תאי טולדו

‏800.00 ‏$*

המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 ⁶ תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 10⁶ תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).

מחירים לא כולל מיסים בתוספת עלויות משלוח

cryovial

מספר מוצר: 305351

גיליון בטיחות

גיליון מוצר

תעודת ניתוח (CoA)

תיאור	קו התאים "טולדו" הוא קו תאים של לימפומה מפושטת של תאי B גדולים (DLBCL), שהוקם במקור מדם היקפי של חולה ב-DLBCL, אשר לימים פיתח לימפומה משנית במוח בעקבות כימותרפיה במינון גבוה והשתלת מח עצם. קו תאים זה מציג קריוטיפ מורכב עם חריגות כרומוזומליות מרובות, אך אינו כולל את הטרנסלוקציות האופייניות הקשורות ללימפומה של בורקיט. אחת התכונות הייחודיות של קו התאים טולדו היא היעדר ביטוי של שרשרת הפוליפפטיד של אימונוגלובולין (Ig), וכן היעדר קטעי גנים ניתנים לזיהוי באזור הקבוע (C). למרות זאת, Toledo שומר על היכולת לעבור היפרמוטציה סומטית בקטעי הגן המשתנים (V) שלו, תופעה הנצפית בדרך כלל בתאי B במרכז הגרמינלי. מעניין לציין כי קו התאים טולדו צובר מוטציות תוך-קלונליות בתדירות גבוהה יותר מאשר קווי תאים אחרים של לימפומה, כגון דאודי (Daudi) וראג'י (Raji), למרות היעדרן של מוטציות קלונליות משמעותיות. דבר זה מצביע על כך שתהליך המוטציה עשוי היה להימשך במבחנה לאחר הטרנספורמציה, ובכך להציע מודל בעל ערך לחקר המנגנונים המולקולריים של היפרמוטציה סומטית.
אורגניזם	אדם
רקמה	דם היקפי
מחלה	לימפומה מפושטת של תאי B גדולים מסוג תאי B במרכז הגרמינלי
יישומים	תרבות תאים תלת-ממדית, אימונולוגיה
מילים נרדפות	טולדו

גיל	מבוגר
מגדר	נקבה
מוצא אתני	קווקזי
מורפולוגיה	לימפוציט
תכונות צמיחה	השעיה

ציטוט	טולדו (מספר קטלוג Cytion 305351)
רמת בטיחות ביולוגית	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_3611

ביטוי אנטיגן	CD10+, CD19+, CD20+, CD38+, CD23-, CD39-
נגיפים	EBV-, HBV-, HCV-, HIV-1-, HIV-2-, HTLV-1/2-, MLV-, SMRV-
פרופיל מוטציוני	מוטציה: KRAS, פשוטה, p.Gly13Asp (c.38G>A), הטרוזיגוטית; מוטציה: TP53, פשוטה, p.Glu198fs (c.592_596del5), לא צוין

תרבית ביניים	RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
תוספים	הוסף לתווך 10% FBS
חומר מפרק	אף אחד
זמן הכפלה	50 שעות
תת-תרבות	שמרו על התרבויות על ידי הוספה או החלפה תקופתית של המצע. התחילו את התרבויות בצפיפות של 5 x 10⁵ תאים/מ"ל ושמרו על ריכוז התאים בטווח של 3 x 10⁵ עד 1 x 10⁶ תאים/מ"ל לצורך צמיחה מיטבית.
צפיפות זריעה	2 עד 4 × 10^⁵ תאים/מ"ל
חידוש נוזלים	כל 2-3 ימים
חומר הקפאה	כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
הפשרה וגידול תאים	ודא שהבקבוקון נשאר קפוא לחלוטין בעת המסירה, שכן התאים נשלחים בקרח יבש כדי לשמור על טמפרטורה אופטימלית במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, אחסן את הבקבוקון הקריוגני מיד בטמפרטורה נמוכה מ-150°C כדי להבטיח את שמירת שלמות התאים, או המשך לשלב 3 אם נדרשת תרבית מיידית. לצורך תרבית מיידית, הפשיר את הבקבוקון במהירות על ידי טבילתו באמבט מים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם מים נקיים וחומר אנטי-מיקרוביאלי, תוך ערבוב עדין במשך 40-60 שניות עד שנותר גוש קרח קטן. בצע את כל השלבים הבאים בתנאים סטריליים במנדף, וחטא את בקבוקון הקריוואלי באתנול 70% לפני הפתיחה. פתח בזהירות את הבקבוקון המחוטא והעבר את תמיסת התאים לצינור צנטריפוגה בנפח 15 מ"ל המכיל 8 מ"ל של מצע תרבית בטמפרטורת החדר, תוך ערבוב עדין. סובבו את התערובת בצנטריפוגה ב-300 x g למשך 3 דקות כדי להפריד את התאים, וזרקו בזהירות את הנוזל העליון המכיל את שאריות מצע ההקפאה. השרו בעדינות את משקע התאים ב-10 מ"ל של מצע תרבית טרי. עבור תאים נצמדים, חלקו את התמיסה בין שני צלוחיות תרבית T25; עבור תרבויות תמיסה, העבירו את כל המצע לצלוחית T25 אחת כדי לקדם אינטראקציה וצמיחה יעילות של התאים. הקפידו על פרוטוקולי תת-תרבות קבועים להמשך צמיחה ותחזוקה של קו התאים, כדי להבטיח תוצאות ניסוי אמינות.
אטמוספירת דגירה	37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.
תנאי משלוח	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי אחסון	לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

עקרות	זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה. כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

מספר לוט	סוג התעודה	תאריך	מספר קטלוגי
305351-210526	תעודת ניתוח	13. Jul. 2026	305351

תאי טולדו

מידע כללי

מאפיינים

נתונים רגולטוריים

נתונים ביו-מולקולריים

טיפול

בקרת איכות וניתוח מולקולרי

תעודת ניתוח (CoA)