خلايا CV-1
معلومات عامة
| الوصف | CV-1 هو خط خلايا قرد أخضر أفريقي أخضر مشتق من الكلية في عام 1964. وقد استُخدم في البداية في الأبحاث التي ركزت على تحويل فيروس ساركوما روس المسبب للسرطان (RSV)، ويُستخدم هذا الخط الخلوي الشبيه بالأرومة الليفية على نطاق واسع في الأبحاث البيولوجية لإنتاج الفيروسات ونقلها وإسكات الجينات. هذه الخلايا سلبية بالنسبة لأنزيم النسخ العكسي وقابلة للإصابة بالعديد من الفيروسات، بما في ذلك فيروس شلل الأطفال 1، والهربس البسيط، وفيروس القرد البسيط، وفيروس سيميان 40 (SV40)، والتهاب الدماغ في كاليفورنيا، والتهاب الدماغ الخيلي الشرقي والغربي. يُظهر خط الخلايا CV-1 نمواً سريعاً وينمو ملتصقاً على الأسطح البلاستيكية والزجاجية ويُظهر تحولات في عدد الكروموسومات عند مستويات مرور عالية. وقد لوحظ أن خلايا CV-1 تُظهر زيادة في الورم في فئران ويستار المعالجة بـ ATG بالإضافة إلى زيادة تكوين مستعمرة الخلايا في أجار ناعم. علاوةً على ذلك، تدعم خلايا CV-1 تكاثر فيروس SV40 وتُظهر نشاطًا سريعًا للثيميدين كيناز (TK) بعد تحريض عدوى فيروسات سيميان والأدينو وفيروس الورم الحليمي. النمط النووي لخلايا CV-1 هو 2n = 60، كاذب الصبغيات. استُخدمت خلايا CV-1 في مجموعة متنوعة من التطبيقات المحددة في الأبحاث البيولوجية، بما في ذلك اختبار الفعالية ومضيف نقل العدوى واختبار مبيدات الفيروسات. ومن المعروف أيضاً أنها مضيف مناسب لنقل العدوى، خاصةً بواسطة نواقل SV40. |
|---|---|
| كائن حي | القرد |
| الأنسجة | الكلى |
| التطبيقات | مضيف مناسب لنقل العدوى، خاصةً بواسطة نواقل SV40. |
| المترادفات | Cv-1، CV 1، CV-1.K، CV-1.C، CV1 |
الخصائص
| العمر | 141 يوماً |
|---|---|
| الجنس | الذكور |
| نوع الخلية | الأرومة الليفية |
| خصائص النمو | ملتزم |
البيانات التنظيمية
| اقتباس | CV-1 (الرقم الكتالوجي لسيتيون 605471) |
|---|---|
| مستوى السلامة البيولوجية | 1 |
| NCBI_TaxID | 9534 |
| سيلوسوروسأكسيون | CVCL_0229 |
البيانات الجزيئية الحيوية
| القابلية للإصابة بالفيروس | فيروس شلل الأطفال 1، والهربس البسيط، والتهاب الدماغ الخيلي الشرقي، والتهاب الدماغ الخيلي الغربي، والتهاب الدماغ الخيلي كاليفورنيا، و SV40 |
|---|---|
| إنزيم النسخ العكسي | سلبي |
المناولة
| الوسط الثقافي | EMEM، ث: 2 ملي مولار مليغرام من الجلوتامين، ث: 1.5 جم/لتر NaHCO3، ث: EBSS، ث: 1 مليغرام من بيروفات الصوديوم، ث: NEAA (رقم المادة 820100c من سايتيون) |
|---|---|
| المكملات الغذائية | قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS |
| كاشف التفكك | أكوتاس |
| الاستزراع الفرعي | قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد. |
| نسبة التقسيم | يوصى بنسبة 1:2 إلى 1:3 |
| كثافة البذر | ستنتج من 3 إلى 4 × 10^4 خلية/سم^2 في طبقة متماسكة في حوالي 4 أيام |
| تجديد السوائل | 2 مرات في الأسبوع |
| التعافي بعد ذوبان الجليد | بعد الذوبان، ضع الخلايا في صفيحة عند 5 × 10^4 خلية/سم^2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل. |
| وسيط التجميد | CM-1 (رقم الكتالوج الخاص بسيتيون 800100) أو CM-ACF (رقم الكتالوج الخاص بسيتيون 806100) |
| إذابة الخلايا وزراعتها |
|
مراقبة الجودة / الملف الوراثي / HLA
| العقم | يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على الإنارة. ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي. |
|---|
شهادة التحليل (CoA)
| رقم القطعة | نوع الشهادة | التاريخ | رقم الكتالوج |
|---|---|---|---|
| 601470-517 | شهادة التحليل | 22. Jan. 2026 | 601470 |