רנקה-לוק
777.00 $*
המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 6 תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 106 תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).
מידע כללי
| תיאור | Renca-Luc הוא נגזרת ביולומינסצנטית של קו התאים Renca של קרצינומה כלייתית בעכברים, שהונדסה כך שתבטא באופן יציב גן-דיווח של לוקיפרז של גחלילית. קו התאים ההורי Renca נגזר באופן ספונטני מקרצינומה של תאי כליה בעכבר מסוג BALB/c, והוא אחד המודלים הסינגניים הנפוצים ביותר לחקר קרצינומה של תאי כליה (RCC) במחקר האימונו-אונקולוגי. גידולים מסוג Renca צומחים באגרסיביות והם בעלי אימונוגניות נמוכה במארחים מסוג BALB/c, מה שהופך מודל זה לבעל ערך רב להערכת גישות אימונוטרפיה, לרבות מעכבי נקודות בקרה, טיפולי ציטוקינים וחיסונים נגד סרטן, בסביבה בעלת תפקוד חיסוני תקין המדמה את הסביבה המיקרו-סביבתית המדכאת את המערכת החיסונית, האופיינית ל-RCC אנושי. השילוב היציב של לוקיפרז ב-Renca-Luc מאפשר הדמיה רגישה ולא פולשנית באמצעות ביולומיננס (BLI) של עומס הגידול במודלים אורתוטופיים של שתל זר מתחת לקפסולת הכליה ומתחת לעור בעכברי BALB/c סינגניים. לאחר מתן לוציפרין, האות הנפלט מתאם עם מספר תאי הגידול החיים, מה שמאפשר מעקב ארוך טווח אחר השתלת הגידול, קינטיקת הצמיחה ותגובה טיפולית ללא צורך בהליכים פולשניים חוזרים. Renca-Luc נמצא בשימוש נרחב להערכה in vivo של חומרים נגד RCC, אסטרטגיות אימונוטרפיה משולבות ומעכבי אנגיוגנזה במחקר פרה-קליני של סרטן הכליה. Renca-Luc שומר על התכונות הביולוגיות והאימונולוגיות המוכחות של קו ה-Renca ההורי, לרבות תאימות סינגנית ל-BALB/c והפנוטיפ האופייני שלו, שאינו אימונוגני במידה רבה. השינוי בלוקיפרז משפר באופן משמעותי את הרגישות הניסויית ומאפשר הערכה פרמקודינמית בזמן אמת של יעילות הטיפול. על החוקרים לאמת את פעילות הלוציפרז, את קינטיקת הגידול ואת המאפיינים האימונולוגיים בתנאי הניסוי הספציפיים שלהם, לפני שימוש בקנה מידה גדול in vivo. |
|---|---|
| אורגניזם | עכבר |
| רקמה | כליה |
| מחלה | קרצינומה של כליה בעכבר |
| מילים נרדפות | קו תאים RenCa עם רפורט לוצ'יפרז |
מאפיינים
| גיל | 6 שבועות |
|---|---|
| מגדר | זכר |
| מוצא אתני | BALB/c |
| מורפולוגיה | דמוי אפיתל |
| תכונות צמיחה | דבק |
נתונים רגולטוריים
| ציטוט | Renca-Luc (מספר קטלוג Cytion 305696) |
|---|---|
| רמת בטיחות ביולוגית | 1 |
| NCBI_TaxID | 10090 |
| CellosaurusAccession | CVCL_E3IJ |
| סטטוס GMO | GMO-S1: קו תאים זה מכיל קלטת דיווח של לוקיפרז של גחלילית (Luc2, עם קודונים מותאמים) המשולבת באופן יציב, שהוכנסה באמצעות העברה לנטרווירוס שאינו מסוגל לשכפל את עצמו. אוכלוסיית התאים הפוליקלונלית שהתקבלה נשמרה תחת סלקציה של פורומיצין (1–5 µg/mL). נדרשת רמת אבטחה S1. סיווג זה חל רק בגרמניה ועשוי להיות שונה במקומות אחרים. |
נתונים ביו-מולקולריים
| ביטוי אנטיגן | Luc2 (גחלילית, מותאם לקודונים) |
|---|---|
| Tumorigenic | כן, בעכברים סינגניים |
טיפול
| תרבית ביניים | RPMI |
|---|---|
| תוספים | הוסף לתווך 10% FBS |
| חומר מפרק | אקוטאז |
| זמן הכפלה | 24–48 שעות |
| תת-תרבות | הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי. |
| יחס פיצול | 1 עד 3 |
| צפיפות זריעה | 1 עד 3 x 104 תאים/סמ"ר |
| חידוש נוזלים | 2 עד 3 פעמים בשבוע |
| חומר הקפאה | כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה. |
| הפשרה וגידול תאים |
|
| אטמוספירת דגירה | 37°C, 5%CO2, אווירה לחה. |
| תנאי משלוח | שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים. |
| תנאי אחסון | לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי. |