תאי RKO-E6

‏550.00 ‏$*

המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 ⁶ תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 10⁶ תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).

מחירים לא כולל מיסים בתוספת עלויות משלוח

cryovial

מספר מוצר: 305135

גיליון בטיחות

גיליון מוצר

תעודת ניתוח (CoA)

תיאור	תאי RKO-E6 הם קו תאים של קרצינומה קולורקטלית אנושית, שמקורם בקו התאים RKO, באמצעות מוטגנזה נוספת. תאים אלה משמשים בדרך כלל במחקר הסרטן, עם דגש מיוחד על סרטן המעי הגס. הגרסה E6 של קו RKO מציעה פרופיל ייחודי, שימושי לבחינת ההשפעות של מניפולציות גנטיות ספציפיות ולמחקר המנגנונים המולקולריים של התפתחות גידולים וגרורות בסרטן המעי הגס. תאי RKO-E6 מאופיינים בכמה תכונות ייחודיות, כולל שינויים בגנים הקשורים לוויסות מחזור התא, אפופטוזיס ומסלולי תיקון DNA. שינויים אלה משפרים את השימושיות של קו התאים לחקר ההשפעות הביולוגיות של השתקת גנים או ביטוי יתר בהקשר של סרטן המעי הגס. לדוגמה, תאי RKO-E6 שימשו לחקר ההשפעה של גנים מדכאי גידולים ואונקוגנים על התנהגות תאי הסרטן, כולל התרבות, פלישה ועמידות לתרופות כימותרפיות. יתר על כן, תאי RKO-E6 שימושיים במחקרים שמטרתם להבין את התגובות התאיות לגורמי לחץ סביבתיים, כגון לחץ חמצוני וחומרים הפוגעים ב-DNA, הרלוונטיים לפתוגנזה ולהתקדמות של סרטן המעי הגס. מאפייני הצמיחה החזקים והיציבות הגנטית שלהם הופכים אותם למודל חשוב עבור בדיקות סקר בתפוקה גבוהה להערכת היעילות של תרכובות חדשות נגד סרטן. לסיכום, תאי RKO-E6 מספקים מודל קריטי לקידום הידע שלנו על הביולוגיה של סרטן המעי הגס ולפיתוח ובדיקה של אסטרטגיות טיפוליות חדשות המכוונות למחלה נפוצה וקטלנית זו.
אורגניזם	אדם
רקמה	קולון
מחלה	קרצינומה של המעי הגס
מילים נרדפות	RKOE6

מורפולוגיה	אפיתל
תכונות צמיחה	דבק

ציטוט	RKO-E6 (מספר קטלוגי Cytion 305135)
רמת בטיחות ביולוגית	2
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_3787
סטטוס GMO	GMO-S1: קו תאים זה של קרצינומה קולורקטאלית אנושית (RKO-E6) מכיל פלסמיד המקודד HPV-16 E6 תחת בקרת מקדם CMV, הכולל ככל הנראה רצפים של CMV ו-HPV-6, המאפשרים מחקרים על טרנספורמציה תלוית E6. המבנה משולב באופן יציב. סיווג זה חל רק בגרמניה ועשוי להיות שונה במקומות אחרים.

תרבית ביניים	EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
תוספים	הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA
חומר מפרק	אקוטאז
תת-תרבות	הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
יחס פיצול	1:2 עד 1:4
חידוש נוזלים	2 עד 3 פעמים בשבוע
חומר הקפאה	כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
הפשרה וגידול תאים	ודא שהבקבוקון נשאר קפוא לחלוטין בעת המסירה, שכן התאים נשלחים בקרח יבש כדי לשמור על טמפרטורה אופטימלית במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, אחסן את הבקבוקון הקריוגני מיד בטמפרטורה נמוכה מ-150°C כדי להבטיח את שמירת שלמות התאים, או המשך לשלב 3 אם נדרשת תרבית מיידית. לצורך תרבית מיידית, הפשיר את הבקבוקון במהירות על ידי טבילתו באמבט מים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם מים נקיים וחומר אנטי-מיקרוביאלי, תוך ערבוב עדין במשך 40-60 שניות עד שנותר גוש קרח קטן. בצע את כל השלבים הבאים בתנאים סטריליים במנדף, וחטא את בקבוקון הקריוואלי באתנול 70% לפני הפתיחה. פתח בזהירות את הבקבוקון המחוטא והעבר את תמיסת התאים לצינור צנטריפוגה בנפח 15 מ"ל המכיל 8 מ"ל של מצע תרבית בטמפרטורת החדר, תוך ערבוב עדין. סובבו את התערובת בצנטריפוגה ב-300 x g למשך 3 דקות כדי להפריד את התאים, וזרקו בזהירות את הנוזל העליון המכיל את שאריות מצע ההקפאה. השרו בעדינות את משקע התאים ב-10 מ"ל של מצע תרבית טרי. עבור תאים נצמדים, חלקו את התמיסה בין שני צלוחיות תרבית T25; עבור תרבויות תמיסה, העבירו את כל המצע לצלוחית T25 אחת כדי לקדם אינטראקציה וצמיחה יעילות של התאים. הקפידו על פרוטוקולי תת-תרבות קבועים להמשך צמיחה ותחזוקה של קו התאים, כדי להבטיח תוצאות ניסוי אמינות.
אטמוספירת דגירה	37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.
ציפוי בקבוק	אף אחד
הליך ההקפאה	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי משלוח	שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
תנאי אחסון	לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

עקרות	זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה. כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

מספר לוט	סוג התעודה	תאריך	מספר קטלוגי
305135-260124	תעודת ניתוח	23. May. 2025	305135

תאי RKO-E6

מידע כללי

מאפיינים

נתונים רגולטוריים

נתונים ביו-מולקולריים

טיפול

בקרת איכות וניתוח מולקולרי

תעודת ניתוח (CoA)