תאי TC-1

‏550.00 ‏$*

המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 ⁶ תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 10⁶ תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).

מחירים לא כולל מיסים בתוספת עלויות משלוח

cryovial

מספר מוצר: 305388

גיליון בטיחות

גיליון מוצר

תעודת ניתוח (CoA)

תיאור	TC-1 הוא קו תאים אפיתל ריאתי עכברי שעבר טרנספורמציה עם אונקוגנים E6 ו-E7 של נגיף הפפילומה האנושי מסוג 16 (HPV16), יחד עם אונקוגן H-ras מופעל. קו התאים פותח מתאי אפיתל ריאתי ראשוניים של עכברי C57BL/6 באמצעות אסטרטגיה של העברה רטרו-ויראלית כפולה. בתחילה, וקטור רטרו-ויראלי שמקורו בנגיף לוקמיה עכברי Moloney (MoMLV), כגון pLXSN-16E6E7, שימש להעברת אונקוגנים E6 ו-E7. בוקטור זה, הגנים מבוטאים מהמקדם הוויראלי 5′ LTR, וגנים עמידים לניאומיצין (Neo^R) תחת בקרת מקדם SV40 פנימי אפשרו בחירה עם G418. ביטוי יציב של E6 ו-E7 מביא להשבחת מסלולי מדכאי הגידול p53 ו-Rb, מה שמוביל להנצחת התאים. לאחר הבחירה הראשונית, הוכנס וקטור רטרו-ויראלי שני מבוסס MoMLV המקודד גן H-ras (G12V) מופעל כדי להשלים את הטרנספורמציה. וקטור זה נשא סמן ברירה שונה, בדרך כלל גן עמיד להיגרומיצין (hph), המונע על ידי פרומוטור פנימי כגון SV40 או PGK. תאים ששרדו ברירה רציפה עם G418 והיגרומיצין הפגינו שילוב יציב של שלושת האונקוגנים, מה שהביא לתאים TC-1 שעברו טרנספורמציה מלאה והפכו לבלתי מוות. במחקרים תפקודיים, תאי TC-1 מפגינים ביטוי חזק של מולקולות MHC מסוג I, מה שהופך אותם לאימונוגניים ביותר ומשמשים רבות להערכת חיסונים ניסיוניים וטיפולים אימונולוגיים המכוונים לממאירויות הקשורות ל-HPV. הם שימשו ככלי עזר במחקרים פרה-קליניים על חיסונים, במיוחד אלה שמטרתם לעורר תגובות של תאי T ^מסוג CD8⁺ נגד HPV16 E7. בנוסף, פותחו תת-קווים עם ביטוי MHC class I מופחת כדי לחקות מנגנוני בריחה חיסונית, מה שמספק תובנות נוספות על האינטראקציה בין תאי הגידול לבין החיסון של המארח. תכונות אלה הופכות את TC-1 למודל חזק ורב-תכליתי לפיתוח אימונו-אונקולוגיה וחיסונים נגד HPV.
אורגניזם	עכבר

מגדר	לא צוין
מוצא אתני	לא צוין
מורפולוגיה	דמוי אפיתל
סוג התא	אפיתל
תכונות צמיחה	דבק

ציטוט	TC-1 (מספר קטלוגי Cytion 305388)
רמת בטיחות ביולוגית	1
NCBI_TaxID	10090
CellosaurusAccession	CVCL_4699
סטטוס GMO	GMO-S1: קו תאים אפיתל ריאתי עכברי זה (TC-1) מכיל את האונקוגנים HPV16 E6/E7 המועברים באמצעות וקטור רטרו-ויראלי pLXSN16E6E7 יחד עם רצפים אונקוגניים HRAS, התומכים בשינוי חזק. התוספות משולבות באופן יציב. סיווג זה חל רק בגרמניה ועשוי להיות שונה במקומות אחרים.

תרבית ביניים	DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
תוספים	הוסף לתווך 10% FBS
חומר מפרק	אקוטאז
זמן הכפלה	18.שעתיים
חומר הקפאה	כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
הפשרה וגידול תאים	ודא שהבקבוקון נשאר קפוא לחלוטין בעת המסירה, שכן התאים נשלחים בקרח יבש כדי לשמור על טמפרטורה אופטימלית במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, אחסן את הבקבוקון הקריוגני מיד בטמפרטורה נמוכה מ-150°C כדי להבטיח את שמירת שלמות התאים, או המשך לשלב 3 אם נדרשת תרבית מיידית. לצורך תרבית מיידית, הפשיר את הבקבוקון במהירות על ידי טבילתו באמבט מים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם מים נקיים וחומר אנטי-מיקרוביאלי, תוך ערבוב עדין במשך 40-60 שניות עד שנותר גוש קרח קטן. בצע את כל השלבים הבאים בתנאים סטריליים במנדף, וחטא את בקבוקון הקריוואלי באתנול 70% לפני הפתיחה. פתח בזהירות את הבקבוקון המחוטא והעבר את תמיסת התאים לצינור צנטריפוגה בנפח 15 מ"ל המכיל 8 מ"ל של מצע תרבית בטמפרטורת החדר, תוך ערבוב עדין. סובבו את התערובת בצנטריפוגה ב-300 x g למשך 3 דקות כדי להפריד את התאים, וזרקו בזהירות את הנוזל העליון המכיל את שאריות מצע ההקפאה. השרו בעדינות את משקע התאים ב-10 מ"ל של מצע תרבית טרי. עבור תאים נצמדים, חלקו את התמיסה בין שני צלוחיות תרבית T25; עבור תרבויות תמיסה, העבירו את כל המצע לצלוחית T25 אחת כדי לקדם אינטראקציה וצמיחה יעילות של התאים. הקפידו על פרוטוקולי תת-תרבות קבועים להמשך צמיחה ותחזוקה של קו התאים, כדי להבטיח תוצאות ניסוי אמינות.
אטמוספירת דגירה	37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.
ציפוי בקבוק	אף אחד
הליך ההקפאה	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי משלוח	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי אחסון	לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

עקרות	זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה. כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

מספר לוט	סוג התעודה	תאריך	מספר קטלוגי
305388-090725	תעודת ניתוח	18. Aug. 2025	305388
305388-260325	תעודת ניתוח	18. Aug. 2025	305388

תאי TC-1

מידע כללי

מאפיינים

נתונים רגולטוריים

נתונים ביו-מולקולריים

טיפול

בקרת איכות וניתוח מולקולרי

תעודת ניתוח (CoA)