SK-MEL-5 细胞
一般信息
| 说明 | 这是 T. Takahashi 及其同事分离出的大量黑色素瘤细胞系之一。这些品系是检测黑色素瘤患者体内黑色素瘤特异性抗体的靶细胞来源。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 皮肤 |
| 疾病 | 黑色素瘤 |
| 转移部位 | 腋窝淋巴结 |
| 应用 | 黑色素瘤研究;皮肤癌生物学;黑色素瘤药物敏感性;免疫检查点抑制剂评估;MAPK/ERK通路研究;细胞迁移与侵袭;异种移植模型;自然杀伤细胞和T细胞细胞毒性检测(靶细胞) |
| 同义词 | SK-Mel-5,SK MEL 5,SK.MEL.5,SK-MEL5,SKMel-5,SKMEL-5,SKMel5,SKmel5,AA-Mel |
特点
| 年龄 | 24 年 |
|---|---|
| 性别 | 女性 |
| 种族 | 高加索人 |
| 形态学 | 星状 |
| 细胞类型 | 黑色素细胞/黑色素瘤细胞 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | SK-MEL-5(Cytion 目录号 300157) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0527 |
| 转基因生物现状 | 未经过基因改造;由T. Takahashi等人分离的野生型黑色素瘤细胞系。 |
生物分子数据
| 蛋白质表达 | P53 阳性 |
|---|---|
| 同工酶 | PGM1,1-2,PGM3,1,ES-D,1,AK-1,1,GLO-1,1-2,G6PD,B,表型频率产品: 0.0860 |
| 致肿瘤性 | 是,在裸鼠体内形成恶性黑色素瘤 |
| 产品 | 黑色素 |
处理
| 培养基 | EMEM(MEM Eagle),w:2 mM L-谷氨酰胺,w:2.2 g/L NaHCO3,w:EBSS(Cytion 文章编号 820100a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS 和 1% NEAA |
| 解离试剂 | Accutase |
| 加倍时间 | 约24至36小时 |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 分割比率 | 1 至 3 |
| 播种密度 | 1 × 10⁴ 个细胞/平方厘米 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 解冻后恢复 | 解冻后,将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中,使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|---|
| STR 简介 |
氨甲蝶呤: x,x
CSF1PO: 10,13
D13S317: 10,12
D16S539: 10,12
D5S818: 11,13
D7S820: 9,12
TH01: 6,9
TPOX: 11
vWA: 14,18
D3S1358: 16,17
D21S11: 29
D18S51: 15,16
Penta E: 5,12
Penta D: 9,11
D8S1179: 12,15
FGA: 20.2,22
|
| HLA 等位基因 |
A*: '02:01:01, '11:01:01
B*: '07:02:01, '40:01:02
C*: '03:04:01, '07:02:01
DRB1*: '04:01:01, '13:01:01
DQA1*: '01:03:01, '03:01:01
DQB1*: '03:02:01, '06:03:01
DPB1*: '03:01:01, '16:01:01
E: '01:01, '01:03
|
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 300157-170125 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300157 |
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