תאי imWilms1

‏800.00 ‏$*

המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 ⁶ תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 10⁶ תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).

מחירים לא כולל מיסים בתוספת עלויות משלוח

cryovial

מספר מוצר: 300412

גיליון בטיחות

גיליון מוצר

תעודת ניתוח (CoA)

תיאור	קו התאים Wilms1 נגזר במקור מגידול Wilms ראשוני, שהושג מחולה שאובחן עם גידולים גדולים בשתי הכליות, תופעה אופיינית לגידול Wilms (נפרובלסטומה). קו תאים זה נושא מוטציה הומוזיגוטית חסרת משמעות בגן WT1 (c.149 C>A, p.S50X), המובילה לייצור חלבון WT1 מקוצר ולא תפקודי. WT1 הוא גן קריטי בהתפתחות הכליות, והמוטציה בו קשורה קשר הדוק לפתוגנזה של גידול וילמס, במיוחד בגידולים המפגינים הבחנה סטרומלית. תאי Wilms1 מציגים קריוטיפ יציב ללא חריגות כרומוזומליות משמעותיות, והם מאופיינים בפנוטיפ מזנכימלי, המבטא וימנטין תוך היעדר סמנים אפיתלליים כמו ציטוקראטין. הקו מציג יכולת מוגבלת אך משמעותית להבחנה מזנכמלית, כולל פוטנציאל להבחנה לתאים דמויי שריר בתנאים ספציפיים, מה שהופך אותו למודל חיוני לחקר ההשלכות המולקולריות של מוטציות WT1. כדי להתגבר על תוחלת החיים המוגבלת של תאי Wilms1 הראשוניים, שושלת התאים imWilms1 הוקמה על ידי החדרת אנטיגן T גדול SV40 משולש מוטציה (U19dl89-97tsA58) לתאי הגידול המקוריים, מה שמקל על הנצחתם. שינוי זה מאפשר לתאי imWilms1 להתרבות ללא הגבלת זמן תוך שמירה על יציבות כרומוזומלית, ובכך מספק מודל אמין למחקרים ארוכי טווח. תאי imWilms1 המונצחים ממשיכים להפגין את אותה מוטציה WT1 ושומרים על המאפיינים המזנכימליים של קו Wilms1 ההורי. בנוסף לתכונות הגנטיות והפנוטיפיות שלו, קו התאים imWilms1 נותח בהרחבה על פעילות מסלולי האיתות שלו. מחקרים פרוטאומיים חשפו את הזרחון וההפעלה של מספר קולטני טירוזין קינאז (RTK), כולל EGFR, PDGFRβ ו-AXL, עם הפעלה במורד הזרם של מסלולי האיתות MAPK. הפעלתם העקבית של מסלולים אלה בתאי imWilms1 מדגישה את הרלוונטיות שלהם לחקר אסטרטגיות טיפוליות ממוקדות בגידול וילמס. בסך הכל, imWilms1 משמש מודל יציב וארוך טווח לחקר המנגנונים המולקולריים העומדים בבסיס התפתחות והתקדמות גידול וילמס, במיוחד אלה המונעים על ידי מוטציות WT1 ומסלולי איתות חריגים.
אורגניזם	אדם
רקמה	כליה
מחלה	גידול וילמס
מילים נרדפות	IM-WT-1

גיל	10 חודשים
מגדר	נקבה
מוצא אתני	קווקזי
מורפולוגיה	בצורת ציר
סוג התא	תאי וילמס
תכונות צמיחה	דבק

ציטוט	imWilms1 (מספר קטלוגי Cytion 300412)
רמת בטיחות ביולוגית	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_A5SN
סטטוס GMO	GMO-S1: קו תאי הגידול Wilms האנושי imWilms1 מכיל קלטת אנטיגן T SV40 משולשת מוטציה המאפשרת הנצחה מותנית למחקר בנושא נפרובלסטומה. סיווג זה חל רק בגרמניה ועשוי להיות שונה במקומות אחרים.

פרופיל מוטציוני	סטטוס מוטציה WT1: הומוזיגוטי c. 149 C>A, p.S50x, LOH: 11p11-11pter, סטטוס מוטציה CTNNB1: הטרוזיגוטי TCT>TTT, p.S45F

תרבית ביניים	ערכת MSCGM (מבית Lonza)
חומר מפרק	אקוטאז
תת-תרבות	הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
חידוש נוזלים	1 עד 2 פעמים בשבוע
חומר הקפאה	כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
הפשרה וגידול תאים	ודא שהבקבוקון נשאר קפוא לחלוטין בעת המסירה, שכן התאים נשלחים בקרח יבש כדי לשמור על טמפרטורה אופטימלית במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, אחסן את הבקבוקון הקריוגני מיד בטמפרטורה נמוכה מ-150°C כדי להבטיח את שמירת שלמות התאים, או המשך לשלב 3 אם נדרשת תרבית מיידית. לצורך תרבית מיידית, הפשיר את הבקבוקון במהירות על ידי טבילתו באמבט מים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם מים נקיים וחומר אנטי-מיקרוביאלי, תוך ערבוב עדין במשך 40-60 שניות עד שנותר גוש קרח קטן. בצע את כל השלבים הבאים בתנאים סטריליים במנדף, וחטא את בקבוקון הקריוואלי באתנול 70% לפני הפתיחה. פתח בזהירות את הבקבוקון המחוטא והעבר את תמיסת התאים לצינור צנטריפוגה בנפח 15 מ"ל המכיל 8 מ"ל של מצע תרבית בטמפרטורת החדר, תוך ערבוב עדין. סובבו את התערובת בצנטריפוגה ב-300 x g למשך 3 דקות כדי להפריד את התאים, וזרקו בזהירות את הנוזל העליון המכיל את שאריות מצע ההקפאה. השרו בעדינות את משקע התאים ב-10 מ"ל של מצע תרבית טרי. עבור תאים נצמדים, חלקו את התמיסה בין שני צלוחיות תרבית T25; עבור תרבויות תמיסה, העבירו את כל המצע לצלוחית T25 אחת כדי לקדם אינטראקציה וצמיחה יעילות של התאים. הקפידו על פרוטוקולי תת-תרבות קבועים להמשך צמיחה ותחזוקה של קו התאים, כדי להבטיח תוצאות ניסוי אמינות.
אטמוספירת דגירה	37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.
ציפוי בקבוק	אף אחד
הליך ההקפאה	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי משלוח	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי אחסון	לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

עקרות	זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה. כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
אללים HLA	A: '03:01:01, '24:02:01 B: '35:03:01, '38:01:01 C: 12:03:01 DRB1: 07:01:01, 14:54:01 DQA1: '01:04:01, '02:01:01 DQB1: '02:02:01, '05:03:01 DPB1*: '02:01:02G, '04:02:01G E: 01:03:01, 01:03:02

מספר לוט	סוג התעודה	תאריך	מספר קטלוגי
300412-221	תעודת ניתוח	23. May. 2025	300412
300412-030624	תעודת ניתוח	18. Aug. 2025	300412

תאי imWilms1

מידע כללי

מאפיינים

נתונים רגולטוריים

נתונים ביו-מולקולריים

טיפול

בקרת איכות / פרופיל גנטי / HLA

תעודת ניתוח (CoA)