RAW 264.7 细胞系在巨噬细胞与免疫学研究中的应用
RAW 264.7细胞系作为小鼠巨噬细胞的可靠体外模型，在免疫学研究领域具有基础性地位。该细胞系源自一只雄性BALB/c小鼠，经阿贝尔森小鼠白血病病毒转化后，形成了一种巨噬细胞样细胞系。 由于其功能稳定性以及同时具备吞噬作用和胞饮作用的固有能力，RAW 264.7 细胞对于研究宿主-病原体相互作用至关重要，因此成为免疫学研究领域的基石 [1,2]。
- 培养基
- 参见产品页面
- 倍增时间
- 详见产品页面
- 生长类型
- 贴壁型
- 生物安全等级
- BSL-1
- 可从以下渠道获取
- Cytion — 订购 RAW 264.7
形态特征与生长行为
经观察，RAW 264.7 细胞表现为半贴壁生长，既倾向于形成纺锤形的贴壁细胞，也倾向于形成球形的悬浮活细胞，细胞直径在 10 至 20 µm 之间。 这种多态性及其在培养条件下的适应性，使 RAW 264.7 细胞成为实验操作和观察的通用工具。
免疫功能与抗原呈递
作为抗原呈递细胞，RAW 264.7 细胞在免疫系统中发挥着关键作用。其功能不仅限于简单的病原体识别，还包括对抗原的加工及向 T 细胞的呈递，从而协调全面的免疫应答。这一动态过程有助于更深入地理解免疫系统如何识别和中和外来物质。
巨噬细胞极化：M0、M1 和 M2 范式
RAW 264.7 细胞在其基础状态下作为 M0 巨噬细胞，具有向 M1 促炎表型或 M2 抗炎表型极化的显著能力。 这种极化能力为研究人员提供了一个模型，用于研究各种细胞因子和环境因素对巨噬细胞功能及免疫应答的影响和作用[3,4]。
破骨细胞生成与骨重塑
尽管 RAW 264.7 细胞本身并非破骨细胞，但在研究破骨细胞生成（即破骨细胞形成的过程）方面发挥了重要作用。这些细胞有助于探索破骨细胞的基因表达及其对受体激活的反应性。 这项研究对于理解骨质疏松症等疾病的病理生理学具有深远意义，其中骨重塑失调是这些疾病的显著特征。
关于RAW 264.7细胞系的培养信息
在开始实验之前，您必须了解关于这一强大细胞系的一些基本信息。您知道 RAW 264.7 细胞的倍增时间吗？ 这些细胞的接种密度是多少？它们属于贴壁细胞吗？此外，RAW 264.7细胞的最佳培养条件是什么？继续阅读，您将找到使用这一卓越细胞系所需的所有答案！
细胞培养信息
RAW 264.7 细胞系
细胞倍增时间
11 至 30 小时
贴壁或悬浮
主要为贴壁细胞，部分为悬浮细胞
接种密度
4 × 10⁴ 个细胞/cm²
推荐培养基
含10%胎牛血清和L-谷氨酰胺（2.5 mM）的RPMI 1640培养基
最佳培养条件
含5% CO₂、温度为37°C的加湿培养箱
培养基更换
每周2至3次
保存
液氮气相中
CM-1 或 CM-ACF
冷冻工艺
慢速冷冻
解冻过程
在 37°C 水浴中快速搅拌
生物安全等级
建议在BSL-2实验室进行
不同汇合度的鼠源RAW 264.7巨噬细胞。
RAW 264.7 电池的优缺点
优点
- 培养简便：RAW 264.7 细胞系在实验室中易于培养和维护，无需任何复杂的要求。
- 表型特征明确：RAW 264.7 是一条表型特征明确的细胞系，这意味着其表型和功能特征稳定。
- 巨噬细胞的体外模型：由于 RAW 264.7 细胞属于巨噬细胞，因此具有吞噬作用和胞饮作用等基本的巨噬细胞样功能。因此，它们常被用作巨噬细胞的体外模型。
- 分化为破骨细胞：RAW 264.7 细胞可通过特定分子因子分化为破骨细胞。这些分化后的细胞能够像破骨细胞一样进行骨重塑。
缺点
- 对原代巨噬细胞的代表性较差：作为一种转化细胞系，RAW 264.7 可能无法准确反映原代巨噬细胞的特征，且在基因表达、表型和功能方面可能存在某些差异。
- 药物筛选的局限性：RAW 264.7细胞可能并不适用于所有类型的药物筛选实验，且其对某些药物的反应可能与原代巨噬细胞不同。
- 细胞粘附性强：RAW 264.7 细胞会强烈粘附于培养瓶表面，有时难以剥离。
RAW 264.7 细胞在巨噬细胞模拟和免疫学研究中的应用
细胞免疫应答建模
RAW 264.7 细胞系反映了真实巨噬细胞的功能，是研究细胞对病原体和免疫刺激反应的关键模型。 一项强调这一方面研究评估了热灭活乳酸菌对这些细胞的免疫调节和抗氧化作用，为免疫系统调节提供了重要发现 [5 ]。
与此相辅相成的是，2019 年进行的一项研究阐明了 RAW 264.7 细胞接触西伯利亚玉竹（Polygonatum sibiricum）多糖所产生的免疫学影响。 该研究得出结论，这些化合物通过激活 NF-κB/MAPK 信号通路引发免疫反应，从而提供了深入的分子层面的理解 [6]。
破骨细胞生成研究
作为破骨细胞分化研究的替代模型，RAW 264.7细胞有助于阐明破骨细胞的行为及其分化途径。此类研究拓展了我们对骨吸收机制及骨质疏松症发病机制的认识。通常采用先进的成像技术来监测细胞内的变化，并分析这些细胞内的血红素代谢情况。
深入了解破骨细胞分化的分子机制
尽管RAW 264.7细胞的主要作用是作为巨噬细胞模型，但它们也被用于体外破骨细胞生成研究。 通过诱导这些细胞表现出破骨细胞样特征，研究人员得以深入了解分化过程和破骨细胞前体的行为，尽管在这些研究中，必须充分考虑该细胞系的固有特性和来源。
天然产物生物活性筛选
天然产物生物活性筛选是 RAW 264.7 细胞表现突出的另一个应用领域。例如，在一项研究草药混合物免疫刺激特性的韩国研究中，该细胞系在识别天然物质中的生物活性化合物方面展现出了显著效果 [7 ]。
借助我们的RAW 264.7细胞，引领您的研究
使用RAW 264.7细胞的研究论文
关于小鼠巨噬细胞系RAW 264.7的研究论文众多：
- 西伯利亚玉竹（Polygonatum sibiricum Delar. ex Redoute）多糖通过NF-κB/MAPK通路在RAW 264.7细胞系中诱导免疫应答： 该研究提出，从西伯利亚玉竹（Polygonatum sibiricum）中提取的多糖可通过调节NF-κB/MAPK信号级联反应，在小鼠巨噬细胞系RAW 264.7中诱导免疫应答。
- 卷曲藤（Tinospora crispa）提取物及其主要成分对RAW 264.7巨噬细胞免疫功能的免疫调节作用： 发表在《国际免疫药理学》期刊上的这篇文章指出，Tinospora crispa植物提取物及其主要成分对RAW 264.7巨噬细胞系具有免疫调节和免疫刺激作用。
- 热灭活乳酸菌通过诱导型一氧化氮合酶和环氧化酶-2抑制RAW 264.7细胞中一氧化氮的生成： 该研究提出，热灭活乳酸菌因其具有免疫调节和抗氧化特性，有望应用于益生菌产品的合成。研究人员利用RAW 264.7细胞对这些生物活性进行了研究。
- 草药制剂对RAW 264.7巨噬细胞免疫应答增强作用的研究：本研究利用RAW 264.7细胞，探讨了名为KM1608的草药制剂的免疫刺激作用。研究表明，KM1608是一种潜在的免疫应答增强剂。
- 对哥伦比亚传统医学中所用植物的筛选揭示了角果灯笼果（Physalis angulata）花萼的抗炎潜力：这篇发表于《沙特生物科学杂志》的论文，利用LPS刺激的RAW 264.7细胞，研究了10种哥伦比亚常用传统植物的抗炎潜力。
RAW 264.7细胞：资源、操作规程、视频及更多内容
RAW 264.7细胞常用于转染研究。以下资源介绍了适用于RAW 264.7细胞系的各种转染方法。
- RAW 264.7细胞转染：本网站将提供使用Lipofectamine试剂对RAW 264.7巨噬细胞进行转染的操作规程。
- 转染操作规程：这篇已发表的文章详细描述了 RAW 264.7 细胞的转染操作规程。
- RAW 264.7细胞的高效转染方法：本文档介绍了另一种针对RAW 264.7细胞的实用转染方法。
与 RAW 264.7 细胞系相关的视频
- RAW 264.7细胞培养：本视频讲解了RAW 264.7细胞的传代操作流程。
- 转染方法：本视频介绍了将报告基因转染至 RAW 264.7 细胞的方法。
关于RAW 264.7细胞系的必读常见问题：深入了解巨噬细胞模拟与破骨细胞分化研究
RAW 264.7 细胞系来自雄性 BALB/c 小鼠腹水中由阿贝尔森鼠白血病病毒（A-MuLV）诱发的肿瘤。
RAW 264.7 细胞被用作巨噬细胞的模型，因为它们能够执行吞噬和针吞等关键功能，而这些功能是先天性免疫反应的标志。
是的，虽然 RAW 264.7 细胞不是破骨细胞，但它们可用于研究破骨细胞生成过程和破骨细胞生成基因的表达，这有助于我们了解骨骼健康和骨质疏松症等疾病。
RAW 264.7 细胞通过模仿巨噬细胞的反应来应对微生物刺激，因此非常适合研究宿主与病原体之间的相互作用以及细胞对各种生物系统的反应。
RAW 264.7 细胞中细胞因子的产生对于了解炎症过程和参与免疫反应的细胞信号通路（如 NF-κB/MAPK 通路）至关重要。
不，RAW 264.7 细胞不是原代细胞，而是永生化细胞系。原代细胞是指直接从活组织中提取的细胞，在培养过程中的寿命有限。
RAW 264.7 细胞在支持其生长的特定培养基中培养，并在受控温度和大气条件下保存，以确保其在实验中的功能稳定性。
RAW 264.7 细胞在其基础状态（M0）下可极化为 M1 类促炎或 M2 类抗炎特性，具体取决于它们在培养过程中受到的刺激。
是的，RAW 264.7 细胞经常用于评估天然产品（包括植物提取的化合物）的生物活性，以确定其潜在的免疫调节或治疗效果。
典型的标记包括 F4/80 和 CD11b，它们通常用于确认 RAW 264.7 细胞的巨噬细胞样表型，以及它们的功能标记，如抗性酸性磷酸酶和吞噬活性。
参考文献
- Taciak, B. 等，通过连续传代评估RAW 264.7细胞系的表型和功能稳定性。《PLoS ONE》，2018年，13(6)：第e0198943页。
- Wang, S. 等，炎症性巨噬细胞通过调节 Notch 信号通路干扰骨细胞成熟和矿化。《Molecular Medicine》，2022 年，28(1)：第 102 页。
- 奥列霍夫（Orekhov），A.N. 等，单核细胞分化与巨噬细胞极化。《Vessel Plus》，2019年，第3期：第10页。
- Khabipov, A. 等，胰腺癌细胞诱导的 RAW 264.7 巨噬细胞极化——研究促肿瘤巨噬细胞的模型。《抗癌研究》，2019 年，39(6)：第 2871-2882 页。
- Kang, C.-H. 等，热灭活乳酸菌通过诱导型一氧化氮合酶和环氧化酶-2抑制 RAW 264.7 细胞中一氧化氮的产生。《益生菌与抗菌蛋白》，2021. 13(6)：第1530-1538页。
- 张，J.等人，《西伯利亚玉竹（Polygonatum sibiricum Delar. ex Redoute）多糖通过NF-κB/MAPK通路在RAW264.7细胞系中诱导免疫应答》。 《RSC Advances》，2019年。9(31)：第17988-17994页。
- Trinh, T.A. 等，中药制剂对RAW 264.7巨噬细胞免疫应答增强的影响。《Biomolecules》，2020年，第10卷第3期：第424页。