Hep2细胞及其在喉癌研究中的作用
Hep 2细胞是一种关键的体外模型，广泛应用于风湿病学、癌症研究和免疫学等生物医学研究领域。这些源自喉癌的人体细胞，对于阐明喉癌的起源组织及其特异性特征起到了不可或缺的作用。 其在转化癌症研究中的重要性已广受认可，这些细胞极大地促进了我们对喉癌性质及起源的理解，并在喉癌研究文献中占据重要地位 [1]。
- 培养基
- Hep 2 细胞的培养使用 EMEM（Eagle 最小必需培养基）。 该培养基需添加 10% 胎牛血清 (FBS)、1.0 g/L 葡萄糖、2.2 g/L 碳酸氢钠 (NaHCO3)、2.0 mM L-谷氨酰胺、1% 非必需氨基酸 (NEAA) 及 1 mM 丙酮酸钠，以确保细胞理想生长。 培养基应每周更换 2 至 3 次。
- 倍增时间
- 据报道，Hep 2 细胞的倍增时间约为 40 小时。
- 生长类型
- Hep 2 细胞为贴壁细胞，生长成单层。
- 生物安全等级
- BSL-1
Hep 2 细胞的来源与一般特征
细胞系的来源和一般特征决定了其在研究中的适用性。本节将帮助您了解 Hep 2 细胞的来源及其一些显著特征。例如，您将了解到：什么是 Hep-2 细胞系？Hep 2 细胞的来源是什么？以及 Hep 2 的形态特征如何？
- Hep 2是一种不朽的人类上皮细胞系，最初由H.W. Toolan于1954年作为喉癌细胞进行描述。然而，最近有报道指出，Hep 2细胞系由宫颈腺癌细胞组成，其起源可追溯至HeLa细胞系的污染[2]。
- Hep 2细胞含有HeLa标志染色体，且经免疫过氧化物酶染色和PCR分别证实，其对角蛋白和人乳头瘤病毒DNA序列呈阳性。
- 作为HeLa细胞系的衍生物，Hep 2具有上皮样形态。
- Hep 2细胞系表现出结构和数目上的染色体畸变，具有接近三倍体的核型[3]。
HEp-2细胞系：培养信息
在操作细胞系之前，我们必须了解其培养的以下关键要点。这些信息有助于有效培养和维持细胞系。您需要了解：Hep-2细胞的倍增时间是多少？Hep-2细胞是否为贴壁细胞？Hep-2细胞的接种密度是多少？
细胞倍增时间：
据报道，Hep-2细胞的倍增时间约为40小时。
贴壁型还是悬浮型：
Hep 2细胞为贴壁型，可生长成单层。
接种密度：
1 × 10⁴ 细胞/cm² 的接种密度最适合 Hep 2 细胞培养。接种时，先用 1×PBS 溶液冲洗贴壁的 Hep 2 细胞，随后用 Accutase 解离液孵育。 室温孵育8–10分钟后，将细胞用培养基重悬并离心。随后将收集的细胞分装至新鲜培养基中，并转移至新的培养瓶中进行培养。
生长培养基：
Hep 2细胞的培养使用EMEM（Eagle's最小必需培养基）。 该培养基需补充10% FBS、1.0 g/L 葡萄糖、2.2 g/L NaHCO3、2.0 mM L-谷氨酰胺、1% NEAA及1 mM 丙酮酸钠，以确保细胞最佳生长。 培养基应每周更换 2 至 3 次。
培养条件：
与其他哺乳动物细胞系类似，Hep 2 细胞同样在恒温 37°C、持续供应 5% 二氧化碳的加湿培养箱中培养。
保存：
Hep 2 细胞可保存在超低温电冻柜（-150 °C 以下）或液氮气相中进行长期保存。
冷冻流程与培养基：
推荐用于 Hep 2 细胞的冷冻培养基为 CM-1 或 CM-ACF。应采用缓慢冷冻法进行冷冻，使温度以每分钟 1 °C 的速率逐渐下降，以保护细胞存活率。
解冻过程：
将冷冻细胞管置于 37°C 水浴中振荡快速解冻，直至仅剩一小块冰块。 随后将细胞加入新鲜培养基中，并离心去除冷冻培养基成分。之后，将细胞沉淀重新悬浮于培养基中，并将细胞分装至培养瓶中。细胞需要静置近24小时以完成贴壁。
生物安全等级
建议在1级生物安全实验室中进行Hep 2细胞培养物的操作与维护。
Hep 2 细胞的优势与局限性
几乎所有细胞系都具有独特的优势与局限性，这些特性共同决定了其在研究领域中的应用价值。本节将介绍与Hep 2细胞系相关的几个主要优缺点。
优点
Hep 2细胞系的主要优势包括：
- 人类来源： Hep 2 源自人类上皮细胞，使其成为研究人类疾病和病毒感染的宝贵体外模型。
- 抗核抗体（ANA）检测： Hep 2细胞系具有天然的蛋白质阵列，可呈现多种抗原，使其成为检测抗核抗体（ANA）的绝佳基质。这一特性能够对血清中的ANA进行特异性且高灵敏度的筛查，使其成为识别结缔组织疾病的关键诊断工具。
局限性
- 染色体异常： Hep 2细胞表现出多种染色体数目和结构异常。这些异常可能影响细胞行为，并可能限制其在某些实验室实验中的适用性。
- 致瘤性： 作为源自肿瘤的人上皮细胞系，Hep 2可能存在上皮细胞中通常不具备的遗传异常。因此，在专注于正常细胞生理学的研究中，Hep 2细胞的应用可能会受到限制。
Hep 2细胞系在生物医学研究中的广泛应用
Hep 2细胞系作为生物医学研究中多种应用的典范模型而脱颖而出。这些细胞以其多功能性著称，在从受体分析到复杂疾病研究的各类体外实验中发挥着关键作用。
利用Hep 2细胞探索肿瘤发生机制与治疗靶点
由于具有肿瘤形成能力，Hep 2细胞对于深入探究癌症生物学的复杂机制至关重要。它们为癌症信号传导途径和机制研究提供了重要见解，并且是抗癌药物筛选与评估的主要工具。 例如，一项富有洞见的研究利用Hep 2细胞阐明了miRNA-33a对癌细胞增殖的影响。研究结果揭示了miRNA-33a通过与已知致癌基因PIM1相互作用而产生的抗增殖效应，从而提示了一个新的治疗靶点[4]。 在另一项研究中，Hep 2细胞被用于评估马钱子（Marsdenia tenacissima）氧化锌纳米颗粒的治疗潜力，突显了其抗增殖和诱导凋亡的功效[5]。
借助Hep 2细胞的洞见推动病毒学研究
Hep 2细胞对多种人类病毒的易感性使其成为病毒学研究中不可或缺的资源。该细胞系已被有效用于表达SARS-CoV-2病毒基因，以揭示病毒与宿主细胞机制之间的复杂相互作用[6]。 在当前时代，这一应用尤为关键，因为理解和对抗COVID-19等病毒感染已成为全球优先事项。
解读细胞功能：Hep 2 细胞中的基因操作
Hep 2细胞系对基因操作的适应性突显了其在机制研究中的实用价值。 研究人员利用这一特性来调控基因表达，并阐明特定基因在细胞功能中的作用。一项值得注意的研究涉及在Hep 2细胞中过表达RNA结合蛋白RBM6，这有助于探索其肿瘤抑制潜力，并为癌症的分子机制提供了宝贵的见解[7]。
通过Hep 2细胞系应用提升疾病诊断水平
除上述研究领域外，Hep 2细胞因其诊断能力而广受赞誉，尤其在抗核抗体（ANAs）检测方面表现突出——该检测对系统性红斑狼疮等自身免疫性疾病的诊断至关重要。 Hep 2细胞呈现ANA的高精度特性，为诊断及靶向治疗的开发提供了有力支持，深化了我们对自身免疫性病理机制的理解，并提升了患者护理水平。
通过这些多元化的应用，Hep 2细胞为转化癌症研究、病毒感染研究以及细胞机制探索的进步做出了重大贡献。其在生成临床相关数据方面的贡献无可替代，这印证了其在实验室和临床领域中不可或缺的作用。 随着研究的不断发展，Hep 2细胞系必将始终处于前沿地位，助力新疗法的发现，并拓展我们对人类健康与疾病的认知。
立即获取您的HEp-2细胞系
Hep 2 细胞：研究论文
以下是关于Hep-2细胞的一些有趣且被引用次数最多的研究论文。
- 利用马钱子属植物（Marsdenia tenacissima）合成的氧化锌纳米颗粒可抑制喉癌细胞（Hep-2）增殖并
诱导凋亡 这篇发表于《光化学与光生物学B：生物学》（2019年）的文章，探讨了生物合成的马斯登藤氧化锌纳米颗粒在Hep-2细胞系中的抗癌潜力。 - 生物制备的橙皮苷载PLGA纳米颗粒可对抗癌细胞
中线粒体介导的内在凋亡通路 该论文发表于2021年的《无机与有机金属聚合物与材料杂志》。 本研究考察了生物制剂型橙皮苷载聚乳酸-乙醇酸共聚物（PLGA）纳米颗粒在Hep 2细胞中的抗癌特性。 - 细叶藜乙醇提取物对呼吸道合胞病毒感染
的抗病毒活性 2019 年发表在《民族药理学杂志》上的这篇论文利用 Hep 2 细胞研究了呼吸道合胞病毒感染，并筛选了针对该病毒的抗病毒药物。 该研究报道了药用植物细叶蕨（Lophatherum gracile）乙醇提取物在对抗呼吸道合胞病毒感染方面具有令人鼓舞的抗病毒潜力。 - 评估四种芳香植物的水提取物对白色念珠菌粘附于人类HEp-2上皮细胞
的活性 该研究发表于《基因报告》（2020年）。 本研究探讨了四种芳香植物水提取物对白色念珠菌粘附于人Hep-2上皮细胞的抑制潜力。 - Wnt1诱导的信号蛋白1通过YAP1/TEAD1/GLUT1通路
调节喉鳞状细胞癌的糖酵解和化疗耐药性。 该研究发表于2019年的《细胞生理学杂志》。 该研究报告称，Wnt1诱导性信号蛋白1（WISP1）与YAP1/TEAD1/GLUT1通路相互作用，并调节Hep 2细胞系中的葡萄糖代谢和化疗耐药性。
Hep2细胞系相关资源：实验方案、视频等
Hep 2 是一个广为人知的细胞系。目前有多种关于 Hep 2 细胞系的资源可供使用。
- Hep 2细胞系的传代培养：本视频详细演示了Hep 2细胞的传代培养步骤。
- Hep 2 细胞抗核抗体 (ANA) 筛查：本视频讲解了利用 Hep 2 细胞系进行抗核抗体 (ANA) 筛查的方法。
- Hep 2 细胞培养：此链接包含关于 Hep 2 细胞的基本培养信息，涵盖细胞传代、冷冻及解冻等操作。
生物医学研究中有关 HEp-2 细胞的常见问题
参考文献
- Fusi, M. 和 S. Dotti, HEp-2 细胞系向完全无动物成分培养系统的适应及其细胞生长实时分析。《生物技术》，2021. 70(6): 第 319-326 页。
- Gorphe, P.，《HEp-2细胞系在喉癌转化研究中的综合综述》。《美国癌症研究杂志》，2019年，9(4): 644-649页。
- Wang, M. 等，人HEp-2建立的喉部异种移植肿瘤中的癌相关成纤维细胞并非通过上皮-间质转化源自癌细胞，其表型被激活但核型正常。 《PLoS One》，2015年，10(2): e0117405。
- Karatas, O.F.，miR-33a 通过靶向 PIM1 在喉癌 Hep-2 细胞中发挥抗增殖潜力。《头颈》，2018 年，40(11)：第 2455-2461 页。
- Wang, Y. 等，利用Marsdenia tenacissima合成的氧化锌纳米颗粒可抑制喉癌细胞（Hep-2）的增殖并诱导其凋亡。 《光化学与光生物学B：生物学》，2019年，第201卷，第111624页。
- 张，J. 等，SARS-CoV-2 蛋白亚细胞定位的系统与分子研究。《信号转导与靶向治疗》，2020年，第5卷第1期：第269页。
- 王庆等，RNA结合蛋白RBM6作为肿瘤抑制基因抑制喉癌的生长和进展。《基因》，2019年，第697期：第26-34页。