سلسلة الخلايا BxPC-3
BxPC-3 هو خط خلايا سرطان البنكرياس المستمد من الإنسان. ويستخدم على نطاق واسع في دراسات السرطان. يستخدم الباحثون هذه الخلايا بشكل أساسي لدراسة بيولوجيا سرطان البنكرياس، وتحديد الأهداف العلاجية، وتطوير الأدوية المضادة للسرطان.
- وسط النمو
- يُستخدم وسط RPMI 1640 لزراعة خط الخلايا BxPC-3. ويُضاف إليه 10% من مصل الأبقار الجنينية، و2.1 مليمول/لتر من الجلوتامين المستقر، و2.0 غرام/لتر من NaHCO3 لتحقيق النمو المثالي للخلايا. يجب استبدال الوسط 2 إلى 3 مرات أسبوعيًا.
- وقت التضاعف
- يتراوح وقت مضاعفة خلايا BxPC-3 بين 48 و60 ساعة.
- نوع النمو
- BxPC-3 هو خط خلوي ملتصق.
- مستوى السلامة الحيوية
- BSL-3
- متوفر من
- Cytion — طلب BxPC-3
تتضمن هذه المقالة معلومات مهمة عن خط الخلايا BxPC-3 يمكن أن تساعدك بشكل كبير في العمل معه. وستناقش بشكل أساسي:
- معلومات عامة وأصل خط الخلايا BxPC-3
- استزراع خلايا BxPC-3
- سلسلة الخلايا BxPC-3: المزايا والقيود
- تطبيقات خلايا BxPC-3 في الأبحاث
- المنشورات البحثية حول خلايا BxPC-3
- موارد خط الخلايا BxPC-3: بروتوكولات ومقاطع فيديو والمزيد
معلومات عامة وأصل خط الخلايا BxPC-3
إن معرفة أصل خط الخلايا أمر بالغ الأهمية لتطبيقه في الأبحاث. إن الإلمام بخصائصه، بما في ذلك الشكل وحجم الخلية وعدد الصبغيات، يجعل استخدامه أكثر سهولة وملاءمة. في هذا المقال، ستتعرف على أصل وخصائص خلايا BxPC-3 العامة: ما هي خلايا BxPC-3؟ ما هو خط الخلايا BxPC-3؟ ما هو أصل خط الخلايا BxPC-3؟ ما هو شكل خلايا BxPC-3؟
- BxPC-3، خلايا سرطان البنكرياس البشري المستمدة من امرأة أوروبية تبلغ من العمر 61 عامًا مصابة بسرطان الغدة البنكرياسية في عام 1986. تم تأكيد أن هذه الخلايا مسببة للأورام حتى بعد خضوع المريضة لعدة جلسات من العلاج الإشعاعي والكيميائي. وبالتالي، فإن خط الخلايا هذا يعد نموذجًا لا يقدر بثمن لدراسة تطور السرطان وتقدمه.
- تتميز خلايا BxPC-3 بمورفولوجيا تشبه الخلايا الظهارية.
- يبلغ العدد الكروموسومي النموذجي لـ BxPC-3 59. تحتوي هذه الخلايا على حذف متماثل في الكروموسوم 18q، الذي يشفر لبروتين SMAD4/DPC4. إلى جانب ذلك، يفتقر خط الخلايا إلى طفرة BxPC-3 kras الشائعة بين أورام البنكرياس. كما يوجد حذف BxPC-3 braf في خلايا سرطان البنكرياس هذه.
ما الفرق بين BxPC3 و PANC-1؟
خلايا BxPC-3 PADC (سرطان الغدة البنكرياسية القنوي) و PANC-1 هي سلالات خلوية أولية لسرطان البنكرياس ذات شكل ظهاري. وفي هذا الصدد، تمتلك الخلايا الأولى خصائص تشبه الخلايا الظهارية بشكل أكبر، في حين تظهر الخلايا الثانية سمات ليفية أكثر [1].
استزراع خلايا BxPC-3
يستخدم خط الخلايا BxPC-3 على نطاق واسع في مختبرات أبحاث السرطان. تحتاج إلى معرفة النقاط الرئيسية التالية من أجل زراعة خط خلايا سرطان البنكرياس هذا بكفاءة. سوف تتعلم: ما هو وقت التضاعف لـ bxpc3؟ كيف تزرع خط الخلايا BxPC-3؟
النقاط الرئيسية لزراعة خلايا BxPC-3
زمن مضاعفة العدد:
يتراوح وقت تضاعف خلايا BxPC-3 بين 48 و60 ساعة.
ملتصقة أم معلقة:
BxPC-3 هو خط خلايا ملتصقة.
نسبة الانقسام:
تُزرع خلايا BxPC-3 بنسبة تتراوح بين 1:2 و1:4. تُغسل الخلايا بمحلول PBS 1x وتُحضن بمحلول تمرير يُسمى أكوتاز. بعد 8-10 دقائق، تُضاف وسائط جديدة إلى الخلايا، وتُطرد الخلايا. يتم إعادة تعليق الحبيبات في الوسط، وتُسكب الخلايا في وعاء استزراع جديد للنمو.
وسط النمو:
يُستخدم وسط RPMI 1640 لزراعة خط الخلايا BxPC-3. ويُضاف إليه 10% من مصل الأبقار الجنينية، و2.1 مليمول/لتر من الجلوتامين المستقر، و2.0 غرام/لتر من NaHCO3 لتحقيق النمو المثالي للخلايا. يجب استبدال الوسط 2 إلى 3 مرات في الأسبوع.
ظروف النمو:
يتم الحفاظ على مزارع الخلايا BxPC-3 في حاضنة مرطبة بدرجة حرارة 37 درجة مئوية ومتصلة بمصدر CO2 بنسبة 5٪.
التخزين:
يتم تخزين الخلايا المجمدة عمومًا عند درجة حرارة أقل من -150 درجة مئوية أو في المرحلة البخارية للنيتروجين السائل لحماية قابلية الخلايا للحياة.
عملية التجميد والوسط:
يمكن استخدام CM-1 أو CM-ACF لتجميد مزارع الخلايا BxPC-3. يتم اتباع عملية تجميد بطيئة لا تسمح بانخفاض درجة الحرارة إلا بمقدار 1 درجة مئوية لمنع تعرض الخلايا لأي صدمة.
عملية الذوبان:
يتم إذابة الخلايا BxPC-3 المجمدة في حمام مائي محدد مسبقًا بدرجة حرارة 37 درجة مئوية لمدة 40 إلى 60 ثانية. بعد ترك كتلة صغيرة من الجليد، تضاف الخلايا إلى وسط استزراع جديد وتُطرح في جهاز الطرد المركزي لإزالة عناصر وسط التجميد. بعد ذلك، يُعاد تعليق حبيبات الخلايا، وتُوزع الخلايا في القارورة للنمو.
مستوى السلامة الحيوية:
يتم الحفاظ على مزارع الخلايا BxPC-3 في مختبرات ذات مستوى أمان بيولوجي 1.
سلسلة الخلايا BxPC-3: المزايا والقيود
BxPC-3 هو خط خلوي معروف لسرطان الغدة البنكرياسية الغدي، ويرتبط بعدة مزايا وقيود. فيما يلي قائمة بالمزايا والعيوب الرئيسية لهذا الخط الخلوي.
المزايا
المزايا الرئيسية لخلايا BxPC-3 هي:
-
نموذج مختبري لسرطان البنكرياس
تُظهر خلايا BxPC-3، المستمدة من مرضى سرطان الغدة البنكرياسية الغدي، خصائص ذات صلة، مما يجعلها نموذجًا مناسبًا لدراسة سلوك سرطان البنكرياس في المختبر.
-
سلسلة خلايا مسببة للأورام
تمتلك خلايا BxPC-3 خصائص مسببة للأورام ويمكنها تكوين أورام عند حقنها في فئران عارية أو فئران تعاني من ضعف في جهاز المناعة. تشبه هذه الأورام إلى حد كبير أورام سرطان الغدة البنكرياسية الأولية، مما يجعل نموذج الزرع الغريب BxPC-3 مثاليًا لدراسة نمو السرطان وتطوره.
القيود
القيود المرتبطة بسلسلة الخلايا BxPC-3 هي:
-
التلوث المتبادل
تحمل سلالة الخلايا BxPC-3، مثل أي سلالة أخرى، خطر التلوث المتبادل. يجب على الباحثين توخي الحذر والالتزام ببروتوكولات صارمة لمنع التلوث عند التعامل مع هذه الخلايا.
-
معدل نمو بطيء
تتميز خلايا BxPC-3 بمعدل تكاثر بطيء نسبيًا، حيث يتراوح وقت التضاعف بين 48 و60 ساعة. قد تتطلب هذه الخاصية فترات حضانة أطول لتجارب معينة، مما قد يتسبب في تأخير تقدم البحث.
تطبيقات خلايا BxPC-3 في الأبحاث
تقدم خلايا BxPC-3 العديد من التطبيقات في أبحاث السرطان. وأكثر التطبيقات شيوعًا هي:
- أبحاث سرطان البنكرياس: تحاكي خلايا BxPC-3 سرطان الغدة البنكرياسية، وبالتالي تُستخدم لاستكشاف الآليات الجينية والجزيئية الكامنة وراء تطور الورم ونموه. بالإضافة إلى ذلك، يكتشف الباحثون علامات بيولوجية جديدة وأهدافًا علاجية باستخدام هذه الخلايا. علاوة على ذلك، تعبر خلايا BxPC-3 بشكل كبير عن عوامل تكوين الأوعية الدموية، مثل الإنترلوكين-8 (IL-8) والبروستاجلاندين E2 (PGE2) وعامل نمو بطانة الأوعية الدموية (VEGF)، مما يجعلها مناسبة لدراسة تكوين الأوعية الدموية. وفي هذا السياق، يعد تكوين الأوعية الدموية عملية حاسمة مرتبطة بنمو السرطان وانتشاره. وقد أظهرت دراسة نُشرت في عام 2022 أن الإفراط في التعبير عن لامينين-5 جاما-2 (LAMC2) في BxPC3 PDAC (سرطان الغدة البنكرياسية القنوي) يعزز تكوين الأورام من خلال تنظيم مسار إشارات BxPC3 EGFR /ERK1/2/ AKT/ mTOR [2].
- اكتشاف الأدوية وتطويرها: يُعد خط الخلايا BxPC-3 نموذجًا لا يُقدر بثمن لاختبار الأدوية المضادة للسرطان. يدرس الباحثون التأثيرات السامة للخلايا والمضادة للانتشار والمسببة لموت الخلايا المبرمج للأدوية المحتملة على سرطان القنوات البنكرياسية (PDAC) BxPC3. استكشفت دراسة أجراها ألكسندريا تيرنر وزملاؤها في عام 2020 الخصائص المسببة لموت الخلايا المبرمج لمستخلصات فاكهة Elaeocarpus reticulatus في خلايا سرطان البنكرياس BxPC-3 [3]. وبالمثل، أُجريت دراسة في عام 2020 حددت الإمكانات المضادة للسرطان لمستخلص ميثانولي لنبات يُسمى Oxialis obtriangulata في خلايا BxPC-3. إلى جانب ذلك، درس الباحثون أيضًا المسار الآلي للخلية الذي من خلاله كان المستخلص النباتي يمارس تأثيرات علاجية [4].
5. المنشورات البحثية حول خلايا BxPC-3
يسرد هذا القسم بعض المنشورات الأكثر استشهادًا والأكثر إثارة للاهتمام التي تتناول خط الخلايا BxPC-3.
يحفز الليكوكومارون موت خلايا سرطان الغدة البنكرياسية BxPC-3 عن طريق تثبيط DYRK1A
استكشفت هذه المنشورة في مجلة Chemico-Biological Interactions (2020) الآثار المسببة لموت الخلايا المبرمج (الأبوبتوسيس) لمركب طبيعي، وهو الليكوكومارون، على خلايا سرطان البنكرياس BxPC-3.
نُشرت هذه المقالة البحثية في مجلة Anticancer Research (2022). اقترحت الدراسة أن الهيدروكسي كلوروكوين يتسبب في موت خلايا BxPC3 عن طريق تثبيط جين BCL-XL.
نُشرت هذه الدراسة في عام 2020 في مجلة Journal of Cellular Biochemistry. تشير الدراسة إلى أن مركبًا طبيعيًا، وهو الساليدروسيد، يُظهر أنشطة مضادة للسرطان في خلايا BxPC-3 عن طريق تنظيم سلسلة إشارات HIF-1α (العامل القابل للتحفيز بنقص الأكسجة) و LOXL2.
تشير هذه المقالة المنشورة في مجلة Biomedicine & Pharmacotherapy إلى أن الإبروتينيب يمكن استخدامه كمحسس إشعاعي فعال في مرضى سرطان البنكرياس. في المختبر، تشير الدراسة التي أجريت على خلايا BxPC-3 إلى أنه يقلل من فسفرة EGFR في خلايا BxPC3 وتعبير pAKT والجينات النهائية التي يتم تنظيمها صعودًا بواسطة العلاج الإشعاعي.
يحفز الكيليدونين موت الخلايا المبرمج عبر تنظيم GADD45a-p53 في خلايا سرطان البنكرياس البشري
اقترحت هذه الدراسة المنشورة في مجلة Integrative Cancer Therapies أن مادة طبيعية، وهي الكيليدونين، تمارس نشاطًا مسببًا لموت الخلايا المبرمج في خلايا البنكرياس البشرية BxPC-3 من خلال تنظيم إشارات BxPC3 p53 و GADD45a.
موارد لسلسلة الخلايا BxPC-3: بروتوكولات ومقاطع فيديو والمزيد
يتمتع خط الخلايا BxPC-3 بالعديد من المزايا الجذابة التي تجعله مناسبًا للاستخدام في الأبحاث. تذكر العديد من الموارد المتاحة عبر الإنترنت حول خط الخلايا BxPC-3 بروتوكولات التعامل معه وصيانته وإدخال الجينات إليه.
- تحويل BxPC3: هذا الفيديو هو دليل تفصيلي لتعلم بروتوكول التحويل لخلايا BxPC-3.
يتضمن هذا القسم من المقالة بعض الروابط التي تشرح بروتوكولات زراعة الخلايا BxPC3.
- زراعة خلايا BxPC3: سيساعدك هذا الموقع على تعلم بروتوكولات إعادة الزراعة والتعامل مع مزارع BxPC-3 المحفوظة بالتبريد والمتكاثرة.
المراجع
- Kim, Y., et al., Comparative proteomic profiling of pancreatic ductal adenocarcinoma cell lines. Mol Cells, 2014. 37(12): p. 888-98.
- Kirtonia, A., et al., الإفراط في التعبير عن لامينين-5 جاما-2 يعزز تكوين الأورام في سرطان الغدة البنكرياسية القنوي من خلال سلسلة EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR. Cellular and Molecular Life Sciences, 2022. 79(7): ص. 362.
- Turner, A., et al., تقلل مستخلصات فاكهة Elaeocarpus reticulatus من قابلية البقاء على قيد الحياة وتؤدي إلى موت الخلايا المبرمج في خلايا سرطان البنكرياس في المختبر. تقارير البيولوجيا الجزيئية، 2020. 47: ص. 2073-2084.
- An, E.-J., et al., الإمكانات المضادة للسرطان لـ Oxialis obtriangulata في خلايا سرطان البنكرياس من خلال تنظيم المسار الذي يتوسطه ERK/Src/STAT3. Molecules, 2020. 25(10): p. 2301.