RBL-2H3 细胞——RBL-2H3 在过敏反应和免疫学研究中的意义
RBL-2H3细胞系是一种源自大鼠的嗜碱性白血病细胞系，广泛应用于免疫学研究。它作为研究肥大细胞生理学、行为及功能的模型系统。此外，这些细胞还被用于研究过敏反应、免疫学过程，以及药物测试与开发。
- 培养基
- RBL-2H3细胞的培养使用含有10% FBS、2 mM L-谷氨酰胺、2.2 g/L NaHCO₃及EBSS盐的EMEM培养基。培养基应每周更换2至3次。
- 倍增时间
- RBL-2H3肥大细胞的倍增时间约为50-60小时。
- 生长类型
- RBL-2H3为贴壁细胞系。
- 生物安全等级
- BSL-2
- 可从以下机构获得
- Cytion — 订购 RBL-2H3
RBL-2H3细胞：来源与一般特性
在研究中使用嗜碱性粒细胞系之前，您应了解其来源和一般属性。本文这一部分将为您介绍 RBL-2H3 细胞的基础知识，例如：什么是 RBL-2H3 肥大细胞？为何要使用 RBL-2H3 细胞？ 大鼠嗜碱性白血病中的 RBL-2H3 细胞是什么？RBL-2H3 的形态特征如何？RBL-2H3 细胞是否具有永生性？
- RBL-2H3是1978年由美国国家牙科研究所免疫学实验室从Wistar大鼠嗜碱性细胞中分离得到的嗜碱性白血病细胞。
- RBL-2H3细胞具有c-kit受体酪氨酸激酶和肥大细胞蛋白酶II（RMCP-II）受体，使其成为一种潜在的肥大细胞模型。因此，尽管它们源自大鼠嗜碱性粒细胞，但通常被称为肥大细胞[1]。
- 这些细胞在被激活后会释放组胺和其他介质，并表达高亲和力IgE受体。
- RBL-2H3细胞呈现成纤维细胞样形态。
RBL-2H3 细胞：培养信息
本节将帮助您了解培养 RBL-2H3 细胞系的一些关键要点。您将了解：RBL-2H3 细胞的倍增时间是多少？RBL-2H3 细胞的接种密度是多少？RBL-2H3 细胞的培养方案是什么？ RBL-2H3细胞系的冷冻培养基是什么？
RBL-2H3细胞培养要点
细胞倍增时间：
RBL-2H3肥大细胞的倍增时间约为50-60小时。
贴壁还是悬浮：
RBL-2H3是一种贴壁细胞系。
传代倍数：
对于 RBL-2H3 细胞，传代倍数应控制在 1:2 至 1:4 之间。贴壁细胞需用不含镁和钙的 1×PBS 溶液洗涤。 传代溶液中加入Accutase，将细胞在室温下放置10分钟，使其从培养容器底部脱落。加入新鲜培养基，并对细胞进行离心处理。将收获的细胞小心悬浮于新鲜培养基中，并转移至装有生长培养基的新培养瓶中。
生长培养基：
RBL-2H3细胞采用含10% FBS、2 mM L-谷氨酰胺、2.2 g/L NaHCO₃及EBSS盐的EMEM培养基进行培养。培养基应每周更换2至3次。
培养条件：
RBL-2H3细胞在设定为37 °C、连接5% CO₂气源的加湿培养箱中培养。
保存：
为长期保持细胞活力，将细胞保存在液氮的蒸汽相中，或置于温度低于-150 °C的电冻柜中保存。
冷冻过程与培养基：
使用 CM-1 或 CM-ACF 冷冻培养基，采用慢速冷冻法对 RBL-2H3 细胞进行冷冻。简而言之，该方法允许温度以每分钟 1 °C 的速率下降，从而保护细胞免受冷冻冲击。
解冻过程：
将 RBL-2H3 细胞置于预设温度的水浴中（37 °C）解冻约 60 秒。随后，将细胞加入新鲜培养基中并进行离心。此步骤对于去除冷冻培养基中的成分至关重要。 接下来，将细胞沉淀用生长培养基重悬，并将细胞分装至培养瓶中进行培养。
生物安全等级：
RBL-2H3细胞应在生物安全1级实验室中培养。
发布日期：2023年 | 最后审阅日期：2026年5月
RBL-2H3嗜碱性粒细胞系的优势与局限性
RBL-2H3细胞常用于免疫学研究。本节概述了其主要优点和局限性。
优势
- 易于培养：RBL-2H3细胞在实验室环境中易于培养和维持。这有助于开展经济高效且可重复的实验，因此成为免疫学初步研究的热门选择。
局限性
- 非人类来源：RBL-2H3细胞源自大鼠嗜碱性粒细胞，可能无法准确模拟人类的生物过程，这会限制其在人类特异性研究中的适用性。因此在将研究结果外推至人类系统时，需谨慎解读数据。
- 简化的肥大细胞模型：虽然这些细胞为研究肥大细胞功能提供了基础模型，但它们并不能完全体现肥大细胞在人体免疫系统内相互作用的复杂性。因此，它们可能无法充分模拟肥大细胞在体内免疫应答或疾病状态中的多方面作用。
RBL-2H3细胞系：免疫学研究的基础
利用 RBL-2H3 细胞系开展嗜碱性粒细胞和肥大细胞研究
源自挪威鼠（Rattus norvegicus）的RBL-2H3细胞系，是研究嗜碱性粒细胞和肥大细胞生物学的关键模型。这些大鼠肥大细胞为肥大细胞介质释放提供了重要见解，这对理解过敏性鼻炎等过敏性疾病至关重要。 通过这些细胞，研究人员探索细胞受体的动态变化以及免疫突触的建立，这些过程是免疫系统对过敏原作出反应的核心环节。2019年发表的一项有趣研究利用RBL-2H3细胞系，探究了清凯灵注射液引发的假性过敏反应背后的机制。 该研究发现，PI3K-RAC1信号级联在细胞中部分诱发了这种过敏反应[2]。
过敏研究中的免疫突触动力学
RBL-2H3细胞在免疫学研究中被广泛应用，尤其适用于探究免疫突触的动态变化。这有助于阐明免疫系统的通信过程，并可应用于外周血和腹膜肥大细胞的研究。此类研究对于全面理解全身性和局部免疫应答至关重要。
药物筛选与毒性测试
在药物筛选和测试中，利用了RBL细胞对各种刺激的反应性，包括研究H₂O₂如何抑制IgE介导的反应。 这些细胞在开发针对链球菌感染等疾病的治疗方法中发挥着关键作用——例如，mitis组链球菌会抑制肥大细胞的活化。 此外，研究人员还利用该RBL 2H3肥大细胞模型评估各种物质（包括化学品、药物和纳米颗粒）的毒性效应。 例如，一项近期研究（2022年）评估了聚苯乙烯微塑料对RBL-2H3细胞的细胞毒性。研究发现，微塑料会损伤RBL-2H3细胞的细胞器并促进细胞死亡[3]。 另一项2021年的研究利用RBL 2H3肥大细胞模型，评估了天然产物内费林（neferine）的抗过敏和抗炎潜力。该研究表明，该化合物具有良好的抗过敏和抗炎特性[4]。
免疫学测定中的先进方法
RBL-2H3细胞能持续且可量化地释放介质，使其成为进行荧光测定的理想对象，从而便于进行精确、准确的测量，这对疾病研究和治疗药物的评估至关重要。
源自挪威鼠（Rattus norvegicus）的RBL-2H3细胞系，是免疫学领域基础研究和应用研究中不可或缺的宝贵资源。它为深化我们对免疫性疾病的认识及推进相关治疗提供了广阔机遇。
用于高级免疫学研究的RBL-2H3细胞系
RBL-2H3细胞：研究论文
以下是一些以RBL-2H3肥大细胞为研究对象的精彩研究论文：
该研究论文发表于《免疫药理学与免疫毒理学》（2021年）。研究提出，天然化合物纳里鲁丁通过调节NF-κB、MAPK和酪氨酸激酶信号通路，对RBL-2H3细胞脱颗粒产生抑制作用。
阿皮原素对RBL-2H3、RAW264.7和HaCaT细胞的影响：抗过敏、抗炎及皮肤保护活性
发表于《国际分子科学杂志》（2020年）的这项研究指出，阿皮原素能显著抑制RBL-2H3和RAW264.7细胞的过敏及炎症反应。因此，它可能成为对抗免疫相关疾病的潜在药物。
皂苷素的抗炎和抗过敏作用及其对RAW 264.7、RBL-2H3和HaCaT细胞信号通路的影响
发表于《国际分子科学杂志》（2021年）的这篇研究论文，利用包括RBL-2H3在内的多种细胞系，评估了天然产物皂苷素的抗过敏和抗炎作用。
泰国草药Benchalokawichian的提取物及其部分纯化成分对RBL-2H3细胞中β-己糖胺酶释放的抑制作用（该草药用于治疗过敏性疾病）
这项发表于《循证补充与替代医学》（2014年）的研究发现，Benchalokawichian提取物及其部分活性成分对RBL-2H3细胞中β-己糖胺酶的释放具有潜在的抑制作用。
大螺旋藻肽通过抑制RBL-2H3细胞中Akt和MAPKs的磷酸化来抑制肥大细胞脱颗粒
该论文于2018年发表在《国际生物大分子杂志》上。研究指出，天然产物大螺旋藻（Spirulina maxima）通过阻止MAPKs和AKT的磷酸化，抑制RBL 2H3细胞的脱颗粒。
RBL-2H3细胞系相关资源：操作指南、视频等
RBL-2H3是一种广泛使用的肥大细胞系。本文列出了涵盖RBL-2H3培养和转染实验方案的相关资源：
- RBL-2H3肥大细胞模型：该研究论文包含RBL-2H3细胞培养维持及转染的操作规程。
以下是一些介绍 RBL-2H3 细胞培养方案的资源：
- RBL-2H3 细胞：该网站有助于您学习 RBL-2H3 细胞系的细胞培养方案。此外，还包含有关 RBL-2H3 细胞培养基和培养条件的信息。
RBL-2H3 细胞系：研究人员必读的常见问题解答
RBL-2H3 细胞是一种最初源自大鼠嗜碱性粒细胞白血病的细胞系，通常被用作研究肥大细胞生物学的模型，尤其是在过敏反应和免疫学研究中。这些细胞对分析嗜碱性粒细胞和肥大细胞介质释放、细胞受体动态和免疫突触的形成很有价值。
是的，众所周知，RBL-2H3 细胞在激活后会释放组胺和其他炎症介质。由于组胺释放是过敏反应和炎症过程的一个主要特征，因此这一特性使它们在与过敏反应有关的研究中非常有用。
RBL-2H3 细胞的倍增时间因培养条件而异，但一般在 24 至 36 小时左右。不过，温度、pH 值和营养供应等最佳生长条件也会影响倍增时间。
虽然 RBL-2H3 细胞来源于大鼠，而且不同物种之间存在固有差异，但它们仍被广泛用作研究人类过敏反应相关机制的模型。不过，在将 RBL-2H3 细胞的研究结果推断到人体系统时应仔细解读。
研究表明，H2O2 或过氧化氢能抑制 RBL-2H3 细胞中 IgE 介导的脱颗粒反应。这种效应对于研究细胞水平过敏反应调节的研究人员来说意义重大。
是的，RBL-2H3 细胞被广泛用于药物筛选，尤其是针对过敏和炎症途径的化合物。它们被用来评估潜在治疗药物的有效性和安全性，以及它们的抗过敏和抗炎特性。
参考文献
- Passante, E. 和 N. Frankish，《RBL-2H3细胞系：其来源及其作为肥大细胞模型的适用性》。《炎症研究》，2009年，58(11)：第737-45页。
- Li, Q. 等，清凯灵注射液引起的假性过敏反应在 RBL-2H3 细胞中部分通过 PI3K-Rac1 信号通路介导。《毒理学研究》，2019，8(3)：第 353-360 页。
- Liu, L. 等，聚苯乙烯微（纳米）塑料会损伤 RBL-2H3 细胞的细胞器，并促进 MOAP-1 诱导凋亡。《危险材料杂志》，2022. 438: 第 129550 页。
- Chiu, K.-M. 等，柠檬素对 RBL-2H3 细胞的抗过敏和抗炎作用。《国际分子科学杂志》，2021 年，22(20)：第 10994 页。