תאי SUP-T1

‏430.00 ‏$*

המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 ⁶ תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 10⁶ תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).

מחירים לא כולל מיסים בתוספת עלויות משלוח

מבחנה קריוגנית

מספר מוצר: 305642

גיליון בטיחות

גיליון מוצר

תיאור	SUP-T1 הוא קו תאים של לימפומה לימפובלסטית של תאי T אנושיים (T-LBL), שמקורו בנוזל פלאורלי של ילד שאובחן עם לימפומה שאינה הודג'קין של תאי T. הוא נושא את הטרנסלוקציה הכרומוזומלית האופיינית t(8;14)(q24;q11), המציבה את האונקוגן MYC בסמיכות ללוקוס של קולטן תאי T אלפא/דלתא (TCRα/δ). טרנסלוקציה זו מובילה לביטוי-יתר של MYC, מה שמקדם את שגשוג התאים ומעכב אפופטוזיס, שהם גורמים מרכזיים בהתפתחות הלימפומה. בשל מאפיין גנטי זה, SUP-T1 משמש מודל חשוב לחקר המנגנונים המולקולריים העומדים בבסיס ממאירויות תאי T אגרסיביות ולבחינת טיפולים ממוקדים. ניתוחים גנומיים של SUP-T1 זיהו שינויים אונקוגניים נוספים, כולל מחיקות וארגונים מחדש המשפיעים על הגן CDKN2A, מדכא גידולים קריטי המעורב בוויסות מחזור התא. אובדן CDKN2A מוביל להתקדמות לא מבוקרת של מחזור התא, מה שתורם עוד יותר לפנוטיפ האגרסיבי של לימפומה זו. ממצאים אלה הופכים את SUP-T1 למודל בעל ערך לחקירת האונקוגנזה המונעת על ידי MYC, כמו גם את תפקידו של אובדן מדכא הגידול במחלות ממאירות של תאי T. מחקרים אחרונים שהשתמשו בריצוף מהדור הבא (NGS) ובפרופיל טרנסקריפטומי סיפקו תובנות מעמיקות יותר לגבי המצב הוויראלי ותמונת המוטציות של SUP-T1. סינון רצפים נגיפיים באמצעות נתוני RNA-Seq אישר כי SUP-T1 נקי מנגיף אפשטיין-בר (EBV) וממזהמים נגיפיים נפוצים אחרים, מה שמבטיח את אמינותו לניסויים מבוקרים במבחנה. בנוסף, הפרופיל הגנטי שלו שולב במאגרי נתונים פרמקוגנומיים בקנה מידה גדול, המסייעים בזיהוי אסטרטגיות טיפוליות ממוקדות ללימפומות של תאי T. SUP-T1 ממשיך להוות כלי חיוני במחקר פרה-קליני, במיוחד בפיתוח טיפולים חדשניים למחלות ממאירות אגרסיביות של תאי T.
אורגניזם	אדם
רקמה	הצטברות נוזלים בחלל הצדר
מחלה	לימפומה לימפובלסטית; תאי T
מילים נרדפות	Sup-T1, SUPT-1, SupT-1, Sup T-1, SUP T-1, SUP T1, Sup T1, SupT1, SUPT1, Tsup-1, VB, קו תאי T פדיאטריים מס' 1 מאוניברסיטת סטנפורד

גיל	8 שנים
מגדר	זכר
מוצא אתני	קווקזי
מורפולוגיה	לימפוציט
סוג התא	לימפוציט T
תכונות צמיחה	השעיה

ציטוט	SUP-T1 (מספר קטלוגי של Cytion: 305642)
רמת בטיחות ביולוגית	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_1714

ביטוי חלבון	אימונוגלובולין (ציטופלזמי)
ביטוי אנטיגן	Leu-6 (CD1a) +; Leu-4 (CD3) +; Leu-3 (CD4) +; Leu-1 (CD5) +; Leu-9 (CD7) +; Leu-2a (CD8) +; OKT-10 (CD38) +
פרופיל מוטציוני	מוטציה: EGFR, פשוטה, p.Cys251Tyr (c.752G>A), הטרוזיגוטית; מוטציה: KIT, פשוטה, p.Arg177His (c.530G>A), הטרוזיגוטית; מוטציה: MET, פשוטה, p.Arg191Trp (c.571C>T), הטרוזיגוטית; מוטציה: PIK3CA, פשוטה, p.Glu545Asp (c.1635G>T), הטרוזיגוטית; מוטציה: PIK3CA, פשוטה, p.Glu970Lys (c.2908G>A), הטרוזיגוטית; מוטציה: PTCH1, פשוטה, p.Arg682Cys (c.2044C>T), הטרוזיגוטית; מוטציה: SPRY4, פשוטה, p.Arg25Trp (c.73C>T), הטרוזיגוטית; מוטציה: TP53, פשוטה, p.Arg267Leu (c.800G>T), הטרוזיגוטית
קריוטיפ	92, XXYY, -2, -2, -9, -9, קיימים הסמנים הבאים: 2inv(2) (p21q11), +2inv(2), del(2*)(Q21), 2del(4)(q31q35), 2del(5)(p13p14), 2del(6)(q23q27), 2inv(14)(q11q32), t(7;9)(q34;q34), der(9)t(7;9)

תרבית ביניים	RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
תוספים	הוסף לתווך 10% FBS
זמן הכפלה	28 שעות
צפיפות זריעה	2–5 × 10⁵ תאים/מ"ל
חידוש נוזלים	2 עד 3 פעמים בשבוע
חומר הקפאה	כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
הפשרה וגידול תאים	ודא שהבקבוקון נשאר קפוא לחלוטין בעת המסירה, שכן התאים נשלחים בקרח יבש כדי לשמור על טמפרטורה אופטימלית במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, אחסן את הבקבוקון הקריוגני מיד בטמפרטורה נמוכה מ-150°C כדי להבטיח את שמירת שלמות התאים, או המשך לשלב 3 אם נדרשת תרבית מיידית. לצורך תרבית מיידית, הפשיר את הבקבוקון במהירות על ידי טבילתו באמבט מים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם מים נקיים וחומר אנטי-מיקרוביאלי, תוך ערבוב עדין במשך 40-60 שניות עד שנותר גוש קרח קטן. בצע את כל השלבים הבאים בתנאים סטריליים במנדף, וחטא את בקבוקון הקריוואלי באתנול 70% לפני הפתיחה. פתח בזהירות את הבקבוקון המחוטא והעבר את תמיסת התאים לצינור צנטריפוגה בנפח 15 מ"ל המכיל 8 מ"ל של מצע תרבית בטמפרטורת החדר, תוך ערבוב עדין. סובבו את התערובת בצנטריפוגה ב-300 x g למשך 3 דקות כדי להפריד את התאים, וזרקו בזהירות את הנוזל העליון המכיל את שאריות מצע ההקפאה. השרו בעדינות את משקע התאים ב-10 מ"ל של מצע תרבית טרי. עבור תאים נצמדים, חלקו את התמיסה בין שני צלוחיות תרבית T25; עבור תרבויות תמיסה, העבירו את כל המצע לצלוחית T25 אחת כדי לקדם אינטראקציה וצמיחה יעילות של התאים. הקפידו על פרוטוקולי תת-תרבות קבועים להמשך צמיחה ותחזוקה של קו התאים, כדי להבטיח תוצאות ניסוי אמינות.
אטמוספירת דגירה	37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.
תנאי משלוח	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי אחסון	לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

עקרות	זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה. כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

תאי SUP-T1

מידע כללי

מאפיינים

נתונים רגולטוריים

נתונים ביו-מולקולריים

טיפול

בקרת איכות וניתוח מולקולרי