发布日期:2023年 | 最后修订日期:2026年5月
理解“传代数”
“传代数”这一概念是细胞培养的核心概念,指细胞系从冷冻保存中复苏或从参考细胞库接收后,被传代或转移至新鲜培养基的次数。该指标对于追踪细胞培养的谱系和历史至关重要。
流程概述
- 在常规细胞培养实践中,当细胞达到一定密度时,会将其转移至新培养基中以维持生长并防止细胞过度汇合。每次此类转移均被记录为一个传代。
- 传统上,例如当我们从寄存者处收到一个第60代的细胞系时,我们会从该代数开始继续计数,并随着每次传代而递增。这种做法虽然保持了历史连续性,但往往导致细胞系从一开始就具有较高的传代数。 鉴于某些细胞系(如1951年建立的HeLa细胞系)被广泛使用且往往已有数十年历史,要确定自该细胞系建立以来的总传代数是不现实的。
- 为提高细胞培养流程的清晰度和质量,我们在2023年初修订了这一做法。现在,当我们从新小瓶开始培养时,无论供体提供的传代数是多少,我们都会重置计数,并为每个生产批次从第一代开始重新计数。
理由
传代是确保细胞培养物健康和研究实用性的关键步骤。当细胞过度增殖时,会发生接触抑制,从而降低其增殖率,这可能对实验结果产生不利影响。 为缓解这些问题,Cytion对传代时的细胞密度实施严格控制,从而在细胞系生产过程中保持较低的传代次数。 这一预防措施有助于防止过度传代带来的不良影响,例如形态异常、生长速率变化和基因漂变,这些因素可能会导致细胞与原始状态产生显著差异。长时间的传代还会增加微生物污染的风险。
我们的承诺
我们确保提供给研究人员的细胞尽可能接近原始的遗传构成和表型特征,从而提高实验数据的可靠性。此外,通过详细记录每次传代,Cytion 致力于提升研究的可追溯性和可重复性,这一承诺体现了细胞培养领域的高标准实践。 我们建议研究人员在培养容器上及实验笔记本中准确记录传代次数,作为评估细胞培养健康状况和追踪培养历史的重要依据。
技巧与常见错误
遵循正确的操作规程固然重要,但了解常见的操作陷阱同样关键。细胞培养过程对技术操作、时间控制及试剂质量的细微偏差都极为敏感。以下提示基于 Cytion 科研团队丰富的细胞培养经验,总结了最佳实践建议。
- 使用前务必将试剂预热至 37°C,以最大限度地减少细胞受到的热冲击。
- 操作需迅速且谨慎——尽量缩短细胞在培养箱外停留的时间。
- 使用经过认证且经过支原体检测的试剂,以避免可能影响实验结果的污染。
- 记录每个步骤,包括传代次数、日期以及细胞形态观察结果。
- 在扩大规模前,先通过小型试点实验验证您的实验方案,以避免浪费昂贵的试剂。
推荐的 Cytion 试剂
Cytion提供一系列经过验证的细胞培养试剂,专为支持本实验方案而设计。所有试剂均经过常用细胞系的性能测试,并附有完整的文档资料。请访问cytion.com/Media-Reagents浏览完整产品组合。