SK-BR-3-Luc
800.00 $*
המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 6 תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 106 תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).
מידע כללי
| תיאור | SK-BR-3-Luc הוא נגזרת ביולומינסצנטית של קו התאים האנושי SK-BR-3 של אדנוקרצינומה בשד, שהונדסה כך שתבטא באופן יציב גן דיווח של לוקיפרז של גחלילית. קו התאים SK-BR-3 המקורי הוקם מתוך גרורה של אדנוקרצינומה של השד שהתגלתה בנוזל הפלאורלי של מטופלת לבנה בת 43, והוא מאופיין בהגברה וביטוי-יתר של הגן HER2 (ERBB2), מה שמסווג אותו כמודל לסרטן שד חיובי ל-HER2. תאי SK-BR-3 מציגים צמיחה בשכבה חד-תאית דמוית אפיתל, והם נמצאים בשימוש נרחב לחקר הביולוגיה של סרטן השד המונע על ידי HER2 ולהערכת טיפולים המכוונים ל-HER2, כולל טראסטוזומאב, לפטיניב, פרטוזומאב, ותרכובות נוגדן-תרופה כגון טראסטוזומאב-דרוקסטקאן. השילוב היציב של לוקיפרז ב-SK-BR-3-Luc מאפשר הדמיה רגישה וכמותית באמצעות ביולומיננס (BLI) של עומס הגידול במודלים של שתלים זרים במאכסנים בעלי מערכת חיסון מוחלשת. האות הזוהר הנפלט מתואם למספר תאי הגידול החיים, ומאפשר מעקב ארוך טווח ולא פולשני אחר השתלת הגידול, קינטיקת הצמיחה ותגובת הטיפול. SK-BR-3-Luc הוא בעל ערך רב במיוחד להערכה פרה-קלינית של חומרים נגד HER2, ADCs, נוגדנים דו-ספציפיים ואסטרטגיות שילוב המכוונות לציר האיתות של HER2 בסרטן השד, כמו גם לסינון תרופות בתפוקה גבוהה ולמחקרים פרמקודינמיים in vivo. SK-BR-3-Luc שומר על הפנוטיפ המולקולרי המוגבר של HER2 ועל מאפייני הצמיחה של קו SK-BR-3 ההורי. הרפורט של לוקיפרז משפר באופן משמעותי את תפוקת הניסוי ואת הרגישות למחקרי הדמיה in vivo. על החוקרים לאמת את פעילות הלוציפרז, את מצב הגברת ה-HER2 ואת קינטיקת הצמיחה בתנאי הניסוי הספציפיים שלהם לפני שימוש פרה-קליני בקנה מידה נרחב. |
|---|---|
| אורגניזם | אדם |
| רקמה | גרורתי |
| מחלה | אדנוקרצינומה של השד |
| אתר גרורתי | הצטברות נוזלים בחלל הצדר |
מאפיינים
| גיל | 43 שנים |
|---|---|
| מגדר | נקבה |
| מוצא אתני | קווקזי |
| מורפולוגיה | דמוי אפיתל |
| תכונות צמיחה | שכבה אחת, דבוקה |
נתונים רגולטוריים
| ציטוט | SK-BR-3-Luc (מספר קטלוג Cytion 305709) |
|---|---|
| רמת בטיחות ביולוגית | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_4Y11 |
| סטטוס GMO | GMO-S1: קו תאים זה מכיל קלטת דיווח של לוקיפרז של גחלילית (Luc2, עם קודונים מותאמים) המשולבת באופן יציב, שהוכנסה באמצעות העברה לנטרווירוס שאינו מסוגל לשכפל את עצמו. אוכלוסיית התאים הפוליקלונלית שהתקבלה נשמרה תחת סלקציה של פורומיצין (1–5 µg/mL). נדרשת רמת אבטחה S1. סיווג זה חל רק בגרמניה ועשוי להיות שונה במקומות אחרים. |
נתונים ביו-מולקולריים
| ביטוי אנטיגן | סוג דם A, Rh+, HLA A11, Bw22(+/-), B40, B18, Luc2 (פיית האש, מותאם לקודון) |
|---|---|
| איזואנזימים | PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, תוצר תדירות הפנוטיפ: 0.0044 |
| Tumorigenic | כן, בעכברים עירומים, צורות אדנוקרצינומה מובחנות גרוע |
| פרופיל מוטציוני | מוטציה: p.Arg175His, הומוזיגוטית |
טיפול
| תרבית ביניים | מקויז |
|---|---|
| תוספים | הוסף לתווך 10% FBS |
| חומר מפרק | אקוטאז |
| תת-תרבות | הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי. |
| יחס פיצול | 1 עד 3 |
| צפיפות זריעה | 1 עד 3 x 104 תאים/סמ"ר |
| חידוש נוזלים | 2 עד 3 פעמים בשבוע |
| חומר הקפאה | כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה. |
| הפשרה וגידול תאים |
|
| אטמוספירת דגירה | 37°C, 5%CO2, אווירה לחה. |
| תנאי משלוח | שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים. |
| תנאי אחסון | לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי. |
בקרת איכות וניתוח מולקולרי
| אתר גרורתי: | הצטברות נוזלים בחלל הצדר |
|---|