香港/ FDC 细胞
一般信息
| 说明 | 这些HK/FDC样细胞的永生化版本现已问世,为长期研究滤泡树突状细胞功能及B细胞相互作用提供了更稳定且可扩展的研究工具。 为探究滤泡树突状细胞(FDC)在淋巴滤泡生发中心中的作用,我们从人类扁桃体中建立了滤泡树突状细胞(FDC)样细胞系(HK细胞)。 HK细胞最初表达CD21、CD23、DRC-1、CD40、VCAM-1、ICAM-1和HJ2等标记物,但在培养三天内会失去DRC-1、CD21和CD23。 形态学和功能学上,HK细胞与成纤维细胞存在差异,具有独特的生长需求。它们能与B细胞结合并促进其增殖,但不与T细胞结合。经抗CD3抗体激活的T细胞可与HK细胞结合,诱导其表型改变并促进其生长。 HK细胞优先结合并激活生发中心(GC)B细胞,使其免于凋亡。在抗μ或抗CD40抗体存在下,它们能增强B细胞增殖。这些细胞还产生可溶性因子,参与协同刺激活性。表型与功能分析表明,HK细胞可能源自滤泡树突细胞(FDCs),凸显其在支持GC B细胞成熟与分化中的潜在作用。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 口腔、扁桃体 |
| 疾病 | 非肿瘤性滤泡树突状细胞系 |
| 应用 | 正常 B 淋巴细胞和淋巴瘤/白血病生长的供养细胞。研究淋巴结生殖中心的 B 细胞发育。可能对 FDC 的病毒感染进行研究 |
| 同义词 | FDC/HK |
特点
| 年龄 | 儿童 |
|---|---|
| 性别 | 未说明 |
| 种族 | 高加索人 |
| 形态学 | 子宫肌瘤 |
| 细胞类型 | 滤泡树突状细胞 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | HK/FDC(Cytion 目录号 300204) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_IY38 |
| 转基因生物现状 | 未经基因改造;野生型永生化细胞系 |
生物分子数据
| 表面抗原 | CD14+,CD40+,ICAM-1+,VCAM-1+ |
|---|
处理
| 培养基 | EMEM(MEM Eagle),w:2 mM L-谷氨酰胺,w:2.2 g/L NaHCO3,w:EBSS(Cytion 文章编号 820100a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS 和 1% NEAA |
| 解离试剂 | Accutase |
| 加倍时间 | 约24-36小时 |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 分割比率 | 1 至 3 |
| 播种密度 | 1至3×10⁴个细胞/平方厘米 |
| 流体更新 | 每周 1 至 2 次 |
| 解冻后恢复 | 解冻后,将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中,使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|---|
| HLA 等位基因 |
A*: '02:01:01, '25:01:01
B*: '14:02:01, '18:01:01
C*: '08:02:01, '12:03:01
DRB1*: '01:02:01, '15:01:01G
DQA1*: '01:01:02, '01:02:01
DQB1*: '05:01:01, '06:02:01
DPB1*: '02:01:02, '23:01:01
E: '01:01:01
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分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 300204-121 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300204 |
| 300204-220124 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300204 |