SK-MEL-28 细胞
有关 SK-MEL-28 细胞系的要点
| 说明 | 该细胞系由 T.Takahashi 及其同事从一名 51 岁男性(种族不明)的腋窝淋巴结中建立,他们在一系列黑色素瘤细胞系中分离出了这一细胞系。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 皮肤 |
| 疾病 | 皮肤黑色素瘤 |
| 同义词 | SK-Mel-28, SK.MEL.28, SK-MEL 28, SK MEL-28, SK MEL 28, SK Mel 28, SKMel-28, SKMEL-28, SK-MEL28, SK-Mel28, SK Mel28, SKMEL28, SKMel28, SKmel28, SKML-28, SK28, AU-Mel, P-36, P36 |
详细信息
| 年龄 | 51 年 |
|---|---|
| 性别 | 男 |
| 形态学 | 多边形 |
| 生长特性 | 附着物 |
规格
| 引用 | SK-MEL-28(Cytion 目录号 300337) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0526 |
人类黑色素瘤细胞系 SK-MEL-28 的遗传特征
| 蛋白质表达 | P53 阳性 |
|---|---|
| 同工酶 | PGM3,1,PGM1,1,ES-D,1,AK-1,1-2,GLO-1,2,G6PD,B |
| 致肿瘤性 | 是,在裸鼠体内。形成恶性黑色素瘤(大圆细胞型) |
| 产品 | 黑色素 |
| 突变概况 | BRAF V600E 突变:通过 DNA 方法(测序、RT-PCR)和蛋白质方法(Western 印迹)确定 V600E 型 BRAF 突变。 |
维护技术
| 培养基 | DMEM,w:4.5 克/升葡萄糖,w:4 毫摩尔 L-谷氨酰胺,w:3.7 克/升 NaHCO3,w:1.0 毫摩尔丙酮酸钠(Cytion 编号 820300a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 分割比率 | 建议比例为1:3 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 解冻后恢复 | 解冻后至少放置 48 小时,直至移除培养基或进行亚培养 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
SKMEL28 细胞纯度和特性检查
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|---|
| STR 简介 |
氨甲蝶呤: x,y
CSF1PO: 10,12
D13S317: 11,12
D16S539: 9,12
D5S818: 13
D7S820: 10
TH01: 7
TPOX: 8,12
vWA: 16,19
D3S1358: 16,18
D21S11: 28、29
D18S51: 12,16
Penta E: 8,12
Penta D: 9,1
D8S1179: 13
FGA: 19
|
| HLA 等位基因 |
A*: '11:01:01
B*: '40:01:02
C*: '03:04:01
DRB1*: '04:04:01
DQA1*: '03:01:01
DQB1*: '03:02:01
DPB1*: '03:01:01
E: '01:03:02
|
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 300337-1315SF | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300337 |
| 300337-130125 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300337 |
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