الأدوية وفحصها: تُستخدم سلالة خلايا سرطان الرئة البشرية NCI-H1299 على نطاق واسع لتقييم سمية وفعالية الأدوية المحتملة. بالإضافة إلى ذلك، يستخدمها الباحثون لدراسة آلية عمل الأدوية المضادة للأورام. كما استخدمت الدراسات هذه الخلايا لتحديد الأهداف الدوائية المحتملة وآليات المقاومة. على سبيل المثال، بحثت دراسة أجراها شياو-يون شين وزملاؤه في الإمكانات المضادة للسرطان للمركب الطبيعي بروسين D (BD). وكشفت النتائج أن BD يعيق بشكل كبير تكاثر خلايا NCI-H1299 وغزوها وهجرتها. وبالتالي، يمكن اعتباره علاجًا مساعدًا محتملاً لعلاج سرطان الرئة ذي الخلايا غير الصغيرة [3]. وبالمثل، قيمت دراسة التأثيرات السامة للخلايا التي يسببها مركب الزانثوهومول بمفرده وبالاشتراك مع عقار العلاج الكيميائي سيسبلاتين على خلايا سرطان الرئة NCI-H1299 [4].
المنشورات البحثية التي تتناول خلايا NCI-H1299
فيما يلي بعض المنشورات البحثية المهمة والأكثر استشهاداً بها حول سلالة خلايا سرطان الرئة NCI-H1299.
نُشرت هذه المقالة في مجلة Human and Experimental Toxicology (2021). اقترحت الدراسة أن الإندول-3-كاربينول يحفز موت الخلايا المبرمج في خط الخلايا H1299 عن طريق رفع مستويات أنواع الأكسجين التفاعلية (ROS).
نُشرت هذه الدراسة في عام 2018 في مجلة «Cellular Physiology and Biochemistry». وكشفت نتائج البحث أن الجمع بين حمض الكافيين وباكليتاكسيل يُحدث تأثيرًا تآزريًا مضادًا للسرطان في خط خلايا سرطان الرئة غير صغير الخلايا NCI-H1299.
نُشرت هذه المقالة البحثية في مجلة «تقارير الطب الجزيئي» (Molecular Medicine Reports) (2018). قيمت الدراسة التأثير المضاد للأورام لمركب «توبيموسيد-1»، وهو صابونين تريتيربينويد، والآليات الكامنة وراءه في خط الخلايا NCI-H1299.
يحفز بريستيميرين موت الخلايا المبرمج (الأبوبتوسيس) ويثبط تكاثر وهجرة خلايا سرطان الرئة H1299
اقترحت هذه المقالة، التي نُشرت في مجلة «Journal of Cancer» (2020)، أن مركب بريستيميرين، وهو مركب طبيعي، يثبط تكاثر خلايا NCI-H1299 وهجرتها.
آلية تنظيم جين VIPR1 لخلايا سرطان الرئة الغدي البشري H1299
استكشفت هذه الدراسة المنشورة في مجلة «Medical Oncology» (2019) الآثار المحتملة لفرط التعبير الجيني لـ VIPR1 على خط الخلايا السرطانية الغدية NCI-H1299.
موارد خط الخلايا NCI-H1299: بروتوكولات ومقاطع فيديو والمزيد
فيما يلي بعض الموارد المتاحة عبر الإنترنت التي تتناول خلايا NCI-H1299.
- إدخال الجينات في NCI-H1299: يشرح هذا الفيديو بروتوكول الإدخال المؤقت للجينات في سلالات الخلايا NCI-H1299.
- إعادة زراعة خط خلوي ملتصق: سيساعدك هذا الفيديو على تعلم الإجراء العام لإعادة زراعة خط خلوي ملتصق.
يحتوي الرابط التالي على معلومات حول زراعة الخلايا NCI-H1299.
- سلالة الخلايا NCI-H1299: يمكن أن يساعدك هذا الرابط في التعرف على بروتوكول تمرير الخلايا NCI-H1299 وبروتوكول التحويل الجيني.
الأسئلة المتداولة حول خط الخلايا NCI-H1299
المراجع
- Gu, J.، وآخرون، دراسة حول موت الخلايا المبرمج الذي يسببه EGCG في خلايا سرطان الرئة عن طريق تثبيط مسار إشارات PI3K/Akt. Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci، 2018. 22(14): ص. 4557-4563.
- Sun, W.، وآخرون، يعمل SPARC كوسيط لـ TGF‐β1 في تعزيز الانتقال الظهاري إلى اللحمي في خلايا سرطان الرئة A549 و H1299. Biofactors، 2018. 44(5): ص. 453-464.
- شين، إكس.-ي.، وآخرون، دراسة حول آلية عمل مادة البروسين دي في علاج خلايا سرطان الرئة غير الصغيرة H1299. المجلة العالمية للطب الصيني التقليدي، 2020. 6(4): ص. 500.
- لونغ، ب.، وآخرون، «التأثيرات السامة للخلايا لـ Xanthohumol وتأثيره عند استخدامه مع السيسبلاتين على خلايا سرطان الرئة البشري المنتشر H1299». مجلة التقدم في الطب والبحوث الطبية، 2019. 30(9): ص. 1-15.