永生化 HK/FDC 细胞
一般信息
| 说明 | 永生化的HK/FDC细胞系是原始HK滤泡树突状细胞样细胞的遗传稳定衍生物,在保留关键表型和功能特征的同时,能够实现长期传代培养,且不受亲代培养物衰老相关的限制。通过引入特定遗传元件实现永生化,该方法可绕过复制阻滞,从而为长期研究生发中心生物学及FDC-B细胞相互作用提供了稳定平台。 永生化HK/FDC细胞在抗IgM或CD40配体等信号存在下,仍能结合并协同刺激生发中心B细胞,促进其存活并增强增殖能力。 关键的是,它们持续表达FDC特有的黏附分子和共刺激因子(包括VCAM-1和ICAM-1),并分泌可溶性介质,模拟原生FDC提供的微环境支持。这些特性使永生化HK/FDC细胞系成为解析B细胞在生发中心内成熟、亲和力选择及存活的细胞分子机制的可靠可重复模型。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 扁桃体 |
| 疾病 | 滤泡树突状网状结构 |
| 转移部位 | 不适用(滤泡树突状细胞系;源自扁桃体) |
| 应用 | 生发中心B细胞生物学;滤泡树突细胞(FDC)与B细胞的相互作用;B细胞存活与增殖;淋巴瘤/白血病饲养细胞检测;FDC的病毒感染 |
特点
| 年龄 | 儿童 |
|---|---|
| 性别 | 未说明 |
| 种族 | 高加索人 |
| 形态学 | 子宫肌瘤 |
| 细胞类型 | 滤泡树突状细胞 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | 永生化 HK/FDC(Cytion 目录号 300205) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_IY38 |
| 转基因生物现状 | GMO-S1:该永生化HK/FDC细胞系含有永生化构建体(Cytion/Inscreenex)。此分类仅适用于德国境内,在其他地区可能有所不同。 |
生物分子数据
| 病毒 | Cytion,通过 Inscreenex i.A. 实现永生。 |
|---|
处理
| 培养基 | DMEM:Ham's F12(1:1),w: 3.1 g/L 葡萄糖,w: 2.5 mM L-谷氨酰胺,w: 15 mM HEPES,w: 0.5 mM 丙酮酸钠,w: 1.2 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820400a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 加倍时间 | 约24至48小时 |
| 分割比率 | 1 至 3 |
| 播种密度 | 1 至 3 × 10⁴ 个细胞/cm² |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制与分子分析
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 300205-271025 | 分析证书 | 05. Dec. 2025 | 300205 |
| 300205-271025 | 分析证书 | 05. Dec. 2025 | 300205 |
| 300205-231025 | 分析证书 | 05. Dec. 2025 | 300205 |